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分类号：S855.3单位代码：10193密级：公开学号：20140791专业硕士学位论文白城地区四种强制免疫动物疫病的流行病学调查及防控建议TheepidemiologicalinvestigationoffourcompulsoryimmunizationanimalepidemicsinBaichengandsuggestionsofpreventionandcontrol作者姓名：康超学位类别：兽医硕士专业名称：兽医硕士研究方向：兽医硕士指导教师：赵权教授所在学院：动物科学技术学院二零一六年五月 本研究由吉林省重点科技攻关项目（20140204068NY）资助。ThisworkwassupportedbyKeyScientificandTechnologicalProjectofJilinprovince(20140204068NY). 独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立进行研究所取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢所列内容外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得吉林农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本学位论文所有内容若有不实之处，本人愿意承担一切相关法律责任和后果。学位论文作者签名：签字日期：年月日关于学位论文使用授权的声明1、本人完全了解吉林农业大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究生在校攻读学位期间所完成的论文及相关成果的知识产权属吉林农业大学所有，并同意将本论文的版权授权给吉林农业大学，学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。2、本人（同意/不同意，务必打印后填写）吉林农业大学将本论文版权授权给不同媒体进行电子出版、多媒体出版、网络出版以及其他形式出版（涉密学位论文解密后应遵守此协议）。3、本人声明毕业后若发表在攻读研究生学位期间完成的论文及相关的学术成果，必须以吉林农业大学作为第一署名单位。学位论文作者签名：签字日期：年月日指导教师签名：签字日期：年月日 摘要猪瘟是一种感染猪和野猪的传染性疾病，急性型病例以败血性变化为特性，慢性型病例以纤维素性坏死性肠炎为特性。猪瘟强毒对家兔的致病能力比较弱，猪瘟弱毒对家兔的致病能力比较强。其病原CSFV对酸碱敏感，对热敏感，2%氢氧化钠是十分适宜的消毒剂。该病以直接接触为传播的主要方式，持续性感染是目前引起猪瘟流行的主要原因之一，并常继发副伤寒及巴氏杆菌病，是严重危害养猪业的重要疫病之一。口蹄疫是由FMDV造成的感染偶蹄动物的人畜共患病。此病宿主范围广，可感染多达30多种动物；传播速度快，可以通过呼吸道、消化道、损伤的粘膜和皮肤等感染；该病不同种间可以传播；该病较多时表现大流行性；该病的流行具有一定的季节性差异；患病动物多呈现“虎斑心”，OIE将其列为A类传染病。猪高致病性蓝耳病是主要侵害妊娠母猪和1月龄内仔猪的由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起猪为唯一自然宿主的传染病。该病破坏免疫系统，引起猪的严重繁殖障碍和呼吸系统症状，常引发其他病原侵入形成混合感染，现已成为规模化养猪场的主要疫病之一。禽流感是由AIV引起的禽的一种突然发生、传播迅速、呈地方性流行或大流行的动物传染病。高致病性禽流感主要呈消化道、呼吸道表现，病禽产蛋率下降和高热高致死率等特点。该病持续一年都可发生，但以晚秋和冬春寒冷天气常见，缺硒是主要因素之一。OIE将其列为A类传染病，我国同时将其确定为一类动物疫病，是威胁我国甚至全球养禽业的主要疫病之一。依据《中华人民共和国动物防疫法》和农业部有关规定，我国将以上四种严重危及畜牧业发展和人们生命安全的动物疫病列为强制免疫动物疫病，由此，本试验对这四种严重影响白城市畜牧业健康发展的疫病开展调查。本试验通过填具表格、翻阅档案、电话问询等方式并配合血清学检测对白城地区2014-2015年度四种疫病的流行情况及免疫效果进行了调查。可以得出，白城地区2014-2015年度无四种疫病的发生，四种疫病应免畜禽的免疫率均达到100%，四种疫病的免疫合格率均超过85%，远超国家规定的70%的合格率水平，白城地区四种疫病免疫情况良好，处于免疫保护状态。但是，通过对不同分类免疫抗体水平的测定，可以得出规模化饲养场户的合格率远超分散养殖的农户，不同畜禽品种的合格率有差异性，不同地区的合格率差异性很大，秋季四种疫病的免疫合格率普遍高于春季。根据试验结果，提出相关的防控建议，为这些动物疫病的进一步深入研究奠定了基础，为这些动物疫病的防控工作提供借鉴。I 关键词：猪瘟，口蹄疫，猪高致病性蓝耳病，禽流感，流行病学调查，防控建议II AbstractSwinefeverisakindofinfectiousdiseaseforpigsandwildboars.Theacutecasesofthediseasearefeaturedbysepticchangeandthechroniccasesbycellulosenecrotizingenteritis.Pathogenicabilityofvirulentswinefevervirusisweakonrabbitswhilethatofattenuatedswinefevervirusisstronger.ItspathogenicvirusCSFVissensitivetoacid,baseandheat,illustratingthat2%sodiumhydroxidecouldbeanoptimaldisinfectant.Thisdiseaseismainlytransmitted,persistentinfectionindirectcontact.Inaddition,swinefeveroftencausesfollowedupparatyphoidandpasteurellosis.Andbecomesaseriousepidemicdiseaseseverelythreateningpigbreadingindustry.Foot-and-mouthdisease(FMD)isakindofzoonosisinfectingartiodactylscausedbyFMDvirus.Thediseasehasawidehostrangeandcaninfectuptomorethanthirtyspeciesofanimals;thespreadspeedisfast,throughrespiratorytract,digestivetract,damagedmucosal,skin,etc.Itcanspreadamongdifferentspecies;pandemicallyinmostcases.Theprevalenceofthisdiseasehascertainseasonaldifferences;themajorityofthediseasedanimalshavetigroidheart.HighpathogenicPRRSisaninfectiousdiseasesthatpigsareastheonlynaturalhost,whichmainlyinfringespregnantsowsandpigletswithinonemonthandiscausedbyporcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus.Thisdiseasedamagestheimmunesystem,causingseriousreproductivedisordersandrespiratorysymptoms,andfinallyleadingtootherpathogeninvasiontoformmixedinfectionwhichwasoneofthemainepidemicdiseasesinlarge-scalepigfarms.AvianinfluenzacausedbyAIVisakindofinfectiousdiseasewithsuddenoccurenceandrapidspreadingspeedintheformoflocalpandemicorepidemicmanner.Highpathogenicbirdfluistharacterizedbysymptomsindigestiveandrespiratorytracts,thedecreasedlayingrate,highfeverandmortalityrate.Thisdiseasemayoccurinawholeyear,especiallylateautumn,springandwinter,duetoIII