天蚕素a_马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜结构_小肠黏膜免疫功能和肠道菌群的影响

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1、动物营养学报2014，26(11):3387-3395ChineseJournalofAnimalNutritiondoi:10．3969/j．issn．1006-267x．2014．11．027天蚕素A－马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜结构、小肠黏膜免疫功能和肠道菌群的影响111121*杨田田于龙魅刘二强陈香君朱明星王秀青(1．宁夏医科大学检验学院，银川750004;2．宁夏医科大学科技中心，银川750004)摘要:本试验旨在研究天蚕素A－马盖宁杂合肽对小鼠小肠黏膜结构、黏膜免疫功能和肠道菌群的影响。选取18只健康且体重相近的BALB/c小鼠随机分成3组:对照组(生理盐

2、水0．75mL/d灌胃)、低剂量杂合肽组(0．26mg/mL的杂合肽0．75mL/d灌胃)、高剂量杂合肽组(0．52mg/mL的杂合肽0．75mL/d灌胃)。试验期为6周。结果表明:1)2个杂合肽组十二指肠绒毛长度均显著大于对照组(P＜0．05)，各段小肠的隐窝深度均显著低于对照组(P＜0．05)，各段小肠绒毛长度/隐窝深度均显著高于对照组(P＜0．05)。2)与对照组相比，2个杂合肽组各段小肠黏膜内免疫球蛋白A阳性表达水平均显著升高(P＜0．05)。3)2个杂合肽组小肠黏膜内白细胞介素(IL)－2、干扰素－γ(IFN-γ)及IL-4含量均显著高于对照组(P＜0．0

3、5)，而IFN-γ/IL-4各组之间差异不显著(P＞0．05)。4)2个杂合肽组盲肠内容物中的大肠杆菌数量均显著低于对照组(P＜0．05)，双歧杆菌与乳酸杆菌数量均显著高于对照组(P＜0．05)。由此得出，天蚕素A－马盖宁杂合肽灌胃能改善机体小肠黏膜结构;可促进免疫球蛋白A的表达来提高小肠黏膜免疫防御功能;可促进IL-2及IFN-γ的分泌来提高肠道细胞免疫水平，促进IL-4的分泌以提高肠道体液免疫水平并能够保持辅助性T细胞(Th)1/Th2的平衡状态;可有效降低肠道致病菌大肠杆菌的数量并显著增加肠道益生菌双歧杆菌和乳酸杆菌的数量。关键词:天蚕素A－马盖宁杂合肽;小鼠

4、;小肠黏膜结构;黏膜免疫;细胞因子;肠道菌群中图分类号:S816．7文献标识码:A文章编号:1006-267X(2014)11-3387-09长期、广泛且不分选择的滥用抗生素加重了及革兰阴性细菌均具有良好的抑菌活性，且对机病原微生物的耐药，同时导致了动物机体内抗生体正常微生物菌群无不良影响，具有良好的开发［3］素药物的大量残留。因此研发“无毒，无残留，无应用前景。天蚕素A－马盖宁杂合肽有望作为耐药性”的抗微生物制剂代替抗生素成为近期研一种新的环保型饲料添加剂，达到彻底替代饲用［1］究的热点。抗菌肽作为具有抗菌作用的阳离子抗生素的目的，对降低机体内抗生素残留以及生小肽

5、，因分子质量小、构象简单、无免疫原性不易产绿色、营养的畜禽产品，发展健康养殖业具有重引起耐药等特点极有可能成为新型抗微生物药要意义。本研究团队前期研究发现在治疗大肠杆［2］物。天蚕素A－马盖宁杂合肽(cecA-mag)是根菌引起的雏鸡疾病模型的试验中，在同等剂量情据GenBank中天蚕素A(cecropinA)成熟肽段1～况下抗菌肽口服的治疗效果比肌肉注射的治疗效［4］7以及马盖宁(magainin)2～12的氨基酸序列选用果要好。此研究结果提示我们，天蚕素A－马盖酵母偏爱密码子设计合成的杂合肽，对革兰阳性宁杂合肽除了具有直接抑菌的作用效果外，还可收稿日期:2014

6、－05－03基金项目:宁夏教育厅资助课题(NGY2012070)作者简介:杨田田(1987—)，女，山东泰安人，硕士研究生，研究方向为病原微生物与分子诊断学。E-mail:happy516122@163．com*通讯作者:王秀青，副教授，硕士生导师，E-mail:xiuqingwang1979@163．com3388动物营养学报26卷能通过其他的途径引起其抗菌效果的提高。小肠染，然后取下扎口的盲肠，液氮速冻后放置于黏膜对营养物质的吸收是机体得以生长发育的基－80℃冰箱中保存，用于测定内容物中大肠杆菌、本保证，而正常的小肠黏膜免疫功能是动物抵抗双歧杆菌和乳酸杆菌的数量

7、。将各小鼠剩余小肠肠道有害菌群入侵，调节肠道正常微生物菌群水自同一部位取0．2g放于离心管中，液氮中速冻后平，促进所饲养动物健康发育的前提。两者相辅置于－80℃冷冻保藏用于ELISA检测细胞因子的相成，共同促进动物抗微生物感染的能力和生产含量。性能的提高。因此我们推测口服途径给予机体此1．3．2小肠黏膜结构的观察杂合肽可能会影响小肠黏膜的结构、小肠黏膜免石蜡切片常规苏木素－伊红(HE)染色后，采疫功能及肠道不同菌群的数量，从而进一步影响用Olympus显微镜10倍物镜下观察各组小肠黏动物机体的整体免疫水平。为此设计和实施本试膜结构，应用Leica图像分析软件测量