溶血卵磷脂对血管内皮细胞增殖及凋亡影响

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1、溶血卵磷脂对血管内皮细胞增殖及凋亡影响【摘要】目的观测溶血卵磷脂(LPC)对血管内皮细胞增殖及凋亡的影响,从而探讨动脉硬化发生的机制。方法取体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，在含不同浓度LPC(5、10、20mg/L)的培养基中分别培养6、12、24、48h，用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、荧光显微镜观测血管内皮细胞增殖及凋亡的变化。结果与正常对照组比较，LPC抑制内皮细胞增殖，促进细胞凋亡，且其作用呈时间-效应、浓度-效应依赖关系,但随着LPC浓度增加，细胞凋亡增加的同时

2、细胞死亡比例也增加。结论LPC抑制血管内皮细胞增殖，促进细胞凋亡，可能是其致动脉粥样硬化机制之一。【关键词】溶血卵磷脂；人脐静脉内皮细胞；增殖；凋亡EffectsonproliferationandapoptosisofculturedhumanumbilicalveinendothelialcellsinducedbylysophosphatidylcholineZHUYun,SUNGuo-ju.DepartmentofGeriatrics,theFifthAffiliationHospital

3、,ZhengzhouUniversity,Zhengzhou450052,China【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffects8onproliferationandapoptosisofHUVECsinducedbyLPC.MethodsHUVECsweretreatedwithdifferentconcertrationsofLPC(5,10,20mg/L)for6,12,24,48hrespectively.Proliferationandapopto

4、sisofHUVECswereassessedbyMTTassay,flowcytometry(FCM)andfluorescencemicroscopyrespectively.ResultsComparedwithcontrolgroup,LPCcouldinhibittheproliferationandinduceapoptosisofHUVECsinadose-dependentandtime-dependentway.Meanwhile,thedeathofthecellswasinc

5、reasedwiththeincreasingofLPCconcentration.ConclusionLPCcouldinhibittheproliferationandinduceapoptosisofHUVECs,whichmaybeoneofmechanismsresponsibleforLPCtoleadtoatherosclerosis.【Keywords】Lysophosphatidylcholine；Humanumbilicalveinendothelialcells；Prolif

6、eration；Apoptosis8血管内皮细胞为衬覆于血管内腔面的单层扁平细胞,它依靠其正常的增殖和凋亡平衡,保证了血管的结构和功能正常。近年来的研究表明，许多心血管疾病的发生发展与细胞增殖和凋亡有关。研究显示：氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生发展中起着重要作用[1-3]，而溶血卵磷脂(LPC)是ox-LDL的主要活性成分。目前，罕见LPC对血管内皮细胞增殖及凋亡影响的研究报道。本研究观测LPC对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响，为AS的

7、基础研究提供新思路。1材料和方法1．1主要试剂及仪器RPMI-1640培养基(GIBCO，USA)，胎牛血清(杭州四季青公司)，LPC、胰蛋白酶、四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(Sigma，USA)，AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司)，酶联免疫检测仪(Biotek，USA)，荧光显微镜(OLYPUS，JAPAN)，流式细胞仪(BD，USA)，低温离心机(BECKMAN，USA)，高速低温离心机(Eppendorf，USA)。1．2细胞株及细胞培养人脐静脉内皮

8、细胞(Humanumbilicusveinendothelialcells，HUVECs)株CRL-1730购自ATCC公司。采用常规培养,将冻存的HUVECs株解冻复苏后，种植在含15%胎牛血清(FBS)、2mol/l谷氨酰胺、0．1mg/ml肝素、0．05mg/ml内皮细胞生长因子的RPMI-1640培养基(Gibco)中，置于37℃、5%的CO2饱和湿度培养箱内培养，以后2～3d/次换液。待细胞生长至单层融合状态后，用0．25%胰蛋白酶消化传代。实验时所用细胞均为对数生长期。