seleniumdeficiency.IthasbeenclassifiedasClass-AinfectiousdiseasebyOIEandasClass-Ianimalepidemicdiseasebyourcountry,whichthreatensthepoultryindustryaroundourcountryandeventhewholeworld.AccordingtoAnimalEpidemicPreventionLawofthePeople’sRepublicofChinaandrelevantregulationsofMinistryofAgriculture,ourcountryhasclassifiedthefourepidemicdiseasesabove,whichseriouslyendangerpeople'shealthandthedevelopmentofbreedingindustry,ascompulsoryvaccinationanimaldiseases.Thus,thisstudyinvestigatedfourepidemicdiseasesthatseriouslythreatenthedevelopmentofanimalhusbandryinBaichengCity.Prevalencestateandimmuneeffectsofthefourepidemicdiseasesof2014-2015inBaichengwerestudiedbyfillingforms,readingarchives,telephoneinquiries,andserologicaltest.Inyear2014-2015,therewasnooccurrenceofthefourepidemicdiseasesinBaichengregion,theimmunizationrateoflivestockandpoultryreached100%,theimmunequalifiedratewasmorethan85%whichexceeded70%thestatelevel,andtheimmuneconditionswereexpected.Butbydirectingtitersofdifferentimmuneantibody,thequalifiedrateofthelarge-scalefeedingfarmswasextremelyhigherthanfree-rangefarms.Therewassignificantdifferenceinqualifiedrateamongdifferentbreedsandregions.Theimmunequalifiedrateofepidemicdiseasesinautumnwashigherthanthatinspring.Relevantpreventionandcontrolrecommendationsweresuggestedbasedontheaboveresults,whichlaysafoundationforstudyingdiseasesfurtherandprovidesreferencesforpreventingandcontrolingtheepidemicdiseases.Keywords:Swinefever,Foot-and-mouthdisease,HighpathogenicPRRS,AvianInfluenza,epidemiologicalInvestigation,preventionandcontrolrecommendationsIV 目录前言...........................................................................................................................1第一篇文献综述.........................................................................................................31猪瘟......................................................................................................................32猪瘟免疫情况.....................................................................................................33口蹄疫.................................................................................................................44口蹄疫免疫情况.................................................................................................45猪高致病性蓝耳病.............................................................................................56猪高致病性蓝耳病免疫情况.............................................................................57禽流感.................................................................................................................68禽流感免疫情况.................................................................................................6第二篇研究内容.........................................................................................................7第一章四种疫病流行情况的调查.............................................................................71.1方式.................................................................................................................71.2结果.................................................................................................................71.3讨论.................................................................................................................91.4小结...............................................................................................................10第二章四种疫病免疫情况调查...............................................................................112.1材料...............................................................................................................112.2方法...............................................................................................................132.3结果与分析...................................