补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷对大鼠血管内膜损伤后主动脉内

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1、补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷对大鼠血管内膜损伤后主动脉内【摘要】　　目的：探讨补阳还五汤及其有效组分生物碱和苷类对大鼠血管内膜损伤后主动脉内膜增生和增殖细胞核抗原（proliferatingcellnuclearantigen,PA）表达的影响。方法：用国产2.0F球囊导管建立大鼠主动脉内皮剥脱模型，术后第1天开始灌胃给药，术后第15天取胸主动脉血管损伤段测定内膜增生程度及增殖细胞核抗原（proliferatingcellnuclearantigen,PA）的表达。结果：剥脱术后第15天，模型组大鼠主动脉内膜出现显著增生。与假手术组比较，术后各组

2、中膜增生不明显(P＞0.05)，内膜增生明显(P＜0.01)。生物碱组、苷组、补阳还五汤原方组和阿伐他汀组血管内膜增生程度轻于模型组(P＜0.01)。模型组PA表达高于假手术组(P＜0.01)。生物碱组、苷组、阿托伐他汀组PA表达高于假手术组(P＜0.05,P＜0.01)，但均低于模型组(P＜0.01)。补阳还五汤原方组大鼠PA表达高于假手术组(P＜0.01)，虽低于模型组，但差异无显著性意义(P＞0.05)。结论：补阳还五汤有效组分生物碱和苷类均可抑制血管内皮剥脱后的血管内膜增生，可能为补阳还五汤抗血管内膜增生的药效物质基础之一，其抗血管内膜增生的

3、作用可能与降低PA表达有关。【关键词】补阳还五汤生物碱苷球囊导管血管平滑肌细胞形态计量学增殖细胞核抗原　　Objective:ToexploretheeffectsofalkaloidsandglycosidesextractedfromBuyangHuanedicine,onaorticintimalhyperplasiaandtheexpressionoftheproliferatingcellnuclearantigen(PA)inratsalinjuries.　　Methods:Thevesselrestenosismodelesticbal

4、looncatheterinrats.Drugsinisteredintragastricallyonthefirstdayafteroperation.TheinjuredsegmentsofaortainethedegreeofintimalhyperplasiaandobservetheexpressionofPA.　　Results:Aorticintimalhyperplasiasediahyperplasiasinthedrug?treatedgroupsalhyperplasiaarkableaspared?operatedgroup(

5、P＜0.01).ThedegreesofintimalhyperplasiainBYHC)发生表型转化和增殖，这是导致血管狭窄的主要原因之一。前期研究表明，用国产2.0F球囊导管致大鼠主动脉内膜剥脱损伤后，在术后14～21d出现明显的血管内膜增生而引起血管狭窄，其内膜增生主要是由于VSMC增殖所致［1］。补阳还五汤（BuyangHuang/片，德国GodeckeGmbH生产，辉瑞制药有限公司分装，批号为65837019，临用时以去离子蒸馏水配成1mg/ml混悬液。补阳还五汤原方由黄芪60g、赤芍9g、川芎6g、当归9g、地龙9g、红花9g和桃仁9g组

6、成。以水煎醇沉法制备补阳还五汤原方提取液，生药浓度1.11g/ml。原方提取液再采用酸碱沉淀和离子交换树脂层析等方法提取生物碱、苷，原液煎取和提纯均由湖南中医药大学药学院中药制剂实验室完成。两类有效组分分离完全，相互之间无混杂。苷类有效组分主要含黄芪皂苷、芍药苷、苦杏仁苷和黄酮苷等。生物碱类有效组分主要含川芎嗪和阿魏酸等。全方提取物和各有效组分提取物的高效液相色谱测定图谱见图1。以高效液相色谱法（high?performanceliquidchromatography,HPLC）测定有效组分中质控物的含量，苷提取液中质控物黄芪甲苷含量为1.4mg/g

7、苷，以去离子蒸馏水配成0.71g苷/ml；生物碱提取液中质控物川芎嗪含量为6mg/g生物碱，以去离子蒸馏水配成0.083g生物碱/ml。　　1.2实验方法　　1.2.1动物模型建立方法大鼠主动脉内皮剥脱模型建立参照文献［1］改良：大鼠以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，作颈部正中切口，暴露并游离左颈总动脉1～1.5cm，远心端结扎，在左颈总动脉近心端用动脉夹阻断后，于颈总动脉远心端剪一“V”形切口，插入国产2.0F球囊导管，仔细操作导管越过主动脉弓入胸，下至腹主动脉，深度约为6～7cm。自导管尾端注入生理盐水0.2～0.4ml充盈球囊，使球囊膨胀至回拉时

8、有较明显的阻力感，保持阻力一致缓慢回拉导管至主动脉弓处，如此重复6次，再以导丝为轴线旋转球囊180度，使球囊