鲜切果蔬贮藏实验测定方法

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1、失重率:(贮藏前土豆质量■贮藏后土豆质量)/贮藏前土豆质量X100%8个土豆,在被测定土豆上贴标签。硬度:用GY-1型果实硬度计测定。将土豆切去表皮,然后将硬度计垂直于被测表面,在均匀力的作用下将压头压入果肉内5mm,以此时指针的读数作为土豆的硬度。随意挑选4个土豆,每个土豆取5个硬度值。共计20个硬度值。首先调零,转动表盘,指针与刻线2重合,然后用刀将水果削去1平方厘米左右的皮。测量:右手握硬度计,使硬度计垂直于被测水果表面,在均匀力的作用下将压头压入水果内,此时指针开始旋转,当压到压头刻线时(压入10毫米)停止,此时指针指的刻度值即为所测的硬度

2、值。测量完毕后按动复位按钮,指针回到调零2处。细胞膜透性测定:将土豆切成2mm的圆片,称取lg,放入25ml重蒸馅水中,25°C恒温浸泡lh,搅拌均匀后用DDS-11A电导率仪测定浸提液的电导率,然后加热至沸腾30min,自然冷却至25°C加重蒸憾水至25ml,再测定其全渗电导率。以土豆浸提液前后2次电导率的差值与全渗电导率比值作为细胞膜透性变化的指标。白度值:口度计测定。PPO和POD的提取:取3克土豆组织,加入6mlpH6.8的0.05M磷酸缓冲液(内含5%(w/v)PVP,0.01(v/v)TritonX-100)冰浴研磨,4°C15000r

3、/min条件下离心20min,收集上清液用于酶活性测定。PPO活性测定:4.8mLpH6.8的磷酸缓冲液,1mL0.05M的邻苯二酚溶液,20°C恒温水浴,空白加0.2mLpH6.8的磷酸缓冲液,在分光光度计上调空白,然后在同一反应体系加0.2mL酶提取液,立即在420nm处测定OD值,每30s读数记录OD值变化,记录2mino酶活以每分钟内OD值变化0.01为1个活性单位U。重复测定3次。POD活性测定:4.4mLpH6.8的磷酸缓冲液,0.4mL愈创木酚(2%),25°C恒温水浴,力P0.2mLH2O2(0.46%),空白加lmLpH6.8的磷

4、酸缓冲液。在分光光度计上调空白,然后在同一反应体系加lml酶液,在25°C恒温水浴中反应3分钟,立即在470nm处测定OD值,每30s读数记录OD值变化,记录2min。酶活以每分钟内OD值变化0.01为1个活性单位U。重复测定3次。可溶性固形物:5g土豆研磨,用三层纱布过滤,用阿贝折射仪测定,重复3次。将土豆液氮处理后低温冷藏,以后测定酶的活性。对货架期土豆相关指标进行测定。细菌总数测定:涂布法(营养琼脂培养基)。无菌操作,称取10g样品置于含有90mL,0.85%灭菌生理盐水(0.1%吐温280,适量的玻璃珠),经充分振摇,作10倍稀释,选择2〜

5、3个适宜稀释度,各取0.ImL稀释液加入己制备的平板进行涂布,在36度恒温培养箱中培养24h,菌落记数。细菌总数测定”倒平板法:菌落总数依据GB/T500-96《食品卫生检验方法》,在无菌操作条件下,取15g鲜切苹果样品于225ml•无菌水中,充分振荡后形成1:10的均匀稀释液。取1:10稀释液1ml,加入到装有9ml无菌水的试管内,振荡混匀后形成1:100稀释液,按上述操作顺序,做成10倍系列稀释液。根据贮藏期的不同,选择4个适宜稀释度,每一稀释度取1ml于无菌培养皿内,每个稀释度做4个平行。将冷却至50°C左右的营养琼脂培养基倒入平皿内在水平位

6、置上摇匀,待凝固后倒置于36+-re培养箱中培养24+-lh后进行菌落计数。计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克样品所含菌落总数。营养琼脂成分蛋白腺10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15〜20g蒸馅水lOOOmL制法将除琼脂以外的各成分溶解于蒸镭水内,加入15%氢氧化钠溶液约2讥,校正pH至7.2〜7.4。营养琼脂制作方法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸憾水内,加入15%氢氧化钠溶液约2讥,校正pH至7.2〜7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,121°C高压灭菌15mino注意:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用

7、于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%。呼吸强度:在培养皿中盛入.005molL/的Ba(oH)2溶液20ml,将培养皿放入空的干燥器底部,盖上干燥器盖子,用凡士林密封,吸收干燥器内CoZ,30分钟后倾倒出Ba(OH)溶液,用0.O227mol几的草酸滴定,此为空白值A。然后在另一培养皿中盛入.005mol压的Ba(OH)2溶液20ml,把培养皿放入空的干燥器底部,在干燥器上部置2009菜蔓,盖上干燥器盖子,用凡士林密封,同时计时开始,30mni后倾倒出B(aOH)2溶液,用0.0227mol凡的草酸滴定,此值为B。最后用公式计

8、算出单位样品的呼吸强度。所需药品试剂和仪器汇总仪器:电子天平、GYJ型果实硬度计、DDS-11A电导率仪、白度计、分光光度

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