................................................................142.4讨论...............................................................................................................222.5小结...............................................................................................................24第三篇防控建议.......................................................................................................26结论.....................................................................................................................27参考文献.....................................................................................................................28附录.....................................................................................................................34作者简介.....................................................................................................................35致谢.....................................................................................................................36V 吉林农业大学硕士学位论文前言前言畜牧业作为农业不可或缺的部分，发展的速度及质量波及到整个农业的发展状况，当前，畜牧业已然成为农业发展程度的标杆。并且，农业部于2015年年初提出：力争在推进现代农业建设中，率先实现畜牧业现代化。与此同时，吉林省近年来以加快畜牧业大省建设为目标，先后实施了“三年攻坚”和“四年提升”计划，取得了明显成效。2014年，为了推动“放心肉”项目建设进度，促使食源性安全食品基地的建设的步伐提速，保证建设的质量优异，使我省充分提供“放心肉”，百姓切实购入“放心肉”，吉林省全面推行了免疫无口蹄疫区建设，我省畜禽养殖业的成长与改革进入到了攻坚阶段。白城市畜牧业历经多年的不懈努力，不断付出，已经成为至关关键的经济增长点。2015年度，白城市畜牧业产值总共为130亿元，畜牧业人均收入约为4000元，成为白城市有史以来的最高点。白城市畜牧业发展迎来良好的机遇期，《中国农村扶贫开发纲要》已经将白城市纳入大兴安岭南麓片区的范围，进行连片同步开发，重点推动贫困地区现代化农业畜牧业的成长。2014年发布的《吉林省西部生态经济区总体规划》，涵盖了白城市全境，规划提出发展高端精品畜牧业和高附加值农业。振兴东北下一个十年计划正在谋划出台。有利的环境优势和战略支持，给白城市现代畜牧业发展带来新机遇。并且，白城市养殖历史悠久，畜禽良种资源较多，尤其是自主培育的中国草原红牛更具有地方特色，2011年被批准为国家地理标志保护产品。“安大”肉食鸡、“佳佳香”驴肉、“向海大雁”等畜产品畅销国内外。洮南“雏鹰”400万头生猪一体化项目、通榆“咱家”5000万只有机鸡、和洮北“亚亨”肉羊项目等一批产业化大项目开工建设。白城市壮大畜牧产业的多重优势，使得白城市畜牧业已然成为白城市经济的重要组成部分，提高人均收入水平的重要途径。但是，健康畜牧业才是重中之重。按照农业部发布的“一、二、三类动物疫病病种名录”，猪瘟、口蹄疫、高[1]致病性猪蓝耳病及高致病性禽流感均被我国列为一类疫病。其中，猪瘟、口蹄疫和高致病性禽流感被OIE列为A类疫病，高致病性猪蓝耳病被OIE列为B类疫[2]病。猪瘟主要感染猪和野猪，可水平传播也可垂直传播，直接接触是该病的主要传播方式，呈现连续性及易继发性感染的特征，猪瘟病毒由Dorset和Decehweinitz[8]在1993年证实，我国在20世纪20年代首次对该病进行了报道,此后,猪瘟在全球许多国家出现,给养猪业带来巨大危害。目前，免疫该病采用的疫苗为猪瘟细胞苗，1 吉林农业大学硕士学位论文前言实践中检测其免疫抗体的方法主要为正向间接血凝实验。口蹄疫可感染多达30多种动物，主要通过粘膜和皮肤感染，呈现流传速度快、流传面积大的特点，口蹄疫在全球范围内广泛存在,再早可追溯至14-15世[15]纪，就有阿拉伯学士记录了和口蹄疫相仿的疫病，目前，免疫该病采用的疫苗主要为猪206佐剂口蹄疫疫苗和牛（羊）O型、亚洲I型双价口蹄疫疫苗，实践中检测其免疫抗体的方法主要为正向间接血凝实验。高致病性蓝耳病仅感染猪，可水平传播也可垂直传播，呈现严重繁殖障碍的特点，猪高致病性蓝耳病初次于1987年于美国被发掘,我国是在上世纪90年代[47-49]中期被传播进入,现在该病在全球内暴发和流行，目前，免疫该病采用的疫苗为蓝耳病活疫苗，实践中检测其免疫抗体的方法主要为ELISA试验方法。高致病性禽流感宿主广泛，可水平传播也可垂直传播，呈现致死率大的特性，该病于1878年在意大利首次发现，在1955年确定此“鸡瘟”疫情皆是由AIV[63]造成的。目前，免疫该病采用的疫苗为禽流感H5N1亚型灭活疫苗和H5N1+H9N2二价灭活疫苗，实践中检测其免疫抗体的方法主要为血凝试验和血凝抑制试验。四种疫病的发生均给白城地区乃至全国的养殖业带来巨大的影响及经济损失。本试验对白城地区这四种危及到畜牧业成长的国家强制免疫的动物疫病开展的流行状况调查及免疫情况监测，为这四种疫病的综合防控提供借鉴，为白城市畜禽养殖业良好的未来奠定基础。2 吉林农业大学硕士学位论文第一篇文献综述第一篇文献综述1猪瘟猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的，由患病猪和感染猪经过水平传[3-7]播或垂直传播方式感染易感猪群的接触性传染病。猪瘟该病的起源众说纷纭，[8]猪瘟病毒由Dorset和Decehweinitz在1993年证实。目前，该病已在很多发展中国家甚至世界许多国家内出现，并对发展中国家乃至全球很多国家生猪养殖[9-11]业经济带来影响。此病对不同日龄、不同品种、不同性别的猪和野猪均易感，且呈现持续感染的特点给疫病的防治工作带来很多障碍，后期还常常引起继发感染猪副伤寒、猪巴氏杆菌等病给疫病的诊断工作带来许多困扰。目前，猪瘟已被OIE列为A类疫病既务必上报的以动物为第一宿主的具有传染性特点的疫病，同[12]时，也被我国纳入一类传染病名列。猪瘟是对目前的甚至可能是未来的生猪养[13]殖业带来巨大的灾害的疫病。2猪瘟免疫情况按照农业部发布的《动物疫病防治技术规范》要求，我们釆用猪瘟正向间接[14-15][16]血凝试验（IHA）法对猪瘟免疫抗体水平进行测定。慕国辉应用猪瘟IHA检测相同母猪抗体水平的超前免疫组与非超前免疫组后代仔猪的抗体水平差异，[17]说明超前免疫能够诱导仔猪生成比较高的抗体水平;孙彬彬通过IHA对西安市[18]阎良区CSF和猪O型FMD疫苗采取相应的免疫抗体水平测定;刘杰标通过间接血凝试验针对宜州市和环江县部分猪血清样本开展免疫抗体水平的测定；田建红[19]通过间接血凝试验对北京市大兴区规模猪场猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检[20]测；路保通通过IHA对陕西省宝鸡市猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检测；吕晓[21]娟通过间接血凝试验对山西省长治市郊区猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检测；[22]何彦江通过间接血凝试验对新疆克拉玛依市克拉玛依区猪瘟疫苗免疫抗体水平进行了检测。正因为IHA方法拥有检测迅速、特异性强等特点,并且无需高昂的成本,试验员操作简起来简便，该试验方法广泛应用于各种饲养场户、动物防[18-19,23-24]疫机构以及研究人员对猪瘟效果的调查工作中。3 吉林农业大学硕士学位论文第一篇文献综述3口蹄疫口蹄疫（Food-and-MouthDisease,FMD），是由口蹄疫病毒（Foot-and-Mouth[25-26]DiseaseVirus，FMDV）引起的重点感染偶蹄动物的人畜共患传染病。