大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉对子代神经行为和学习记忆功能的影响

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1、大鼠孕晚期七氟烷吸入麻醉对子代神经行为和学习记忆功能的影响作者：何莹，张良成，郭永正，林蕾，郑晓燕【摘要】目的观察大鼠孕晚期长时间、不同浓度使用七氟烷吸入麻醉对仔鼠神经行为和学习记忆功能的影响。方法SD孕鼠15只，随机分为高浓度麻醉（H）组、低浓度麻醉（L）组和对照（C）组，其中H、L组分别于孕第18天吸入4%、2%的七氟烷6h。出生后仔鼠进行后续实验：P8～P14行悬崖逃避实验，P21和P60行旷场实验，P21～P26（Ⅰ期）和P60～P65（Ⅱ期）行Morris水迷宫实验。结果在悬崖逃避实验和旷场实验中，各组仔鼠的神经行为改变差

2、别无统计学意义（P>0.05）。水迷宫实验Ⅰ、Ⅱ期，与C组比较，H、L组平均逃逸潜伏期时间均明显延长（P<0.01）、第三象限活动时间和穿越平台次数均明显减少（Ⅰ期：P<0.01；Ⅱ期：P<0.05），而L组在定向航行实验和空间探索实验中差别均无统计学意义（P>0.05）。结论孕晚期高浓度使用七氟烷麻醉6h可导致仔鼠学习记忆功能降低，并且持续到成熟期。【关键词】氟烷；醚类；妊娠，动物；迷宫学习；大鼠，SpragueDawley；神经系统；记忆研究表明，GABAGABAA受体和NMDA10NMDA受

3、体系统的活性和功能状态对哺乳动物包括人类的脑神经结构和功能的发育具有重要意义。前者活性过度增强或后者功能被明显抑制，均可能导致神经细胞增殖、分化、迁涉、突触生长受抑以及神经细胞凋亡增加，甚至影响神经行为和学习记忆功能的发育[13]，尤其对处于神经细胞增殖分化和突触生长关键时期的大脑影响将更为深远[4]。含氟挥发性吸入麻醉药是临床全身麻醉中使用最为广泛的一类药物，具有增强GABAA受体活性的作用，同时对NMDA受体也有一定的阻滞作用，而且认为此二者作用与其麻醉机制有关。七氟烷是新型的含氟挥发性吸入麻醉药，因其血/气、油/气分配系数低

4、，麻醉诱导、苏醒迅速，近年来在各种手术的全身麻醉中应用逐渐广泛。笔者以2种不同临床麻醉浓度的七氟烷麻醉孕晚期大鼠，观察仔鼠的神经行为和学习记忆功能的变化情况，探讨作为胎儿脑细胞生长发育重要时期之一的孕晚期接触七氟烷，是否将对子代神经功能发育产生不利影响。1材料和方法1.1材料1.1.1动物选择及分组清洁级SD大鼠15只，孕15d，体质量380～420g（上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号：SCXK沪20032003）。饲养于相同环境3d，于孕1810d将大鼠随机分为3组：高浓度麻醉（H）组、低浓度麻醉（L）组和对照（C）组，

5、每组5只。1.1.2七氟烷吸入麻醉吸入麻醉过程在一自制麻醉箱内进行。自制麻醉箱为有机玻璃材料制成，高、宽、长为25cm×15cm×15cm，用带有3mm小孔的筛状隔板将箱内空间分割为上（高15cm）、下（高10cm）2部，箱顶近中央分别有一大孔和小孔，大孔嵌装的气管导管标准衔接头，可与麻醉机螺纹管紧密连接；箱的两侧面和背面高于隔板2cm处各有一小孔，每个小孔（包括顶部）分别嵌装一可与多功能气体分析仪自动取样管良好吻合的标准连接头；箱正面有8cm×18cm门洞和12cm×20cm可左右拉动的门板。实验时，在麻醉箱底部放置适量钠石灰用以

6、吸收CO2，调节麻醉机（ZY9500，无锡中原医疗器械有限公司）氧流量和七氟烷（sevoflurane，批号：8515，日本丸石制药株氏会社）蒸发罐，当通过麻醉箱各侧小孔测定箱内七氟烷浓度达到预定目标：H组4%[约1.8个最低肺泡有效浓度（MAC）]、L组2%（约0.9个MAC），将孕鼠放置于麻醉箱上部隔板上，6h后关闭麻醉蒸发罐，待其麻醉自然消退和清醒；对C组孕鼠仅向箱内输送相同浓度的氧气6h，但不开启七氟烷蒸发罐。接受吸入麻醉的大鼠入睡后，用带状婴儿脉搏血氧饱和度探头环绕于孕鼠腹部，持续监测SpO2(S/5，美国DatexOh

7、meda公司)。吸入麻醉实验完成后送回原动物房继续饲养，待其自然分娩。预实验中，另设置了高浓度组和对照组2组孕鼠，各8只，在上述条件下实验结束时进行左心室动脉采血行血气分析[5]，结果显示2组PaO2和PaCO2差别均无统计学意义（P>0.05）。101.2方法吸入麻醉实验结束时，各大鼠均苏醒良好，继续饲养2～3d，各组孕鼠分别自然分娩：H组51只、L组56只、C组53只，新生鼠出生后天数以分娩当天记为出生后第0天，此后累加。7d内每组幼鼠均有出现死亡，H组8只、L组5只、C组6只；成活分别为43、51、47只。从存活仔鼠中，

8、每组分别随机选定8只雄性鼠进行神经行为和学习记忆能力测定。1.2.1悬崖逃避实验待出生后第8天（P8）开始，将其放置于30cm高的平台上，头和两前肢越过平台边缘，60s内大鼠的头和身体向内侧移动为阳性反应。记录从放置开始到向内移动的时