肝细胞癌血管生成拟态形成机制实验的研究

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1、目录英文缩略词表………………………………………………………1中文摘要……………………………………………………………2英文摘要……………………………………………………………4正文…………………………………………………………………8引言………………………………………………………………8第一部分内皮相关分子在肝细胞癌血管生成拟态形成中的研究与意义……………………………………………………14材料与方法……………………………………………………14结果……………………………………………………………21讨论…………………………………

2、…………………………24结论……………………………………………………………26第二部分CD133和CD34在肝细胞癌血管生成拟态形成中的表达及意义……………………………………………………27材料与方法……………………………………………………27结果……………………………………………………………34讨论……………………………………………………………37结论……………………………………………………………39创新性……………………………………………………………40本实验不足之处…………………………………………………40进一步

3、研究方向…………………………………………………40参考文献……………………………………………………………42附录…………………………………………………………………46致谢…………………………………………………………………48综述…………………………………………………………………49英文缩略词表英文缩写英文名称中文名称ANOVACSCsDMSOdDMEMEphA2FBSFAKHCCHIF-1αhLCMminMMPOPNPASPI3KPBSanalysisofvariancecancerstemcellsdimethy

4、lsulfoxidedaydulbecco’smodifiedEagle’smediumEphrinA2fetalbovineserumfocaladhesionkinasehepatocellularcaricinomahypoxia-induciblefactor1alphahourlasercapturemicrodissectionminutematrixmetalloproteinaseOsteopontinperiodicacid-schiffphosphatidylinositol3-kinasephos

5、phatebuffersaline方差分析肿瘤干细胞二甲基亚砜天培养液抗酪氨酸蛋白激酶A2胎牛血清局部粘着斑激酶肝细胞癌缺氧诱导因子-1α小时激光捕获显微切割技术分钟基质金属蛋白酶骨桥蛋白过碘酸-希夫(氏)人磷酸肌醇3激酶磷酸缓冲液RT-PCRreversereactiontranscription-polymerasechain逆转录聚合酶链反应uPAVMurokinase-typeplasminogenactivatorvasculogenicmimicry-1-尿激酶型纤溶酶原激活物血管生成拟态肝细胞

6、癌血管生成拟态形成机制的实验研究中文摘要肝癌的转移与复发仍然是当前治疗肝癌过程中一大亟需解决的难题。肝癌肝切除后5年内仍有72.3%的病人出现转移复发，小肝癌的5年复发率亦有34.5%，其中2年内复发者占全部复发总数的3/4。而其中转移与复发的机制并非明确。研究结果主要集中在：肝癌转移基因和转移抑制基因、肝癌细胞的局部侵袭运动能力、肿瘤细胞的粘附性、肝癌的血管形成、细胞外基质、机体免疫状态和其它方面。近年来有研究者发现人高侵袭性葡萄膜黑色素瘤中存在一种现象，即血管生成拟态。进一步临床研究提示其与肿瘤的供血和转移复发相关

7、，从而指引了对肿瘤转移复发以及治疗的新方向。肝细胞癌为富血管肿瘤，抑制肿瘤血管的生成可作为肝癌细胞生长、转移复发的重要手段。在研究肿瘤细胞血管生成拟态形成的机制中，主要包括肿瘤细胞本身、细胞外基质、微环境和其它等方面。已报道在急性白血病和恶性胶质瘤中，肿瘤干细胞参与其血管生成拟态的形成，而在肝细胞癌中尚未见报道。第一部分内皮相关分子在肝细胞癌血管生成拟态形成中的研究与意义目的探究内皮相关分子(VE-cadherin和CD31)在肝细胞癌血管生成拟态形成中表达及意义。方法分别建立肝癌细胞HCC97H、SMMC7721以

8、及正常肝细胞L02三维培养，利用激光捕获显微切割技术分离出形成血管生成拟态的肝癌细胞，通过RT-PCR和Westernblot技术分别检测VE-cadherin和CD31表达。结果1）HCC97H细胞在三维培养下形成VM；SMMC7721和正常肝细胞L02不形成VM；2）LCM成功捕获目的细胞；3）各组中VE-adherinmRN