口蹄疫在全球范围内广泛存在,再早可追溯至14-15世纪，就有阿拉伯学士记录了和[15]口蹄疫相仿的疫病。该病呈现传播速度快，宿主范围广，病原复杂多变，发病[27-31]率高的特点，发病率甚至高达100%，给养猪业带来颠覆性的损失。该病的不同宿主间患病症状大有不同：牛在感染口蹄疫时症状最为明显，呈“指示灯”的作用；羊在感染口蹄疫时症状不显著，呈“贮存器”的作用；猪在感染口蹄疫时[32-33]排毒数量巨大，呈“扩大器”的作用。患有口蹄疫的病畜临床表现多为皮肤和粘膜部位水泡和溃疡，尤其是口腔和蹄部的病变最为明显，幼龄动物多因心肌[34]受损而死亡率升高。同时，依据WTO/SPS原则，我国希望加快我们畜牧业相关贸易往来，展开了适用于我国和我国合作国的无疫情况的评价和估量，目前已经完成了海南、辽宁和免疫吉林永吉三个免疫无口蹄疫区及广州从化无马属动物疫病区的建设工作。目前，我省正在多措并举全方面推进免疫无口蹄疫区建设，[35]争取2016年完成建成目标，口蹄疫防控工作势在必行。4口蹄疫免疫情况目前，被认可的口蹄疫诊断方法包含有病原学诊断方法、血清学方法与分子生物学诊断方法这三个方面。血清学诊断方法以其检测速度快、检测方法方便简单、特异性强等优势应用最为普遍。与此同时，凝集试验以其快速、简便和经济[36-38]的特性在血清学诊断技术的多种测定方法中脱颖而出，是以广泛应用于临床[39]对口蹄疫免疫抗体水平的监测工作中。曹旭在内蒙古地区提取分离出牛O型口蹄病毒，制备成高免血清，用绵羊红细胞制成正向间接血凝液。利用制备的正向间接血凝液对内蒙古地区免疫口蹄疫的牛血清进行了测定，从而发现此方法能高[40效、快速测定牛血清免疫抗体水平。赵明娟等通过IHA与液相阻断ELISA方法对O型FMD免疫抗体合格率测定开展了对比试验，发现IHA方法比液相阻断ELISA[41]方法使用设备少，操作简单，价格低廉。张玉等用IHA对青海省大通县景阳镇[42]的血清样本进行了O型口蹄疫免疫抗体检测；秦荣香等用正向间接血凝试验对广西农垦永新畜牧集团有限公司的血清样本进行了O型口蹄疫免疫抗体效价的[43]测定；高得吼等用正向间接血凝试验对天水市的血清样本进行了O型口蹄疫免疫抗体检测，为临床O型口蹄疫的防控工作提供参考。按照《口蹄疫防治技术规[44]范》对O型口蹄疫免疫动物血清抗体效价的检测采用IHA方法来进行。4 吉林农业大学硕士学位论文第一篇文献综述5猪高致病性蓝耳病猪繁殖与呼吸综合征（PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS）是由套式病毒目动脉炎病毒科动脉炎病毒属的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）造成的感染猪并且只感染猪的具有高度接触性、严重繁殖受阻和明显[45-46]呼吸系统明显症状的传染病。此病大多感染种猪、繁殖母猪和仔猪这三种类型的猪。高致病性猪蓝耳病则是由毒力更加强大的变异毒株所造成的。猪高致病性蓝耳病初次于1987年于美国被发掘,我国是在上世纪90年代中期被传播进入,[47-49]现在该病在全球内暴发和流行。郭保清在1996年首次在国内分离[50-51]出PRRSV,第一次证明我国有猪繁殖与呼吸综合征在的事实。该病主要呈现严重繁殖障碍、免疫抑制、常诱发继发感染等特点。近些年来,猪蓝耳病在我国广[52]泛传播，现已然成为导致规模化养猪场繁殖障碍的严重疫病，造成养殖成本加剧，经济效益下滑的局面，给生猪养殖业带来巨大损失，现我国已将其列为一类疫病。6猪高致病性蓝耳病免疫情况[53-54]根据《猪蓝耳病诊断技术GB/T18090-2008》，采用ELISA试验方法对猪高致病性蓝耳病的免疫抗体情况开展检测，目前该方法以敏感性、准确度高、[55-56][57]简洁方便的特点广泛应用于猪高致病性蓝耳病免疫抗体的检测。赵晶通过ELISA方法对北京市大兴区某规模养猪场的猪群进行了免疫前后的抗体保护率的对比调查，得出免疫前抗体水平较低，免疫后所免群体的高致病性蓝耳病的抗体保护率能够达到95%的水平，抗体水平差异显著，疫苗免疫对提高抵御疫病能[58]力的重要性。任宇斓等通过ELISA方法对猪瘟、口蹄疫、高致病性蓝耳病这三种疫病疫苗同步分点免疫和分开组合分点免疫的副反应调查和抗体水平检测，得出三种疫苗随意组合均不会增加疫苗的副反应，三种疫苗同一时间分点免疫和间[59]隔免疫的效果最好。吴云飞等通过ELISA试验方法对四川某规模场的不同日龄的仔猪的猪瘟、O型口蹄疫和蓝耳病抗体水平进行检测，发现三种疫病的母源抗[60]体消长规律，可以给实践确定合理适宜的首免日龄提供参考。杨先富等通过ELISA试验方法对贵州省黔东南州部分养殖场选取的仔猪进行了猪瘟、口蹄疫和猪高致病性蓝耳病免疫不同剂量的疫苗，看其免疫效果的不同的研究，得出O型口蹄疫和猪高致病性蓝耳病合理范围内非大幅度提升计量，免疫效果增强，猪瘟并不明显。5 吉林农业大学硕士学位论文第一篇文献综述7禽流感禽流感（Avianinfluenza，AI）同时被称为“真性鸡瘟”，是由A型流感病毒（AIV）造成的侵害禽类的一种根据有区别的发病特征及规律分为高致病性和低致病性的人畜共患传染病。AIV属于正粘病毒科、流感病毒属的RNA病毒，此病毒可以感染家禽和野禽等所有禽类[61-62]。该病于1878年在意大利首次发[63]现，但是，是在1955年才最后确定了此“鸡瘟”疫情皆是由AIV造成的。禽流感疫情曾经于多年代、多个国家发生，20世纪时，曾经引发了三次让人记忆[64]犹新的世界性的大流行，分别于1918、1957、1968年；中国香港曾经在1997、1999年爆发过疫情，在这以后，我们国家和地球上的其他国家几乎每年都有关于禽流感疫情的有关报道。近几年来，禽流感疫情多由H5NI亚型的高致病性禽流感病毒引起，可以造成感染AIV的群体近乎全部猝死，并且，H5N1亚型的AIV能同时侵害人类，给我们人们的生命安全带来威胁，给养禽业埋下隐患，禽流感被OIE列为A类疫病，被我国列为一类疫病，已然成为危及禽类养殖业成长的主[65]要疫病之一。8禽流感免疫情况禽流感免疫抗体水平的测定工作通常选取血凝试验和血凝抑制试验（HA-HI[66]试验），其技术规范依照GB/T18936-2003进行。该试验方法因具有及时、准确、经济、易于操作和对抗体水平进行量化的优点，已在各地动物防疫监督机构[67-68][69]和养殖场广泛使用。常耀祖等用HA-HI试验检测宁夏同心县部分免疫禽流感疫苗的鸡血清的抗体效价，从而了解该地狱禽类的免疫抗体水平，为科学预防[70]和控制禽流感供应了依据与参考。费强用HA-HI试验检测山西省汾阳市鸡的禽流感免疫抗体效价，并且通过了解抗体检测的目的性、抗体检测的迫切性、抗体[71]检测的前瞻性，从而让HA-HI试验更加准确的指引实践中的免疫工作。梁明珍等用HA-HI试验检测北京市郊区鸭的禽流感免疫抗体效价，证实了水禽免疫H5N1亚型的禽流感疫苗同样可以获得让人欣慰的效果，尽管鸭等水禽在第一次接种疫苗时保护率稍低,但是，经过几次免疫，免疫应答效果可观，,能够达到躲避感染和减少伤害的目的，此次HA-HI试验在鸭等水禽的免疫抗体测定中的应用为水禽的禽流感预防和控制工作给予了有价值的数据依据。6 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容第二篇研究内容第一章四种强制免疫动物疫病的流行情况的调查1.1调查方式通过填具表格、通讯问询、查阅档案、走访问询、现场查看等方式对白城地区四种疫病的流行状况开展调查。1.2调查结果1.2.1白城地区自然情况白城地区地处吉、黑、蒙三省交界，地势多为平原和丘陵，海拔多在130米至180米间；属于温带大陆性季风天气，每年平均日照在2919.4h，每年平均[72]温度在4.9℃，每年平均降水量在407.9毫米；白城地区内有洮儿河、蛟流河等河流，流径总长度可以达到700多千米，有水库12座，大小泡沼多达300多[73]个，水资源总量可以高达22.72亿立方米/年；白城市现有的未利用土地面积可达5858.6万亩，占据了白城市土地总面积的22.28%，可复垦作为饲草料用地，同时，也可作为畜禽养殖、加工等的生产用地，不会发生由于用地紧缺不能施展而滞留畜牧业成长的情况。1.2.2社会经济情况[74]白城地区总占地面积达25758平方公里，自然屯经调查有2923个。2011~2015年，白城市畜牧业产值由78亿元增长到120亿元，农民牧业人均年收入由2646元增长到4000元，贡献十分明显。事实充分说明，白城市畜禽养殖业的成长，有利于增进农民的持续增收和贫苦地区的脱贫致富。1.2.3人力资源情况白城地区总人数达199.1万人，农业人口数量达120万人，而农村从事工作的人数只有62.5万人，大量的剩余农业人口能为畜牧产业发展提供丰富的劳动力资源，同时畜禽养殖业的成长也是解决白城市农民再就业的最佳途径。