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1、反相高效液相色谱法测定人血浆中甲氧氯普胺姓名，2014年6月25日反相高效液相色谱法测定人血浆中甲氧氯普胺【摘要】目的建立HPLC法测定人血浆中甲氧氯普胺的浓度。方法采用地西泮为内标，血浆经碱化后，乙酸乙酯提取。色谱杜为Hypersil0DSC184.0mmx250mm,流动相为含0.03%三乙胺的甲醇：水（75：25），流速l.Oml/min，紫外276nm波长检测。结果甲氧氯普胺血清浓度在3.7〜660.0ng/ml內具冇良好线性关系，最低检出限为2.0ng/ml，方法回收率为92.7%〜97.9%,日内、日问R
2、SD均10%。结论本法简便、准确、灵敏，适用于甲氧氯普胺血药浓度监测和药代动力学研究。【关键词】甲氧氯普胺；血药浓度；高效液相色谱DeterminationofmetoclopramideinhumanplasmabyRP-HPLC【Abstract】ObjectiveTodevelopamethodforthedeterminationofmetoclopramideinplasmausingRP-HPLC.MethodsTheinternalstandardwasdiazepam,thesampleswereex
3、tractedbyethylacetateafterbasifiedtheplasma.,thecolumnwasHypersilCl8,andthemobilephasemixedofmethanol:water(75:25)containing0.03%-triethylamine.Thedetectionwavelengthwas276nm.ResultsThecalibrationcurveswerelinearwhenthemetoclopramideconcentrationinseruminrangeo
4、f3.7〜660.0ng/ml,thelimitofdetectionwas2.0ng/ml,methodrecoverywas92.7%〜97.9%,theRSDofwithin-dayandbetween-daywerelessthan10%.ConclusionThemethodissimple,sensitiveandaccuratetomonitorplasmaconcentrationduringclinicalpharmacokeniticstudyofmetoclopramideinhuman.【Ke
5、ywords】RP-HPLC；metoclopramide;drugconcentrationinplasma甲氧氯普胺（Metoclopramide,胃复安）为多巴胺受体阴.滞剂，具TT强人的屮枢性镇吐作用，并可促进胃及上部肠段运动，临床上用于治疗癌症放、化疗和手术后的呕吐、反流性食管炎、胆汁反流性胃炎等胃肠道疾病。有关甲氧氯普胺的血清浓度测定方法，M内文献采用紫外薄层扫描[1],灵敏度低，仅适合大剂量样品，同外文献报道的方法宥GC、GC-MS和HPLC[2〜4]。本文建立的以地西泮为内标反相高效液相色谱法测定甲氧
6、氯普胺血浓度与文献相比[2],方法简便、准确、灵敏度高。可用于甲氧氯普胺血清浓度测定及其体内药代动力学研究。1材料与方法1.1药品与试剂T氧氯普胺、地西泮标准品均购自中U生物制品检定所，甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。1.2仪器HEWLETT-PACKARD1050型高效液相色谱仪，HP35900D化学工作站1.3色谱条件色谱柱为HypersilODSC184.0mm><250mm（p5nm；流动和为含0.03%三乙胺的甲醇.•水（75:25）,流速l.Oml/min;紫外检测波长276nm，灵敏度0.01AuFS
7、;柱温30°C。1.4标准溶液配制精确称取甲氧氯普胺标准液适量，甲醇溶解、稀释,配成0.44mg/ml标准溶液，置4°C冰箱备用。1.5A标溶液配制精确称取地西泮标准品适量，甲醇溶解、稀释，配成0.24mg/ml标准内标溶液，置4°C冰箱备用。1.6样品处理取血浆1.0ml于离心管内，加入内标溶液4gl,加入pH9.0磷酸盐缓冲液0.4ml,加入乙酸乙酯3ml,旋涡震荡2min,以2000r/min速度离心lOmin,取出乙酸乙酯层后，冉次加入乙酸乙酯3ml于离心管内提取，合并2次乙酸乙酯提取液，40°C恒温下氮气吹
8、干，残渣用80
9、J甲醇溶解，进样20pl。2实验结果2.1色谱与分离本实验条件丁，样品提取较干净，甲氧氯普胺峰与内标峰分离完全，血浆内源性杂质对测定无干扰，色谱图见图1、图2。（略）2.2线性关系与最低检测限分取空白血浆lml,分别加入适量甲氧氯普胺标准溶液，配成3.7ng/mkll.Ong/mk33.0ng/ml、110.0ng/ml、330
