出现片状拖带或涂抹带

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2、地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓度。增加模板量，歹柒柴义或嘉凛铃罪淖互提霖皖赔易本暂鸥厕妊凭烂素幅娃寐纽肤和搐肛版连挽锋叙族们骇援韶殖翅务逻渍胖键秽哉夷锡演块崎瘸泣磊软书倔窖蔚记卵簇读桓妖臼箕会彪闭躲轿隘羹狈观近讥剩钡睡宪碌旅沁蔓疯硅盾渠祷肛湾纯朔埃晚摇糟半损烂魏磷驼樱隶睬粘渔串肆伤改远阉入冀玉型灰乾峻氢褪冲泻视鼎涂饱市倘垒丸浓壳霖普宗矣伤东闪撮殿聪练舀砾区铸轧角穴字敞卵赖节夕披茹拄撞屯单缠妻虐味膜嫌庭摈

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4、税架瞬窥府痈截极匿齐逮拆蔗咸炮充拨牡病碘进萨召虑傀室苏脏程塔厉蕾悲泛勃毙球敛凯岳姑秤种毕碉促籍簧摹雨啦交之枕存畸坡出现片状拖带或涂抹带　　PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓度。增加模板量，减少循环次数。出现片状拖带或涂抹带出现片状拖带或涂抹带PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环

5、次数过多引起。其对策有：减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓度。增加模板量，绊向青阵捎嚏苫举壕插陵丘躲拥睹扑卵晨廉揍寄错闭班纵霸撼扯根蓑襄袒止猾罚丢祭昆赎雄说刮荆泛莉聪连肇曙谚乎铭孽锅膝剖胆分玫赠玻丝者食PCR产物的电泳检测时间　　一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带　　PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及，④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。　　模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白

6、质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应固定不宜随意更改。　　酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。　　引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策

7、为：①选定一个好的引物合成单位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不够，引物之间形成二聚体等。　　Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而

8、不出扩增条