1.2.4动物防疫体系建设情况白城地区建立了较为健全的由畜牧业管理局、动物疫病预防控制中心、动物卫生监督所、公路检查站、兽医实验室，乡镇畜牧兽医站（动物卫生监督分所）和村防疫员组成的市、县、乡、村四级动物疫病防控体系。动物疫病防控队伍较7 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容为健全，市级及各县（市、区）动物疫病预防控制中心共有人员200人，80个乡镇畜牧兽医站共计人数762人，930个村共计防疫员1148人；市级及各县（市、区）动物卫生监督所及5个公路动物卫生监督所检查站共有人员320人，其中监督员115人、检疫员205人。1.2.5畜禽生产情况畜禽种类2014年末存栏量2015年末存栏量猪57.93万头48.49万头牛13.94万头18.98万头羊288.72万只387.10万只禽848.02万只809.71万只1.2.62014-2015年度四种疫病流行情况调查范围发病数死亡数诊疗屠宰规模散养总规模散养总疫病名称规模场散养户机构场场户数场户数口蹄疫合434160854222227000000计其中，猪1527419684101000000牛61169476963000000羊221697116963000000猪瘟129741969656000000猪高致病129741967356000000性蓝耳病禽流感合18923969711950000000计其中，鸡1891322637350000000鸭055483230000000鹅0519492300000008 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容1.2.7四种疫病免疫情况疫病2014年度2015年度名称应免疫数万实际免疫数应免疫数实际免疫数免疫免疫率头（只）万头（只）万头（只）万头（只）率口蹄疫合计857.51857.51100%835.01835.01100%其中：猪140.35140.35100%90.8590.85100%牛38.3838.38100%34.9334.93100%羊678.78678.78100%709.23709.23100%猪瘟140.51140.51100%90.1890.18100%猪高致病性85.7485.74134.89134.89100%100%蓝耳病1564.02禽流感合计2007.82007.8100%1564.02100%1781.781781.78其中：鸡100%1384.371384.37100%95.39鸭122.13122.13100%95.39100%鹅103.89103.89100%84.2684.26100%1.3讨论1.3.1通过调查，得以发现白城地区鲜明的政策支持；优厚的自然资源；充沛的人力资源；强大的部门保障使得白城地区畜牧业具有强大的发展优势和广袤的发展空间，在吉林省畜牧业建设中成为主力军，给白城地区经济发展、人民生活水平的提高带来不可磨灭的作用，甚至为白城地区这个以第一产业为主的畜牧业大市的人民生活提供了保障。1.3.2本次调查了白城地区猪瘟、口蹄疫、猪高致病性蓝耳病和高致病性禽流感9 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容的流行情况：猪瘟调查了129个规模场，74196个散养户、96个诊疗机构和56个屠宰场；口蹄疫调查了434个（猪152个、牛61个、羊221个）规模场，160854个（猪74196个、牛16947个、羊69711个）散养户、222个（猪84个、牛69个、羊69个）诊疗机构和227个（猪101个、牛63个、羊63个）屠宰场；猪高致病性蓝耳病调查了129个规模场，74196个散养户、73个诊疗机构和56个屠宰场；禽流感调查了189个（鸡189个、鸭0个、鹅0个）规模场，239697个（鸡132263个、鸭55483个、鹅51949个）散养户、119个（鸡73个、鸭23个、鹅23个）诊疗机构和50个（鸡50个、鸭0个、鹅0个）屠宰场。经过调查可以发现白城市2014-2015年度猪牛羊禽并未有四种疫病发病症状，四种疫病发病数均为0，更没有出现四种疫病症状且死亡的畜禽，四种疫病死亡数为0。1.3.3本次调查了白城地区2014-2015年度四种疫病免疫情况，可以看出，白城地区达到了农业部印发的《国家动物疫病强制免疫计划》的应该免疫畜禽免疫密度要达到100%的要求。1.4小结通过填具表格、通讯问询、查阅档案、走访问询、现场查看等方式对白城地区四种疫病的流行状况开展的调查中，可以发现白城地区畜牧业发展有着得天独厚的自然优势，数量庞大的人力资源，与时俱进的政策优势，更突出了白城地区畜禽养殖业成长刻不容缓以及不可或缺。在2014-2015年度，通过对多个猪牛羊禽的规模场、散养户、诊疗机构和屠宰场的调查，白城地区并无猪瘟、口蹄疫、高致病性蓝耳病、禽流感的发病和死亡情况。白城地区这四种强制免疫动物疫病的免疫情况均达到了农业部印刷并发布的《国家动物疫病强制免疫计划》中应当免疫的畜禽免疫密度务必达到100%的要求。10 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容第二章四种强制免疫动物疫病免疫抗体水平的检测2.1材料2.1.1血清样品2014-2015年间采自白城市洮北区、洮南市、大安市、通榆县、镇赉县等5个县（市、区）的不同批次送检的2800份血清样品，其中：猪血清：共计800份。分别从五个县（市、区）采集样本，其中，160份来自洮北区、160份来自洮南市、160份来自大安市、160份来自通榆县、160份来自镇赉县。来自规模性养殖场（户）共计有600份，来自散养户共计有200份。400份采自春季，400份采自秋季。牛血清：共计400份。其中，80份来自洮北区、80份来自洮南市、80份来自大安市、80份来自通榆县、80份来自镇赉县。200份采于春季，200份采于秋季，均来自规模养殖场。羊血清：共计800份。分别从五个县（市、区）采集样本，其中，160份来自洮北区、160份来自洮南市、160份来自大安市、160份来自通榆县、160份来自镇赉县。400份采于春季，400份采于秋季，均来自规模养殖场。禽血清：共计1600份。分为鸡800份，水禽800份。分别从五个县（市、区）采集样本，其中，320份来自洮北区、320份来自洮南市、320份来自大安市、320份来自通榆县、320份来自镇赉县。来自规模养殖场（户）的血清样本共计达1000份，来自散养户的血清样本共计达600份。800份采自春季，800份采自秋季。2.1.2主要试验试剂猪瘟间接血凝抗体检测试剂盒购自兰州兽医研究所；口蹄疫O型间接血凝抗体检测试剂盒购自兰州兽医研究所；猪繁殖与呼吸综合征ELISA抗体检测试剂盒购于康百得生物科技有限公司；高致病性禽流感免疫抗体诊断液购自维科生物技术开发公司。11 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容2.1.3主要试验仪器仪器名称型号及产地各型号微量可调移液器上海大龙冰箱JX18青岛海尔股份有限公司电子天平上海AR2140奥豪斯国际贸易微量震荡器HY-B型江苏省金坛市离心机TDL-52长沙易达仪器酶标仪MB-580深圳市汇松科技发展有限公司2.1.4主要溶液的配制（1）PH7.2、0.01mol/LPBS缓冲液配制25×PB：称量2.74gNa2HPO4和0.79gNaH2PO4加蒸馏水至100ml。配制1×PBS：量取40ml的25×PB，加入8.5gNaCl，加蒸馏水至1000ml。用氢氧化钠或盐酸调pH至7.2。灭菌或过滤。PBS一经使用，于4℃保存不超过3周。（2）阿氏（Alsevers）液配制葡萄糖2.05g柠檬酸钠0.8g柠檬酸0.055g氯化钠0.42g加蒸馏水至100ml，散热溶解后调pH至6.1,69kPa15min高压灭菌，4℃保存备用。（3）1%鸡红细胞悬液采集无禽流感抗体的体征正常的无疫病的公鸡的血液和相同体积的阿氏液混匀于一起，然后用PH7.2、0.01mol/LPBS液充分洗涤3次，其中每一次都进行一千转离心十分钟，之后由PBS液配制成体积分数是1%的鸡红细胞悬液，于4℃保存备用。12 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容2.2方法2.2.1样本采集猪血清样本的采集：于猪前腔静脉，通过无菌采集血清样本3-5ml，在室内温度下放置大约3-5h或者通过3000r/min离心力析出血清，取其上清液，将其置于灭菌的离心管内，逐份进行编号，置于-20℃冰箱内存放备用。牛血清样本的采集：于牛尾静脉，通过无菌采集血清样本3-5ml，在室内温度下放置大约3-5h或者通过3000r/min离心力析出血清，取其上清液，将其置于灭菌的离心管内，逐份进行编号，置于-20℃冰箱内存放备用。羊血清样本的采集：于羊颈静脉，通过无菌采集血清样本3-5ml，在室内温度下放置大约3-5h或者通过3000r/min离心力析出血清，取其上清液，将其置于灭菌的离心管内，逐份进行编号，置于-20℃冰箱内存放备用。