血清hbv标志物、前s1抗原与hbvdna检测结

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1、血清HBV标志物、前S1抗原与HBVDNA检测结【摘要】目的探讨HBV血清标志物前S1抗原(HBVPreS1-Ag)与HBVDNA的相关性。方法用ELISA法对乙肝患者分别进行五项HBV血清标志物,前S1抗原检测,同时采用PCR法检测HBVDNA的含量。结果大三阳组前S1抗原(+)检出率均高于小三阳组。前S1抗原(+)组血清HBVDNA检出率为89%。结论在HBV血清标志物、前S1抗原与HBVDNA联合检测为判断HBV复制和传染性以及指导临床治疗提供更可靠的实验依据。【关键词】血清HBV标志物乙肝前S1抗原荧光定量PCRHBVDNA乙型肝炎是严重威胁我国人民健康的传染病,主要经血液传播

2、。乙型肝炎病毒(HBV)感染人体后,血中可出现大量HBV颗粒。完整的病毒颗粒含有外衣壳抗原和内衣壳抗原,含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒上,外衣壳抗原包括乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、前S1抗原和前S2抗原。内衣壳抗原包括乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)和e抗原(HBeAg)。前S1蛋白在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应等方面具有十分重要的作用。笔者对本院门诊及住院882例乙肝患者进行HBV五项血清学标志物,前S1抗原和HBVDNA的检测,以探讨HBV与前S1抗原和HBVDNA之间的相互关系,现报告如下。1材料和方法1.1标本2007年1月-2009年10月来本

3、院就诊的门诊及住院患者同时检测乙肝五项血清学标志物、前S1抗原及HBVDNA检测共822例。其中男性531例,女性281例。年龄最小的13岁,最大的79岁,平均46岁。1.2检测仪器DNM-9602G酶标仪(北京普朗公司生产),DNX-9620洗板机(北京普朗公司生产)7600PCR荧光定量扩增仪(广州产)移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司)。1.3试剂HBV五项血清学标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeA、bHBcAb)试剂盒均由厦门新创生物有限公司提供。乙肝前S1抗原(HBVPreS1)检测试剂由广州中山大学达安基因股份有限公司提供。1.4检测方法HBVDNA采用荧

4、光定量PCR法。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,前S1抗原均采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测。并严格按说明书操作。1.5统计学处理采用X2检验及配对t检验。2结果822例乙肝患者血清标本中,前S1抗原阳性446例,阴性376例。HBVDNA阳性462例,阴性360例。由表(1)可知,大三阳组前S1抗原(+)检出率和HBVDNA阳性检出率均高于小三阳组,差异有统计学意义(P<0.001、P<0.05)3讨论3.1国内有报道前S1抗原是反映HBV感染的慢性化和严重程度及病毒复制的指标[1]。本文结果显示387例大三阳组中,前S1抗原(+)检出

5、率为89%,其中HBVDNA阳性检出率达91%,与前S1抗原阳性率具有一致性。大三阳组和HBsAg(+)、HBcAb(+)组与小三阳组的差异有统计学意义。表明这些患者HBV具有较高的复制水平,具有传染性的重要标志。3.2236例小三阳血清中76例检出前S1抗原阳性。检出率为32%,82例检出HBVDNA阳性,检出率为35%。虽然阳性率低于大三阳组,但仍具有较强的传染性。3.3108例HBeAg(+),HBcAb(+)血清中前S1抗原阳性23例检出率为21%,有29例检出HBVDNA阳性,检出率为27%。提示该组患者仍具有较强的病毒复制,传染性强。此情况可能为血清转换期前C区突变,若经过

6、动态观察,仍表现HBsAg(+)、HBcAb(+)及HBVDNA阳性,可能为前C区突变。[2]3.421例HBsAg(+)、HBeAg(+)组的前S1抗原阳性为2例,检出率为10%。HBVDNA阳性3例检出率为15%。30例HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)患者血清中,前S1抗原全部阴性,HBVDNA全部阴性检出率为0。有学者人为此现象有可能与HBVDNA前C区发生突变有关,出现免疫逃逸。小结:本文检测结果表明,ELISA与PCR两种方法可更全面反映HBV感染与复制,几种血清学标志物模式都有一定的前S1抗原和HBVDNA检出率。由于前S1抗原和HBVDNA阳性表示HB

7、V在体内复制,若仅以HBV血清标志物检查结果作为判断HBVDNA感染、传染性以及HBV是否在体内复制,有一定的局限性。文献报道HBVDNA的出现早于其他血清标志物,当受检者处于早期感染时PCR的高灵敏度可为早期诊断HBV感染提供依据[3]。因此,为临床提供DNA感染、复制及传染性判断以及指导治疗和观察疗效,建议联合乙肝标志物以及前S1抗原和PCR检测HBVDNA。[4]

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