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时间:2019-03-08
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1、巧10644G分类号密级单位代码:!蛆鲤学号:iQ4竖12Q312§瘩微雇业大学学位论文牛肝菌液态发酵生成茶氨酸的研究Submergedfermentationforproductionoftheaninebythebc:;t:speciesfmushrooms)研究生;奎健指导教师:奎垩数援合作指导教师:申请学位门类级别:工堂亟±专业名称:盔亡昌加王丛壁蘧工猩研究方向:簋品生物挂苤所在学院:苤墨盒晶登技堂随答辩委员会主席起堕垩2007年6月摘要茶氨酸是茶树中一种特殊的非蛋白质游离氨基酸,对绿茶的
2、良好滋味起到积极作用.近年来,大量研究表明茶氨酸具有重要的生理和药理作用,可作为食品滋味增强剂和人体保健添加剂,在食品、医药行业具有广阔的应用前景,人们对茶氨酸的需求量也将越来越大。因此,为了获得大量的茶氨酸,很多学者研究了不同的茶氨酸生产方法,主要包括茶叶或其富集液提取法、化学合成法、茶愈伤组织培养法和微生物酶促合成法。众所周知,茶氨酸主要存在于茶树(Camelliasinensis)等山茶科植物中,此外,在一种牛肝菌(褐绒盖牛肝菌。Xerocomusbadius)q’也有微量茶氨酸存在。但是否
3、与茶氨酸存在于山茶科类植物中类似,茶氮酸也存在于牛肝菌科中的其他牛肝菌中,目前未见有相关研究报道。同时,能否利用相关牛肝菌液态发酵生成茶氨酸,.也未见报道。本论文围绕上述问题,主要进行了以下研究:不同牛肝菌子实体中茶氨酸的分析检测:牛肝菌液态发酵生成茶氨酸的实现及条件优化;牛肝菌液态发酵合成茶氨酸关键酶的初步推断。首先,论文运用毛细管电泳技术对褐绒盖牛肝菌(Xeroeomusbadius)、乳牛肝菌(Suillusbovinus)、黄牛肝菌(Boletusauripes)和黑牛肝菌(Boletus
4、aereus)子实体干品中的茶氨酸及其他游离氨基酸同时进行了分析定量。结果表明,褐绒盖牛肝菌、乳牛肝菌、黄牛肝菌和黑牛肝菌中茶氨酸的含量(占干重)分剐为29.86mg/lOOg、27.35mg/1009、25.61mg/lOOg和15.60mg/lOOg;四种牛肝菌中总游离氨基酸的含量(占千重)分别为2458.08mg/lOOg、3064.38rag/lOOg、2400.44mg/lOOg和1531.32mg/lOOg。其次,论文首次实现了褐绒盖牛肝蔼和乳牛肝菌的液态发酵,用于生成茶氨酸。并通过响
5、应曲面法优化了液态发酵条件。结果表明,褐绒盖牛肝菌液态发酵的最佳关键因子值分别为葡萄糖29.179,'L,酵母膏6.38e,/L,装液量61.43mL,起始pH5.63时,茶氨酸产量可达17,22mg/L;乳牛肝菌液态发酵的最佳关键因子值分剐为葡萄糖30.129/L,酵母膏6.779/L,装液量60.10mL,起始pH5.58时,茶氨酸产量可达15.15mg/L。最后,论文对牛肝菌液态发酵合成茶氨酸关键酶进行了初步推断。结果表明,谷氨酰胺合成酶催化反应体系中检测到了茶氨酸的生成,初步推断牛肝菌体内
6、合成茶氨酸的关键酶可能为谷氨酰胺合成酶。,本论文利用牛肝菌液态发酵直接生物合成天然茶氨酸,不同于传统方法,这将为开辟一条新的茶氨酸生物合成的绿色生产途径奠定理论基础。关键词:茶氪酸,牛肝菌,液态发酵,响应曲面法,毛细管电泳AbstractThaanineisaspecificnon—protein/cfreeaminoacidinteaplants(Camelliasinensis).Itcontributeshighlyandpositivelytothegoodtasteofgreenteai
7、nfusion.Inrecentyears,manystudieshaveshownthattheanineplaysimportantrolesinphysiologicalandpharmaceuticalfunctions.Duetoitsgoodtasteandfavorablephysiologicaleffects,thedemandfortheaninecouldincreasenotonlyasataste-enhancingfoodadditivebutalsoasasupple
8、mentforimprovingand/ormaintaininghumanhealth.Consequently,inordertoobtainlargeamoantsoftheenine,severaldifferentmethodswereinvestigatedtoproducetheaninebymanyresearchersinthepastyears.n圮metho&fortheanineproductionincludeextractionfromtealeaves
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