禽血清样本的采集：于禽类翼下静脉，通过无菌采集血清样本3-5ml，在室内温度下放置大约3-5h或者通过3000r/min离心力析出血清，取其上清液，将其置于灭菌的离心管内，逐份进行编号，置于-20℃冰箱内存放备用。2.2.2样本血清学检测2.2.2.1猪瘟免疫抗体检测应用IHA测定猪血清样本的猪瘟免疫抗体水平，实验步骤详见产品说明书。2.2.2.2口蹄疫免疫抗体检测应用IHA测定猪、牛、羊血清样本的O型口蹄疫的免疫抗体水平，实验步骤详见产品说明书。2.2.2.3猪高致病性蓝耳病抗体检测应用ELISA法检测猪血清样本的猪高致病性蓝耳病免疫抗体水平，操作步骤详见产品的说明书。2.2.2.4禽流感免疫抗体检测应用HA-HI试验检测禽血清样本的H5亚型禽流感的免疫抗体水平，按照《高致病性禽流感诊断技术（GB/T18936-2003）》中的操作步骤和结果判定标准，开展H5亚型禽流感的免疫抗体情况的实验室测定。13 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容2.3结果与分析2.3.1猪瘟血清学检测结果2.3.1.1不同饲养方式的样本的猪瘟免疫抗体合格率在本试验对800份猪血清（600份来自规模场，200份来自散养户）进行了猪瘟免疫抗体检测，其中687份合格，合格率为85.88%（687/800）；其中规模场合格率为87.00%（522/600），散养户合格率为82.50%（165/200）,规模场的合格率高于散养户的合格率。表1-1饲养方式与猪瘟免疫抗体合格率的关系Table1-1RelationsbetweenCSFpassrateandfeedingmodel来源样本数合格数合格率（%）规模场60052787.83散养户20016582.50合计80069286.502.3.1.2不同地区的样本的猪瘟免疫抗体合格率本试验800份猪血清中洮北区的合格率达92.50%（148/160），大安市的合格率是75.00%（120/160），洮南市的合格率为95.00%（152/160），通榆县的合格率为92.50%（148/160），镇赉县的合格率为77.5%（124/160）。洮南市猪瘟的免疫合格率超过其他地区，并远超部分地区。表1-2地区与猪瘟免疫抗体合格率的关系Table1-2RelationsbetweenCSFpassrateandregions来源样本数合格数合格率（%）洮北区16014892.50大安市16012075.00洮南市16015295.00通榆县16014892.50镇赉县16012477.5014 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容2.3.1.3不同年度的样本的猪瘟免疫抗体合格率本研究800份猪血清样品中2014年度的合格率为84.00%（336/400）,2015年度的合格率为89.00%（356/400）。2015年度猪瘟的免疫合格率高于2014年度的猪瘟免疫合格率。表1-3年度与猪瘟免疫抗体合格率的关系Table1-3RelationsbetweenCSFpassrateandyears年度样本数合格数合格率（%）2014年度40033684.002015年度40035689.002.3.1.4不同季节的样本的猪瘟免疫抗体合格率本研究800份猪血清样品中春季样本的合格率为86.25%（345/400），秋季样本的合格率为86.75%（347/400）。秋季猪瘟的免疫合格率高于春季，但差异不大。表1-4季节与猪瘟免疫抗体合格率的关系Table1-4RelationsbetweenCSFpassrateandseasons季节样本数合格数合格率（%）春季40034586.25秋季40034786.752.3.2口蹄疫血清学检测结果2.3.2.1不同畜种的口蹄疫免疫抗体合格率在本次研究中，共计对2000份猪、牛、羊血清样本（800份猪血清，400份牛血清，800份羊血清）进行了口蹄疫免疫抗体检测，其中1700份合格，合格率为85.00%（1700/2000）；其中猪合格率为78.50%（628/800），牛合格率为91.00%（364/400），羊合格率为88.50%（708/800），牛羊口蹄疫的免疫合格率远高于猪的免疫合格率。15 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表2-1畜禽品种与口蹄疫免疫抗体合格率的关系Table2-1RelationsbetweenFMDpassrateandspecies来源样本数合格数合格率（%）猪80062878.50牛40036491.00羊80070888.50合计2000170085.002.3.2.2不同饲养方式的样本的口蹄疫免疫抗体合格率在本试验对2000份血清样本（1800份来自规模场，200份来自散养户）开展口蹄疫免疫抗体检测，规模场的合格率为88.00%（1584/1800），散养户合格率为58.00%（116/200），规模场的免疫合格率远高于散养户的免疫合格率。表2-2饲养方式与口蹄疫免疫抗体合格率的关系Table2-2RelationsbetweenFMDpassrateandfeedingmodel来源样本数合格数合格率（%）规模场1800158488.00散养户20011658.002.3.2.3不同地区的样本的口蹄疫免疫抗体合格率本试验2000份血清样本中洮北区的合格率达85.00%（340/400），大安市的合格率达85.00%（340/400），洮南市的合格率为95.00%（380/400），通榆县的合格率为78.00%（312/400），镇赉县的合格率为82.00%（328/400）。洮南市口蹄疫的免疫合格率超过其他地区，并远超部分地区。16 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表2-3地区与口蹄疫免疫抗体合格率的关系Table2-3RelationsbetweenFMDpassrateandregions来源样本数合格数合格率（%）洮北区40034085.00大安市40034085.00洮南市40038095.00通榆县40031278.00镇赉县40032882.002.3.2.4不同年度的样本的口蹄疫免疫抗体合格率本研究2000份血清样品中2014年度的合格率为85.20%（852/1000）,2015年度的合格率为84.80%（848/1000）。2014年度与2015年度的口蹄疫免疫合格率基本持平。表2-4年度与口蹄疫免疫抗体合格率的关系Table2-4RelationsbetweenFMDpassrateandyears年度样本数合格数合格率（%）2014年度100085285.202015年度100084884.802.3.2.5不同季节的样本的口蹄疫免疫抗体合格率本研究2000份血清样品中春季样本的合格率为83.50%（835/1000），秋季样本的合格率为86.50%（865/1000）。秋季口蹄疫的免疫合格率高于春季，但差异不大。17 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表2-5季节与口蹄疫免疫抗体合格率的关系Table2-5RelationsbetweenFMDpassrateandseasons季节样本数合格数合格率（%）春季100083583.50秋季100086586.502.3.3猪高致病性蓝耳病血清学检测结果2.3.3.1不同饲养方式的样本的猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率在本试验对800份猪血清（600份来自规模场，200份来自散养户）开展猪高致病性蓝耳病免疫抗体测定，其中712份合格，合格率为89.00%（712/800）；其中规模场合格率为90.83%（545/600），散养户合格率为83.50%（167/200），规模场猪高致病性蓝耳病的免疫合格率高于散养户。表3-1饲养方式与猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率的关系Table3-1RelationsbetweenPRRSpassrateandfeedingmodel来源样本数合格数合格率（%）规模场60054590.83散养户20016783.50合计80071289.002.3.3.2不同地区的样本的猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率本试验800份猪血清中洮北区的合格率达92.50%（148/160），大安市的合格率达87.50%（140/160），洮南市的合格率为95.00%（152/160），通榆县的合格率为90.00%（144/160），镇赉县的合格率为80.00%（128/160）。