大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ace抑制活性的研究

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1、大豆粕碱性蛋白酶水解肽及ACE抑制活性的研究作者简介:温雪琴(1989—),女,(汉),硕士研究生,研究方向:微生物应用及发酵工程。通信作者:冯欣(1981—),女,(汉),实验师,硕士研究生,微生物应用及发酵工程。温雪琴1,刘屾1,黄弢1,赵嘉希2,冯欣1*,孙建华1(1.天津市动植物抗性重点实验室,天津师范大学生命科学学院,天津300387;2.天津科技大学,天津300222)摘要:豆粕是大豆经浸提脱脂后得到的副产品,含有大量的大豆蛋白,其水解物对血管紧张素转移酶(ACE)具有明显的抑制作用和降压效果。结果表明:以食品级豆粕为原料,经碱性蛋白酶水解后得到的ACE抑制肽在pH8.0,温度5

2、0℃,豆粕底物浓度40g/L的条件下,酶解3h得到的产物ACE抑制活性最高,为64.21%,对应水解度14.86%;进一步对ACE抑制肽进行高效液相色谱(HPLC)以及超高压液相色谱/四极杆-飞行时间串联质谱联用仪(LC-MS)的分析结果显示:活性物质的主要组分为三肽化合物,分子量为359,分子式为C15H30N6O4,由异亮氨酸、精氨酸和丙氨酸构成;其HPLC检测条件为色谱柱:Zorbax300SB-C18,5µm,4.6×150mm;检测波长:228nm,流动相:50%甲醇-超纯水,各含0.1%三氟乙酸;流速:0.7mL/min;柱温:26℃;进样量:10µL。关键词:豆粕;碱性蛋白酶;

3、ACE抑制肽;高效液相色谱法HPLC;ACEinhibitoryActivityonHydrolyticPeptidesfromSoybeanMealhydrolyzedbyAlkalineProteaseWENXue-qin1,LIUShen1,HUANGTao1,ZHAOJia-xi2,FENGXin1*,SUNJian-hua1(1.TianjinKeyLaboratoryofAnimalsandPlantsResistance,CollegeofLifeSciences,TianjinNormalUniversity,Tianjin,300387,PRChina;2.TianjinU

4、niversityofScienceandTechnology,Tianjin300222,China)Abstract:Soybeanmeal,asabyproductofsoybeanoilmanufacture,containsmainlyofprotein.Peptidesderivedfromtheproteinhadbeenproventobeangiotensin-convertingenzyme(ACE)inhibitoryandantihypertensiveeffect.Food-gradesoybeanmealwashydrolyzedbyalcalaseforthep

5、reparationofACEinhibitorypeptides.TheoptimumenzymolyticconditionsforthepreparationwereatpH8.0,55℃for3handasubstrateconcentrationof40g/L.TheACEinhibitoryactivityandthedegreeofhydrolysis(DH)wereseparatelyhighupto64.21%and14.86%.Subsequentdetectionofhighperformanceliquidchromatographic(HPLC)andHighpre

6、ssureliquidchromatography/quadrupole-timeofflighttandemmassspectrometry(LC-MS)suggestedthattheactivefractionmightbetripeptidewithmolecularweightof359andthemolecularformulaofC15H30N6O4whichconstituteofIsoleucine,ArginineandAlanine.ItsHPLCconditionsweredeterminedasfollows:column,ZORBAXSB-C18(4.6mmid×

7、150mm,5um);detectionwavelength,228nm;mobilephase,methanol-ultra-purewater(50:50,v/v,bothcontaining0.1%(v/v)trifluoroaceticacid;flowrate,0.7mL/min;column;temperature,26℃;samplesize,10μl.Keywords:Soybeanmeal;

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