高效液相色谱法测定牛黄清火丸中黄芩苷的含量论文

《高效液相色谱法测定牛黄清火丸中黄芩苷的含量论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、高效液相色谱法测定牛黄清火丸中黄芩苷的含量论文【摘要】目的：建立牛黄清火丸的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：ThermoODS-2HYPERSILC18（4.6mm×250mm，5μm），流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液（45：55，V/V），流速：1.0ml·min-1，检测波长：312nm，柱温：30℃。结果：黄芩苷在0.01～0.06mg·ml-1范围内线性关系良好（r=0.9996）；平均加样回收率为99.06%，RSD=0.8%（n=9）。结论：该方法简便易行.freelinationofBaicalininNiuhu

2、angqinghuopillsbyHPL【Abstractobjective】TosetupamethodforqualitycontrolofNiuhuangqinghuoethodination.COLUMNC18-ThermoODS-2HYPERSIN(4.6mm×250mm,.freel).Themobilicphaseethanol-0.4%phosphoricacidsolution(45:55V/V).Thecolumntemperature,flol·min-1.RESULTSTheBaicalinaverageofrecov

3、eryrateethodissimple,accurateandsuitableforitsassaying.【Keyination牛黄清火丸为《卫生部药品标准》第七册（中药成方制剂）收载的品种，由黄芩、桔梗、牛黄、山药、丁香等9味中药组成，具有清热、散风、解毒之功效。临床用于肝胃肺蕴热引起的头晕目眩，口鼻生疮，风火牙痛，咽喉肿痛，痄腮红肿，耳鸣肿痛1，疗效良好。处方中黄芩为君药，黄芩苷为其主要有效成分，原标准中只有显微鉴别和薄层色谱。为了更好地控制制剂的内在质量，本文采用高效液相色谱法测定牛黄清火丸中黄芩苷的含量，以期为该制剂的质量提供快速

4、、准确的测定方法，现报告如下。1仪器与试药LC－2010A高效液相色谱仪，CLASS－VP色谱工作站；黄芩苷对照品（批号：110715-200212），由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用；牛黄清火丸为市售样品（哈药集团世一堂制药厂，规格3g/丸，批号：0604158，0604272，0605126）。甲醇为色谱纯；水为超纯水；其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱：ThermoODS-2HYPERSINC18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇-0.4%磷酸溶液（45：55，V/V）；检测波长

5、：312nm；流速：1.0ml·min-1；柱温：30℃。理论板数按黄芩苷峰计应不低于5000。2.2溶液制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时以上的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成0.1mg·ml-1的对照品贮备液；再精密量取对照品贮备液适量，加甲醇制成30μg·ml-1的对照品溶液，即得。2.2.2供试品溶液的制备取重量差异项下的牛黄清火丸，剪碎，混匀，取约1g，精密称定，加70%乙醇30ml，超声处理30分钟，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用少量70%乙醇分次洗涤容器和残渣，洗液滤入同一量瓶中，加70%乙醇至

6、刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品溶液2。2.2.3阴性对照溶液的制备取除黄芩以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成大蜜丸，再按供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。2.3专属性试验分别精密吸取供试品溶液、阴性对照溶液和对照品溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。由图1可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间（黄芩苷11.850min）的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。2.4线性关系考察精密吸取黄芩苷对照品贮备液（浓度：0

7、.1mg·ml-1）各适量，分别置于10ml量瓶中，加甲醇定容，配成浓度分别为0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06mg·ml-1的溶液6份，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤。精密吸取续滤液各10μl，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积（A）为纵坐标，其浓度（C）为横坐标，得黄芩苷的回归方程为：A=28905511.43C－4455.07，r=0.9996（n=6）。结果表明，黄芩苷在0.01～0.06mg·ml-1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系。2.5精密度和稳定性试验精密吸取黄芩苷对照品溶液（0.03mg·ml-

8、1）10μl，在上述色谱条件下重复进样5次，求得黄芩苷溶液峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.8%，表明精密度较好。取同一对照品溶液，在0、4、8、12、24h分别