洮南市的猪高致病性蓝耳病免疫合格率高于其他地区。18 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表3-2地区与猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率的关系Table3-2RelationsbetweenPRRSpassrateandregions来源样本数合格数合格率（%）洮北区16014892.50大安市16014087.50洮南市16015295.00通榆县16014490.00镇赉县16012880.002.3.3.3不同年度的样本的猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率本研究800份猪血清样品中2014年度的合格率为85.50%（342/400）,2015年度的合格率为92.50%（370/400）。2015年度的猪高致病性蓝耳病免疫合格率高于2014年度的猪瘟免疫合格率，但是差异并不明显。表3-3年度与猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率的关系Table3-3RelationsbetweenPRRSpassrateandyears年度样本数合格数合格率（%）2014年度40034285.502015年度40037092.502.3.3.4不同季节的样本的猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率本研究800份猪血清样品内春季样本的合格率达88.00%（352/400），秋季样本的合格率达90.00%（360/400）。秋季猪高致病性蓝耳病免疫合格率高于春季，但差异不大。19 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表3-4季节与猪高致病性蓝耳病免疫抗体合格率的关系Table3-4RelationsbetweenPRRSpassrateandseasons季节样本数合格数合格率（%）春季40035288.00秋季40036090.002.3.4高致病性禽流感血清学检测结果2.3.4.1不同畜种的禽流感免疫抗体合格率在本次研究中，共计对1600份鸡和水禽血清样本（800份鸡血清，800份水禽血清）进行了H5NI型禽流感免疫抗体检测，其中1524份合格，合格率为95.25%（1524/1600）；其中鸡合格率为97.50%（780/800），水禽合格率为93.00%（744/800），鸡高致病性禽流感免疫合格率高于鸭等水禽。表4-1畜禽品种与高致病性禽流感免疫抗体合格率的关系Table4-1RelationsbetweenAIpassrateandspecies来源样本数合格数合格率（%）鸡80078097.50水禽80074493.00合计1600152495.252.3.4.2不同饲养方式的样本的禽流感免疫抗体合格率在本试验对1600份血清样本（1000份来自规模场，600份来自散养户）开展H5NI型高致病性禽流感免疫抗体检测，其中规模场合格率为96.50%（965/1000），散养户合格率为93.17%（559/600），规模场禽流感的免疫合格率高于散养户。20 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表4-2饲养方式与高致病性禽流感免疫抗体合格率的关系Table4-2RelationsbetweenAIpassrateandfeedingmodel来源样本数合格数合格率（%）规模场100096596.50散养户60055993.172.3.4.3不同地区的样本的禽流感免疫抗体合格率本试验1600份血清样本中洮北区的合格率为93.75%（300/320），大安市的合格率为96.25%（308/320），洮南市的合格率为98.75%（316/320），通榆县的合格率为100%（320/320），镇赉县的合格率为87.50%（280/320）。通榆县、洮南市的口蹄疫免疫合格率高于其他地区。表4-3地区与高致病性禽流感免疫抗体合格率的关系Table4-3RelationsbetweenAIpassrateandregions来源样本数合格数合格率（%）洮北区32030093.75大安市32030896.25洮南市32031698.75通榆县320320100镇赉县32028087.502.3.4.4不同年度的样本的禽流感免疫抗体合格率本研究1600份血清样品中2014年度的合格率为95.50%（764/800）,2015年度的合格率为95.00%（760/800）。2014年度与2015年度的口蹄疫免疫合格率基本持平，无差异。21 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容表4-4年度与高致病性禽流感免疫抗体合格率的关系Table4-4RelationsbetweenAIpassrateandyears年度样本数合格数合格率（%）2014年度80076495.502015年度80076095.002.3.4.5不同季节的样本的禽流感免疫抗体合格率本研究1600份血清样品中春季样本的合格率为94.50%（756/800），秋季样本的合格率为96.00%（768/800）。秋季高致病性禽流感免疫合格率高于春季，但差异不大。表4-5季节与高致病性禽流感免疫抗体合格率的关系Table4-5RelationsbetweenAIpassrateandspecies季节样本数合格数合格率（%）春季80075694.50秋季80076896.002.4讨论2.4.1白城地区四种强制免疫动物疫病免疫抗体检测总体情况本试验中，白城地区猪瘟、口蹄疫、猪高致病性蓝耳病和高致病性禽流感这四种强制免疫动物传染病的免疫合格率分别为86.50%、85%、89%和95.25%，都超过并远高于农业部印刷并发行《国家动物疫病强制免疫计划》中免疫抗体合格率整年持续超过70%的规定，免疫情况较好。但是，由于样本的来源不同，采集的年度不同、季节不同等多种因素导致采集样本的免疫抗体合格率的差异性，为今后四种疫病的防控提供有效参考，作为有力借鉴。2.4.2白城地区四种强制免疫动物疫病免疫效果的畜种差异性本试验中，口蹄疫和禽流感这两种疫病血清样本分别采集于不同畜种，口蹄疫血清样本共计2000份，猪血清样本数量为800份、牛血清样本数量为400份、羊血清样本数量为800份；禽流感血清样本数量为1600份，鸡血清样本数量为22 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容800份、水禽血清样本数量为800份。本试验所得成果可以看出，牛羊的O型口蹄疫免疫抗体合格率远高于猪的FMD合格率水平，一方面是猪和牛羊接种的口蹄疫疫苗甚是不同，经调查，白城地区2014-2015年度猪接种的是O型206佐剂疫苗，而我区给牛羊接种的是牛羊O型亚洲I型二价疫苗。日前,口蹄疫疫苗的种类多多，有口蹄疫灭活疫苗、口蹄疫弱毒疫苗，还有基因工程疫苗、合成肽疫[75-80]苗、基因缺失疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗等新型疫苗，FMDV经传代细胞繁殖，通过消灭活性，添加佐剂或经油乳化制成的灭活疫苗在实践中应用居多[81-85]。同时，由于口蹄疫血清型众多并且各血清型疫苗交叉保护能力较小，所以现在为了节约人力物力、避免操作遗漏，现在无论国内还是国际上对联苗的研究[86][87]力度不断加大，研究进展不断加快。张仕勋等对牛羊口蹄疫二价苗注射试验中发现中牧集团牛羊口蹄疫O型亚洲I型二价灭活疫苗疫苗副作用小，局部炎症异常反应率及反应死亡发生率小，安全、可靠；首免机体的免疫应答比率可[88-89]以超过60%；免疫保护率可达33%。黄炯等通过对口蹄疫O型、AsiaI型二价灭活疫苗的研制与应用发现，口蹄疫O型、AsiaⅠ型二价灭活疫苗的护佑能力比普通O型206佐剂疫苗佐剂疫苗组的护佑能力略胜一筹。另一方面是是因为牛羊规模化比重较高，血清样本均采集于规模养殖场（户），而猪血清样本一部分采自散养户。鸡的高致病性禽流感的免疫合格率高于水禽（多为鸭）的合格率，可能由以下原因造成：采集样本方面，鸡血清样本均采集于规模场，而鸭血清样本75%来源于散养户；采集的鸡血清样本多来自蛋鸡养殖场，蛋鸡的养殖周期远长于农户散养的鸭的养殖周期，鸭的养殖周期短，补栏频率高，使得鸡的免疫密度高于鸭[90]的免疫密度；李莹等对多种野生雏鸟类进行禽流感H5N1亚型疫苗免疫并测其免疫抗体水平，得出种属间具有免疫差异性，可能与生理方面的因素和本身的[91]免疫机制不同息息相关；梁明珍等通过对当前鸭的禽流感免疫抗体测定的研究发现，日前,鸭禽流感的免疫抗体测定主要是参考鸡的免疫程序形成的监测体系，现在对水禽注射疫苗后，免疫抗体效价的测定仍然欠缺充分多的实验根据，例如是不是应该以同源红细胞来测定其禽流感疫苗免疫效力评估方面期待会有更加丰富的试验研究及试验数据作为支撑。