乳杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的影响论文

《乳杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、乳杆菌对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜的影响论文马强，张方信，赵丽，陈嘉屿【摘要】目的：探讨乳杆菌(LA)对溃疡性结肠炎(UC)大鼠肠黏膜的影响及相关机制.方法：30只SD大鼠随机分为正常对照组、UC模型组、LA预防组,每组10只.采用葡聚糖硫酸钠制作UC大鼠模型;LA预防组在造模前7d给予LA灌肠,观察各组大鼠粪便性状及光学镜下大肠黏膜的改变.采用RTPCR检测IL1β，TNFα和IL8表达.结果：正常对照组粪便正常,黏膜腺体结构完整,无炎细胞浸润.UC模型组从最初出现腹泻，发展到肉眼血便，组织切片也证实了腺体破坏、炎细胞浸润、绒毛脱落

2、等炎症损伤.LA预防组较UC模型组的炎症程度明显减轻，TNFα,IL1β和IL8的mRNA表达显著低于UC模型组(P0.05).结论：LA具有预防UC作用.freelucosainratsechanism.METHODS:ThirtySDratslydividedinto3groups:normalcontrolgroup,UCmodelgroupandLactobacilluspretreatedgroup,10ratspergroup.UCmodelinrat.Lactobacilluspretreatedgroupodel

3、ing.Thechangesinthepropertiesofdejectaandcolonicmucosaofratsicroscope.TheexpressionsofTNFα,IL1βandIL8mRNAalandglandsstructuresmatorycellsinvadedincolonicmucosa.TheratsinUCmodelgroupappeareddiarrheaoriginallyanddevelopedbloodydejectathatcouldbeobservedbynakedeye,andthet

4、issuesectionobservationrevealedthatglandsmatorycellsinvadedandflossesshedincolonicmucosa.Lactobacilluspretreatedgroupodelgroupinthedegreeofinflammationofcolonicmucosa.TNFα,IL1βandIL8mRNAexpressionsinLactobacilluspretreatedgroupodelgroup(P0.05).CONCLUSION:Lactobacillu

5、scanpreventulcerativecolitisandthemechanism,DSS）(美国Sigma公司)，Mr5000，配制成50g/L的水溶液，4℃冰箱保存；Trizol试剂盒(Invitrogen公司)；RT试剂盒(美国MBI公司)；PCR试剂盒(赛百胜公司)；琼脂糖(AMRESCO进口分装)；DNAmarker(大连TaKaRa公司)；光学显微镜(日本Nikon)；PCR扩增仪(德国Biometra)；UVITec凝胶成像系统(英国UVITec公司)；嗜酸乳杆菌(L.acidophilus，LA)标准菌株AS1.187

6、8,由中国科学院微生物研究所菌种保藏中心提供，在微需氧环境中复苏培养于MRS培养基，以PBS稀释至5×1012CFU/L细菌悬液备用.SD大鼠（购自广州南方医院动物中心），雌雄各半，体质量180～200g，共30只.随机分为正常对照组、UC模型组、LA预防组，每组10只.正常对照组：一直自由饮用蒸馏水；UC模型组：用50g/LDSS溶液给大鼠自由饮用，连续应用7d；LA预防组：LA灌肠7d后，自由饮用50g/LDSS7d，所给LA的剂量为1.5mL/只.制模过程中每日观察腹泻和肉眼血便情况.1.2方法在实验结束时处死大鼠，取部分肠段置于多

7、聚甲醛内固定、包埋、切片、HE染色，行一般组织病理学观察.在距大鼠肛门5cm处剥取30～50mg肠黏膜，提取RNA，提取总RNA采用异硫氰酸胍一步法.TNFα,IL1β,IL8引物序列参照文献［1-2］的方法，由上海博亚生物工程公司合成(表1).RTPCR参照试剂盒说明书操作，扩增仪上完成.反应条件为：50℃逆转录30min，PCR反应条件为：变性94℃45s，退火58℃1min，延伸72℃45s，共30个循环，最后72℃延伸10min.扩增产物电泳后，采用GelProAnalyzer4.0软件（美国MediaCyberics公

8、司）根据电泳条带的面积和亮度计算出每个条带的积分吸光度.以待测细胞因子的吸光度对同一标本GAPDH（内对照）吸光度的比值表示该细胞因子mRNA的表达水平.表1扩增引物序列统计学处理：实验结果以