丁苯酞对癫疒间小鼠保护作用的研究论文

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1、丁苯酞对癫疒间小鼠保护作用的研究论文【摘要】目的观察丁苯酞对癫疒间小鼠大脑的保护作用，并初步探讨其作用机制。方法预先给予小鼠丁苯酞腹腔注射，30min后腹腔注射戊四唑诱发癫疒间，对小鼠脑组织ATP酶(ATPase)的活力及抗氧化指标进行观察。结果丁苯酞能降低丙二醛的含量，增强总超氧化物歧化酶、Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活力及总抗氧化能力，与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论丁苯酞能增强癫疒间小鼠脑内ATP酶的活力及抗氧化能力，从而可能缓解癫疒间的发作。【关键词】丁苯酞

2、;癫疒间;ATP酶;抗氧化丁苯酞(butylphthalide，NBP)是我国国家一类新药.freelalonaldehyde，MDA)、总超氧化物歧化酶(totalsuperoxidedismutase，T-SOD)、总抗氧化能力(totalantioxidativecapability，T-AOC)和ATP酶试剂盒(均购自南京建成试剂公司)，双蒸水。其他试剂均为分析纯。1.2仪器752紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)，低温高速离心机(eppendorfAG，Centrifuge5804R)，FA25超声

3、匀浆机(上海弗鲁克流体机械制造有限公司)，自动双重纯水蒸馏器(型号SZ-93，上海亚荣生化仪器厂)，梅特勒托利多AE240电子天平(1/100000，瑞士MettlerToledo)。1.3动物健康昆明种小鼠，体重20~30g，雌雄各半，徐州医学院实验动物中心提供〔SYXK(苏)2007-0037〕。小鼠均以标准饲料喂养，自由摄食、饮水，自然光照射，换气扇通风，室温保持在22℃左右，实验时避免噪声干扰。1.4实验分组与给药按分层随机区组设计，将小鼠分成7组，使各组小鼠的平均体重和性别比例相似，每组14只，分别为生理

4、盐水组(NS组，生理盐水)、溶媒组(PEG组，30%PEG400)、模型组(MG组，30%PEG400+戊四唑)、丁苯酞低剂量组(NL组，0.2g/kgNBP+戊四唑)、丁苯酞中剂量组(NM组，0.4g/kgNBP+戊四唑)、丁苯酞高剂量组(NH组，0.8g/kgNBP+戊四唑)、地西泮组(DG组，2.5mg/kg地西泮+戊四唑)。各组小鼠首先根据分组分别给予相应的生理盐水、30%PEG400、地西泮和不同剂量的NBP;30min后，模型组、地西泮组及各剂量丁苯酞组均给予100mg/kg的戊四唑致疒间。各组小鼠均按

5、0.2ml/10g腹腔注射给药。1.5小鼠脑组织Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、MDA、T-SOD和T-AOC的检测1.5.1小鼠脑匀浆的制备小鼠致疒间50min后，各组小鼠冰上断头取脑(包括皮质及海马)，在冷生理盐水(4℃)中洗去血液，在滤纸上吸干水分称重，加入适量冷生理盐水，匀浆机匀浆1min以彻底混匀组织液，3500r/min冷冻离心15min，取上清，-70℃保存，待测。1.5.2指标检测考马斯亮兰法测定蛋白含量，通过测定光密度计算蛋白含量;定磷法测定ATP酶;TBA法测定MD

6、A，532nm处有最大吸收峰;黄嘌呤氧化酶法测定T-SOD;比色法测定T-AOC。1.6统计学处理应用SPSS13.0统计软件处理，数据以±s表示，组间比较采用单因素方差分析和q检验，P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1丁苯酞对过氧化指标的影响丁苯酞能明显降低MDA的含量，增强T-SOD及T-AOC的活力，与模型组(MG组)比较差异有统计学意义(P0.05)。见表1。表1丁苯酞对过氧化指标的影响2.2丁苯酞对ATP酶的影响丁苯酞能明显增强Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活力，与模

7、型组(MG组)比较差异有统计学意义(P0.05)，且NH组Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活力高于NS组和DG组。见表2。表2丁苯酞对ATP酶的影响3讨论丁苯酞的化学名是消旋-3-正丁基苯酞，化学式是C12H14O2，为人工合成的消旋体，目前主要用于治疗急性缺血性脑卒中。临床研究结果表明，本品与丹参注射液静脉输注联合应用对急性缺血性脑卒中患者中枢神经功能的损伤有改善作用，可促进功能恢复。本品可能通过降低花生四烯酸含量，提高脑血管内皮一氧化氮和前列环素的水平，抑制谷氨酸释放，降低细胞内钙

8、浓度，抑制自由基和提高抗氧化酶活性等机制而产生上述作用2。癫疒间的反复发作造成慢性脑缺氧、脑功能障碍，使组织在氧代谢障碍时产生自由基，对脑细胞产生过氧化损伤。细胞膜是最易受自由基攻击的部位之一。自由基反应能引起膜脂质紊乱和脂质过氧化反应，导致细胞水肿，细胞膜构型、结构和对离子通透性的改变，影响Na+、K+等离子的流动，使Ca2+进入细胞内。同时自由基还可引起