2.4.3白城地区四种强制免疫动物疫病免疫效果的饲养方式差异性本试验分别对来源于规模场和散养户的猪牛羊禽血清样本开展CSF、FMD、PRRS和AI这四种强制免疫动物传染病免疫抗体效价的检测，猪瘟规模场的合格率高于农户分散养殖的合格率（82.50%）可以达到87.83%；口蹄疫规模场的合格率高于农户分散养殖的合格率（58%）可以达到88%；猪高致病性蓝耳病规模23 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容场的合格率高于农户分散养殖的合格率（83.5%）可以达到90.83%；高致病性禽流感规模场的合格率高于农户分散养殖的合格率（93.17%）可以达到96.5%，可以发现四种疫病来源于规模场的样本的合格率均高于来源于散养户的血清样本的合格率。规模场（户）主观方面，防疫意识强，能认识到预防的重要性，对防疫工作重视度高，配合度强；客观方面，规模场一般资金充裕、制度严格、免疫程序规范，保证了四种疫病的免疫率，造就了四种疫病的高免疫合格率。谭铁兵[92]等通过对不同饲养条件下家禽H5禽流感免疫效果的研究得出规模肉鸡场比养殖户分散养殖的鸡的血凝抑制免疫抗体合格率超出甚多。2.4.4白城地区四种强制免疫动物疫病免疫效果的地区差异性在本试验中，分别对2014-2015年度来源于白城地区内不同县（市、区）的血清样本开展了CSF、FMD、PRRS和AI这四种强制免疫动物疫病的免疫抗体的测定，发现不同地区免疫合格率区别较大，部分地区四种疫病的合格率均较高，部分地区四种疫病的合格率均较低。这与多方面因素有关，主观因素，白城地区内部分偏远乡镇，防疫人员流动性大，防疫人员技术素养不达标，对防疫工作没有充分的重视程度，缺少积极的工作态度，导致部分乡镇防疫工作的落后；客观因素，部分地区防疫经费短缺，使得防疫人员不足，动物防疫基础设施欠缺，给防疫工作带来障碍，使得防疫工作受阻，未得到应有的防疫效果。同时在饲养户层面，部分乡镇畜牧业不发达，规模化比重不高，多以传统的饲养方式呈现，饲养户对动物疫病的认识度不够，重视度欠缺，配合度不足，给防疫工作的推进制造困阻。2.4.5白城地区四种强制免疫动物疫病免疫效果的季节差异性经本试验调查可以发现四种疫病秋季的免疫合格率均超过春季的免疫合格率，这可能与春季天气寒冷，是疫病易发季节，环境因素造成畜禽免疫力低下，使得免疫效果受到影响。同时，受市场方面影响，2015年度一季度末开始，生猪行情触底反弹，形势大好，大多养殖户选择出栏，再重新购入仔猪，而春防工作多于4月末结束，不能及时对新补栏畜禽进行补免，导致春防后抽样测定时免疫抗体水平的良莠不齐。2.5小结2.5.1白城地区2014-2015年度CSF、FMD、PRRS和AI这四种疫病的免疫合格率均超过85%水平，远超国家规定的70%的水平，证明白城地区四种疫病免疫情况较好，均能达到免疫保护效果，处于免疫保护状态。24 吉林农业大学硕士学位论文第二篇研究内容2.5.2不同畜种间疫病的免疫合格率有差异，O型口蹄疫抗体检测牛羊免疫合格率远高于猪的免疫合格率，H5亚型高致病性禽流感免疫水平鸡的免疫合格率远高于鸭等水禽的免疫合格率。2.5.3规模场的免疫合格率不同疫病不同畜种均超过散养户的免疫合格率水平。2.5.4不同地区四种疫病的免疫合格率均有差异，部分地区不同疫病不同年度合格率均较高。2.5.5四种疫病秋季免疫合格率水平全部超过春季免疫合格率水平。25 吉林农业大学硕士学位论文第三篇防控建议第三篇防控建议根据对白城地区四种动物疫病的流行情况及免疫情况的调查，依据所得试验结果，对这四种动物疫病的防控工作提出一些建议，以供参考：首先，保障防疫专项资金的充足，充足的防疫工作专项资金是动物疫病防控工作的前提，只有资金到位才能保证防疫设施的充足、防疫人员的充裕、防疫工作的顺利开展；其次，保证防疫专职人员的素养，防疫工作人员是防疫工作的“灵魂”，是防疫工作的核心所在，要保证防疫人员的认知度，主观上意识到动物疫病防控工作的特殊性、迫切性、不竭性，时刻保持对疫病预防与控制工作的使命感；要增强防疫工作人员中充当专业技术人员所占的比例；要增加专业技术培训机会，避免防疫员知识老化，保证防疫人员的专业素养，较高的专业水平和技术能力是防疫人员开展疫病防控工作的基础。防疫人员只有在思想上时刻警醒、与时俱进、保持着高昂的工作态度、严谨的工作作风，在行动上积极提高技术水平和工作能力，才能保障疫病防控工作的高效率、高质量、高水平。再次，争取畜禽管理者的配合。畜禽管理者的支持是疫病防控工作的动力，是疫病防控工作的“强心剂”。畜禽养殖人员对疫病防控工作重要性的认识，对疫病防控工作的配合，推动疫病防控工作的进展，在养殖户和防疫人员的共同努力下，精诚合作下保障了疫病防控工作正常推进，保证了疫病防控工作圆满完成。同时，加强多雨潮湿天气的工作。提升不利季节的防控力度强度，是疫病防控工作的保障。多雨潮湿等天气条件下，动物的免疫力下降，使得各种易感畜禽易患病，所以，加强多种不利天气时的疫病防控工作的力度，能保障畜禽对疫病的抵御能力，提高各种疫病的免疫保护能力。最后，共促规模饲养比重的上调。提高规模养殖化比重，使得我地区的规模养殖户增多，规模养殖场户多具有严格执行的规章条例、有科学合理的免疫程序、有专业水平的兽医人员、有易于管理的养殖环境，规模饲养场户的法人对疫病防控工作多有高度的重视，积极的配合，充分的保障，促进疫病防控工作的顺利进展，保证疫病免疫保护水平。26 吉林农业大学硕士学位论文结论结论1白城地区2014-2015年度没有四种动物疫病的发生及死亡。2白城地区2014-2015年度四种疫病的免疫畜禽占应免畜禽总量的比率均为100%，免疫抗体合格率全部达到并远超过国家要求的70%的合格率水平。3虽然白城地区四种疫病总体免疫合格率水平超过国家要求标准，但是不同条件下，合格率水平差异甚大：不同饲喂方式免疫合格率差异大，四种疫病规模场的免疫合格率全部高于农户散养畜禽的免疫合格率；不同畜禽品种间的免疫合格率差异明显；政府的大力支持及防疫资金的充裕给四种疫病的防控工作带来巨大保障；不同季节免疫合格率稍有不同，四种疫病秋季的免疫合格率普遍超过春季的免疫合格率。27 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吉林农业大学硕士学位论文作者简介作者简介姓名康超性别女民族蒙古族籍贯吉林省洮南市政治面貌团员入学时间2014.9申请学位类别兽医硕士论文答辩日期2016.5.29授予学位年月2016.6就业信息就业单位就业单位性质就业单位地址联系方式（个人/办公）学习（工作）经历2009.9—2013.6吉林农业大学动物科学技术学院动物医学专业2014.9—2016.6吉林农业大学研究生学院兽医硕士专业攻读学位期间发表与学位论文的科研成果信息署名发表情况题目刊物名称（级别）署名单位次序(刊出时间/录用)发表学术论文获奖署名名称成果级别署名单位发表情况项目次序及专利35 吉林农业大学硕士学位论文致谢致谢两年充实而愉悦的研究生生涯即将结束，在这两年中我无论在学习上还是生活上都学会了很多，懂得了很多，得到了很多，这离不开学校的培养、老师的教诲、同学的帮助以及家里的支持。首先，我发自内心深深的感谢！感谢我的母校，我自大学入学以来，在学校就学7年整，吉林农业大学是一个布满浓浓的学习氛围，充满活力的生活氛围的学校，在学校中我们享受着舒适的学习环境，接受着老师的谆谆教诲，这是学校给予我们的，这是学校对我们的关怀，我们拥有着这份关怀，在这份关怀中成长、成才，没有我们亲爱的母校，何来这无以挑剔的学习环境？何来这胜似公园的生活环境？我们又何以在这拥有的一切中度过我们的求学生涯？感谢我的母校！感谢我的老师赵权教授，我的老师是一位慈祥、热情、严谨的老师，在我们本科时就传授我们知识、教诲我们成长。我的老师是一位热心的老师，是一位正直的老师，在我们有困难时，老师总会伸出他的双手竭尽全力的帮助我们；在我们有困惑时，老师总会孜孜不倦的开导我们，无论在学习上还是生活中，每每想到老师，我就感觉有了依靠，有了面对困苦的勇气。我敬爱的老师，感恩有您在生活上开导我让我成长；在学习上教诲我让我成才；在选择上指引让我避免弯路，我敬爱的老师赵权教授，感谢您！感谢我的同学们，感谢我的班长李文玉和书记林伟杰，在忙碌的学习、实验中，他们牺牲自己的宝贵时间服务我们，每每联系不上我们时，他们一个个给我们打电话通知，是他们时间的奉献、精力的奉献，我们才得以全心全意投入到我们的实验学习中，感谢我亲爱的班长和支书；感谢我亲爱的卢伟师姐，就是这样一个人，在我们需要时，毫无怨言，竭尽全力帮助我们，对每个人都这么热情，无怨无悔，感谢有你：同时，感谢我的所有同学，在两年中对我的帮助。感谢我的父母，是父母默默地付出，无限的的支持，我才能安心的学习，是父母给予我依靠，是父母的爱感化我成长，感谢我的父母！衷心感谢评阅、指导和参加我论文答辩的专家和教授，谢谢你们的指导。康超2016年5月36
