从鸭蛋黄蛋白提取卵黄高磷蛋白与制备肽螯合钙工艺研究

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1、万方数据浙江大学硕士学位论文摘要本文以提取蛋黄卵磷脂和蛋黄油后的鸭蛋黄蛋白为原料，研究盐水浸提法对卵黄高磷蛋白提取效果的影响，确定氯化钠溶液提取卵黄高磷蛋白的工艺参数；研究过氧乙酸对鸭蛋黄蛋白的处理效果，确定适宜的过氧乙酸预处理工艺：在过氧乙酸预处理的基础上，研究六种商品化蛋白酶：胰蛋白酶、中性蛋白酶、风味酶、碱性蛋白酶、动物蛋白水解酶、木瓜蛋白酶对鸭蛋黄蛋白的酶解效果，筛选出适合鸭蛋黄蛋白水解的较佳用酶，采用多酶分步水解法，考察不同的酶组合对鸭蛋黄蛋白的水解效果，确定适宜的多酶水解工艺条件；以鸭蛋黄蛋白酶解多肤液

2、和无水氯化钙为原料，研究湿法螯合条件对钙螯合率的影响，确定鸭蛋黄蛋白酶解多肽液与无水氯化钙的最适螯合条件，并利用无水乙醇沉淀制备鸭蛋黄蛋白肽螯合钙。主要研究结果如下：1．以鸭蛋黄蛋白为原料，采用氯化钠溶液提取卵黄高磷蛋白，设计四因素三水平的。向应面优化试验，确定了卵黄高磷蛋白的最佳提取工艺为：氯化钠浓度12％，提取时间5h／次，洗涤次数5次，液料比12：1；在此条件下，卵黄高磷蛋白得率的理论极值为5．47％。卵黄高磷蛋白的得率为5．27％，提取率为88．16％。2．以鸭蛋黄蛋白为原料，过氧乙酸对鸭蛋黄蛋白进行了预处

3、理。采用多指标综合评分法，确定了过氧乙酸预处理的最佳工艺条件：过氧乙酸浓度0．2％，处理时间40min，底物浓度5％，处理温度50℃。3．研究了鸭蛋黄蛋白水解的蛋白酶筛选与复配。以水解度为指标，筛选出了适合于酶法制备鸭蛋黄蛋白多肽的蛋白酶：中性蛋白酶、碱性蛋白酶和风味酶。试验以水解度为指标，通过单因素和正交试验设计，优化出了单酶水解工艺：中性蛋白酶：底物浓度为5％，酶添加量为O．8％，水解时间为7h，pH值为7．0，水解温度为500C，在此条件下，水解度可达54．38％；碱性蛋白酶：底物浓度为5％，酶添加量为1．2

4、％，水解时间为12h，pH值为9．5，水解温度为55"C，在此条件下对鸭蛋黄蛋白进行水解，水解度可达58．18％；风味酶：底物浓度5％，酶添加量2．1％，水解时间12h，pH值为7．0，水解温度为50"C，在此条件下，水解度可达33．41％。以水解度和水解液氮得率为指标，研究了中性蛋白酶+风味酶，碱性蛋白酶n万方数据浙江大学硕士学位论文摘要+风味酶，中性蛋白酶+碱性蛋白酶，碱性蛋白酶+中性蛋白酶，中性蛋白酶+碱性蛋白酶+风味酶，碱性蛋白酶+中性蛋白酶+风味酶6种蛋白酶组合对鸭蛋黄蛋白的酶解效果，筛选出了中性蛋白酶+

5、碱性蛋白酶+风味酶作为最佳蛋白酶组合，即水解工艺为：底物浓度为5％，中性蛋白酶在酶添加量为0．8％，pH值为7．0，水解温度为50℃条件下，水解7h，然后调节pH9．5，在碱性蛋白酶：酶添加量为1．2％，pH值为9．5，水解温度为55"C条件下，水解12h，最后调节pH7．0，在风味酶：酶添加量2．1％，pH值为7．0，水解温度为50℃条件下，水解12h。在此条件下，水解度可达85．84％，水解液氮得率可达91．62％。通过对其水解产物肽分子量的分布的研究，发现水解产物中至少有8种不同分子量的肽类物质，相对分子质量

6、均在10000Da以下，分子量低于3196Da的短肽含量达73．34％。4．鸭蛋黄蛋白酶解多肽液在一定条件下与Ca2+进行螯合，制备鸭蛋黄蛋白多肽螯合钙。试验以螯合率为指标，采用正交试验设计，确定了最佳螯合条件为：质量比7=l、pH6．5、时间30min、温度65。C，此条件下螯合率可达70．83％。关键词：鸭蛋黄蛋白；卵黄高磷蛋白；过氧乙酸；多酶分步水解；水解度；分子量分布；鸭蛋黄蛋白肽螯合钙nI万方数据浙江大学硕士学位论文AbstraetAbstractInthispaper,duck’Seggyolkprot

7、einofphospholipidandeggyolkoilextractionwaschosenastherawmaterial，andtheeffectofsaltextractionmethodonthephosvitinextractionwasinvestigated，andthentheoptiumextractionparameterswasdetermined；theperformanceofperaceticacidpretreatmentonduck’Seggyolkproteinwasstud

8、ied，andthesuitablepretreatmentconditionwasdetermined；basedonperaceticacidpretreatment，theeffectsofsixcommercialproteases(trypsin，neutralprotease，flavourzyme，alkalineprotease，animal