临床微生物检验标本的采集

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1、第2章临床微生物检验标本的采集第一节标本的采集和处理原则一、标本采集的一般原则1.早期采集2.无菌采集3.根据目的菌的特性用不同的方法采集4.采集适量标本5.安全采集二、标本的处理一些对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送。其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室。若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存，如支气管洗液、心包液、痰、尿等标本应保存在4℃环境中，脑脊液等则要在25℃保存。第

2、二节血液一、标本采集1.皮肤消毒程序严格执行以下三步法:(1)70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。(2)1%～2%碘酊作用60秒或10%碘氟60～90秒，从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。(3)70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60秒，待酒精挥发干燥后采血。2.采血部位通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。对疑为细菌性骨髓炎或伤寒患者，在病灶或者髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培养。3.静脉穿刺和培养瓶接种程序在穿刺前或

3、穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶手套固定静脉，不可接触穿刺点。(2)用注射器无菌穿刺取血后，勿换针头直接注入血培养瓶，或严格按厂商推荐的方法采血。(3)血标本接种到培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检，切勿冷藏。4.采血量自动化仪器要求成人采血量是8～10ml/瓶，儿童1～5ml/瓶。5.血培养次数和采血时间只要怀疑血液细菌感染，应即刻采集。采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行，在1h内采集2～3次做血培养。对间歇性寒战或发热应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于寒战或发烧

4、后1h进行。入院前两周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3d，每天采2份。6.标本运送采血后应该立即送检,如不能立即送检，可室温保存，切勿冷藏。二、血液中常见的病原体种类病原菌革兰阳性球菌金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌革兰阳性杆菌结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌革兰阴性球菌脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌革兰阴性杆菌大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌真菌念球菌、曲霉菌、隐

5、球菌、球孢子菌厌氧菌拟杆菌、产气荚膜梭菌重点三、临床意义血液感染是一种危重的全身感染，对其进行病原菌的检验，提供病原学的诊断极为重要。当少量细菌侵入血液循环，为一过性，不繁殖或很少繁殖，不引起或仅引起轻微的炎症反应者称为菌血症,若有全身性炎症反应的表现称为脓毒症。血液标本的细菌培养是诊断菌血症的基本而重要的方法，若从患者血液中检出细菌，一般视为病原菌感染，提示有菌血症。常见的菌血症或脓毒症有：葡萄球菌菌血症由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）及凝固酶阴性葡萄球菌引起的菌血症和脓毒症逐年增多，占菌血

6、症的10%~15%，临床表现明显，发病急，中毒症状重。肠球菌菌血症近年来明显增多，约占菌血症的10%。常见泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的患者，易并发心内膜炎。此菌可对多种抗生素耐药，病情较重。革兰阴性杆菌菌血症主要侵犯危及机体免疫功能低下的患者。常可引起泌尿生殖道、胃肠道、胆道及呼吸道感染。厌氧菌菌血症厌氧菌常寄居于口腔、肠道和泌尿生殖道，并引起相应部位的感染。真菌血症常由条件致病性真菌引起，有假丝酵母菌、曲霉菌和毛霉菌等，以白假丝酵母菌最多见，多数伴有细菌感染。第三节脑脊液一、标本采集采集脑脊液一

7、般用腰椎穿剌术获得，特殊情况可采用小脑延髓池或脑室穿刺术。标本采集后要立即送检、化验，一般不能超过1小时。腰穿法无菌取脑脊液3～5ml，置无菌管内立即送检。培养脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌等苛养菌时，应将标本置于35℃条件下保温送检，不可置冰箱保存。但做病毒检查的脑脊液标本应放置冰块，可在4℃保存72h。二、脑脊液中常见病原体`革兰阳性菌革兰阴性菌病毒真菌及其他肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌乙型脑炎病毒新生隐球菌B群链球菌大肠埃希菌柯萨奇病毒A白假丝酵母菌A群链球菌铜绿假单胞菌柯萨奇病毒B钩端螺旋体消化链球菌

8、卡他布兰汉菌脊髓灰质炎病毒结核分枝杆菌拟杆菌新肠道病毒68～71产单核细胞李斯特菌不动杆菌狂犬病毒炭疽芽胞杆菌葡萄球菌肺炎克雷白杆菌流感嗜血杆菌重点三、临床意义细菌性脑膜炎：是中枢神经系统感染的常见类型，其中以流行性脑脊髓膜炎为常见，有的呈暴发型，病情严重，病死率较高；多发年龄在5～29岁，冬春季多发，可用青霉素类、磺胺类、头孢霉素类抗生素治疗。结核性脑膜炎最常见，近几年呈回升趋势，为防治重点。真菌性脑膜炎：最常见于隐球菌脑膜炎，其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母菌、球孢