DB63∕T 1692-2018 八眉猪细管冻精生产技术规程(青海省)

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1、ICS65.020.30B43备案号：60856-2018DB63青海省地方标准DB63/T1692—2018八眉猪细管冻精生产技术规程2018-09-25发布2018-12-01实施青海省质量技术监督局发布DB63/T1692—2018前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由青海省农牧厅提出并归口。本标准起草单位：青海省家畜改良中心。本标准主要起草人：马元梅、张楠、冯宇诚、张晋青、常永梅、赵春川、王芳、郭占泽、赵青山、许发芳、莫常山、王朝风、何得仓、李景、刘于刚。IDB63/T1692—2018八眉猪细管

2、冻精生产技术规程1范围本规程规定了种公猪的选择和调教、采精前准备、采精、精液处理、精液冷冻、细管冻精解冻和镜检、包装、标记和贮存、细管冻精质量评价等内容。本规程适用于八眉猪细管冻精的生产。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4143牛冷冻精液GB/T5458液氮生物容器NY/T2823八眉猪3种公猪的选择和调教3.1种公猪的选择种公猪应符合NY/T2823要求，三代系谱清楚。3.2种公猪的饲

3、养管理种公猪单圈饲养。定时定量饲喂，以精料为主，满足其营养需要，消化能需要量为28.45MJ，体重90kg以下的公猪粗蛋白需要量为14%，90kg以上为12%，每千克饲料含维生素A3531IU，维生素E11IU。供给充足清洁饮水。经常刷拭猪体，保持清洁。每天适度运动1h~2h。3.3种公猪的调教选择发情旺盛的母猪并固定，引诱公猪爬跨，待其爬上母猪后，将公猪阴茎导入空拳内进行采精，反复训练2次~3次。4采精前准备4.1器械4.1.1仪器设备37℃恒温箱、17℃车载恒温箱、水浴锅、移液枪、密度仪、显微镜、离心机、冰箱、低温柜、细管封

4、装一体机、程控冷冻仪、液氮生物容器、干燥箱。4.1.2器具1DB63/T1692—2018保温集精杯、过滤膜、比色皿、锥形瓶、载玻片、盖玻片、离心管、烧杯、量筒、0.25ml细管、提筒、试管、细管剪。4.2器械的清洗4.2.1仪器设备的清洗和消毒各仪器设备应定期用紫外灯照射消毒。使用结束后，应用洁净、柔软的布将残留的精液、水、污物擦拭干净。4.2.2器具的清洗和消毒各器具使用后浸泡在自来水中。洗涤时，先在加有洗涤剂的温热水中刷拭，然后用清水反复冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗。载玻片和盖玻片洗净后用柔软的布擦干备用，其他玻璃器皿将水晾

5、干后放入干燥箱，加热至160℃恒温60min，自然冷却后待用。0.25ml细管应置于紫外灯下消毒，其他非玻璃材质的器具洗净后自然晾干，用75%酒精棉球擦拭消毒。4.3采精场所的卫生和消毒采精场所保持安静，地面保持清洁卫生，采精前应喷洒0.1%高锰酸钾进行消毒。4.4稀释液配制4.4.1常温保存稀释液配制向锥形瓶中加入1000ml双蒸水，分别称取葡萄糖37g、乙二胺四乙酸1.25g、二水柠檬酸钠0.6g、碳酸氢钠1.25g、氯化钾0.075g，溶解于双蒸水中，搅拌均匀，用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中，滤液煮沸15min，待温度降至常

6、温，称取青霉素钠0.6g、硫酸链霉素1g加入滤液中并混匀。4.4.2冷冻基础液配制向锥形瓶中加入1000ml双蒸水，分别称取葡萄糖11g、柠檬酸14.8g、三羟甲基氨基甲烷24.2g，溶解于双蒸水中，搅拌均匀，用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中，滤液煮沸15min，待温度降至常温，称取青霉素钠0.6g、硫酸链霉素1g加入滤液中并混匀。4.4.3冷冻稀释液I液配制向锥形瓶中加入800ml冷冻基础液、200ml新鲜卵黄，搅拌均匀，置于17℃备用。4.4.4冷冻稀释液II液配制向锥形瓶中加入940ml冷冻稀释液I液、60ml甘油，搅拌均匀，

7、置于5℃备用。4.4.5解冻液配制向锥形瓶中加入1000ml双蒸水，分别称取葡萄糖50g、二水柠檬酸钠3g、乙二胺四乙酸1g，溶解于双蒸水中，搅拌均匀，用定性滤纸过滤至另一锥形瓶中，滤液煮沸15min，待温度降至常温。5采精5.1台猪和种公猪的准备2DB63/T1692—2018选择健壮、大小适中、性情温顺的母猪做台猪。采精前用清水冲洗台猪的外阴、臀部和公猪阴茎、包皮及其周围腹壁，然后用0.01%高锰酸钾溶液对公猪被清洗过的部位消毒，再用温水冲洗干净。5.2采精频率后备种公猪每周采精一次，成年种公猪每周可采精两次。5.3采精方法

8、从37℃恒温箱中取出保温集精杯，杯口覆盖过滤膜。采精员戴乳胶手套，蹲在台猪的一侧，诱导公猪爬跨台猪，按摩公猪睾丸，待公猪阴茎伸出后导入空拳内并握紧，当阴茎充分勃起后顺势向前牵拉，手指有弹性并具有节奏的松握，引起公猪射精。另一手持保温集精杯采集中段精液，弃去前、后