可注射性同种异体工程化软骨的构建论文

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1、可注射性同种异体工程化软骨的构建论文.freelergelofethyleneandpropyleneoxide）在组织工程研究中应用的可行性.方法无菌条件下取新生兔关节软骨，经Ⅱ型胶原酶消化，将软骨细胞和生物材料复合成细胞浓度为5×107ml-1的复合物并移植于兔皮下，同时设立单独注射细胞和材料两个对照组.分别于4，6，8，12edical-engineering;biopatiblematerialsAbstract:AIMTostudythefeasibilityoftheformationofallogeneictissueengineeredcartilageinimmunop

2、etentan-imalandtoverifythatthematerialusedinourexperimenthastheidealfeaturesastissue-engineeringbiomaterial.METHODSFreshneicronnylonmeshandcentrifuged，thenthechondro-cytesixedaterialtocreateafinalcelldensityof5×107ml-1.Theresultingcell-biomaterialadmix-tureleachpoint，andthecontrolgroupsaterialort

3、hesuspensionofchondrocytel-1.After4，6，8and12plesharvestedafter4atrixed.After6atureandthebiomaterialostpletelydegraded.Intheexperimentgroupsmunerejectionresponse.Onthecontrary，inthecontrolgroupsthereed.CONCLUSIONBiomaterialusedinourexperimentisarelativelyidealtissue-engineeringbioma-terial.It’sfea

4、sibletoformallogeneictissueengineeredcarti-lageinanimmunopetentanimalthatprovidesanalterna-tiveminimumtraumatic，malleableandinjectablemeansforsomeclinicplasticandreconstructiveoperation.0引言在临床工作中，治疗由于软骨缺损导致功能障碍或畸形的病人多用同种异体，自体或人工合成替代物治疗.但由于存在免疫排斥，取材受限及感染等问题，临床医生正在寻找一种更为理想的治疗方法.组织工程的应用是解决上述问题的一个新途径

5、［1-2］.目前软骨的组织工程研究已取得了很大进展［1-4］.但由于形成组织工程软骨所需的软骨细胞数量大，取自体软骨量小不足以形成新软骨，量大则造成新的损伤.而软骨细胞培养扩增后其分泌基质及分裂能力将逐渐减弱［3］.这就使得软骨“种子”细胞的数量问题成为制约这一技术发展的一个因素.本实验应用国内自行合成的可注射性生物材料聚氧化乙烯丙烯凝胶与同种异体软骨细胞混合，探讨在有免疫力的动物体内形成新软骨的可行性.1材料和方法1.1材料新西兰大白兔12只（清洁级，体重1.5～2.0kg，第四军医大学动物中心提供），新生兔（1～2d）20只，Ⅱ型胶原酶（Sigma公司），250gL-1聚氧化乙烯丙烯

6、凝胶（第四军医大学口腔医学院陈富林博士提供），Ham-F12培养基（Gibco公司）.1.2软骨细胞分离新生兔于750mLL-1酒精中浸泡处死，无菌条件下切取膝关节，盂肱关节，髋关节等处软骨，去除表面软组织，切成约2mm×2mm×2mm大小的碎块，以磷酸盐缓冲液（PBS，含青、链酶素各100umL-1）冲洗二遍，加入约2倍体积3gL-1Ⅱ型胶原酶于37℃恒温消化8～12h，每30min摇动一次.以150目尼龙网筛过滤，离心，沉淀细胞以PBS洗涤2遍.用含200mLL-1胎牛血清的Ham-F12培养基制成细胞悬液，计数，台盼蓝染色检查活力，活力大于85%备用.1.3软骨细胞与生物材料复合物

7、的制备和移植用上面制备的软骨细胞与聚氧化乙烯丙烯凝胶混合制备成细胞浓度为5×107mL-1的复合物5］.用12号针头将其接种到12只新西兰大白兔背部皮下，每只2点，每点0.3mL.同时在12只新西兰大白兔背部皮下分别注射聚氧化乙烯丙烯凝胶和浓度为5×107mL-1的细胞悬液每只各一点，每点0.3mL，作为对照.分别于4，6，8，12ergelofethyleneandpropyleneoxide）等，均取得了一定的效果［2，5-9］