08-26-09-27-564860.docx

《08-26-09-27-564860.docx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、附件3豆芽中植物生长调节剂的测定BJS2017031　范围本方法规定了豆芽中11种植物生长调节剂的高效液相色谱-串联质谱测定方法。本方法适用于豆芽中6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚乙酸、吲哚丁酸、2,4-二氯苯氧乙酸、4-氟苯氧乙酸、异戊烯腺嘌呤、氯吡脲、多效唑和噻苯隆的检测。2　原理试样经含1%甲酸的乙腈溶液匀浆提取，脱水，离心后，上清液经分散固相萃取净化，用高效液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。3　试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。3.1　试剂3.1.1　甲醇

2、：色谱纯。3.1.2　乙腈：色谱纯。3.1.3　甲酸：色谱纯。3.1.4　乙酸铵：色谱纯。3.1.5　无水硫酸镁。3.1.6　无水乙酸钠。3.1.7　十八烷基键合硅胶吸附剂（C18）：粒径范围为40μm—60μm。3.2　试剂配制3.2.1　含1%甲酸的乙腈溶液：量取10mL甲酸，加乙腈稀释至1000mL，混匀。3.2.2　含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵溶液：称取0.3854g乙酸铵，用水溶解并稀释至1000mL，加入1mL甲酸，混匀。3.3　标准品6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚乙酸、吲哚丁酸、2,4-二氯

3、苯氧乙酸、4-氟苯氧乙酸、异戊烯腺嘌呤、氯吡脲、多效唑、噻苯隆标准品，纯度均≥90%。标准品的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量详见附录A中的表A.1。—29——1.1　标准溶液的配制1.1.1　植物生长调节剂标准储备液（1mg/mL）：精密称取6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸、赤霉素、吲哚乙酸、吲哚丁酸、2,4-二氯苯氧乙酸、4-氟苯氧乙酸、异戊烯腺嘌呤、氯吡脲、多效唑、噻苯隆标准品（3.3）各10mg，分别置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度各为1mg/mL标准贮备液，-20℃保存

4、。1.1.2　混合标准中间液A（10μg/mL）：分别精密量取11种植物生长调节剂标准储备液（1mg/mL）（3.4.1）各1mL，置于同一100mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度均为10μg/mL的混合标准中间液A。1.1.3　混合标准中间液B（1μg/mL）：精密量取混合标准中间液A（10μg/mL）（3.4.2）1mL，置于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，制成浓度均为1μg/mL的混合标准中间液B。1.1.4　空白基质提取液：称取空白试样各10.0g（精确至0.01g），分别置于50mL具塞离心管中

5、，自“加入20mL含1%甲酸的乙腈溶液”起与样品同法处理（6.1和6.2），作为空白基质提取液。1.1.5　基质混合标准工作溶液：分别精密量取混合标准中间液B（1μg/mL）（3.4.3）0μL、10μL、20μL和40μL，及混合标准中间液A（10μg/mL）（3.4.2）10μL、15μL和20μL，用空白基质提取液（3.4.4）定容至1.0mL，作为基质混合标准工作溶液S0、S1—S6。浓度依次为0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、150ng/mL和200ng/mL，或依需要配

6、制适当浓度的基质混合标准工作溶液。临用新制。2　仪器和设备2.1　高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源）。2.2　涡旋混合器。2.3　离心机：转速≥10000r/min。2.4　电子天平：感量分别为0.01mg和0.01g。2.5　氮吹浓缩仪。2.6　高速匀浆机。2.7　具塞离心管：50mL和15mL。2.8　QuEChERS离心管：内含300mg无水硫酸镁和100mgC18。2.9　微孔滤膜：孔径为0.22µm有机相型微孔滤膜。3　试样制备与保存将豆芽切碎后用组织粉碎机充分粉碎混匀，均分成两份，作为试样和留样

7、，分别装入洁净容器中，密封并标记，于-18℃保存。—29——1　测定步骤1.1　提取准确称取10.0g（精确至0.01g）试样置于50mL具塞离心管（4.7）中，加入20mL含1%甲酸的乙腈溶液（3.2.1），高速匀浆2min，加入4g无水硫酸镁（3.1.5）和1g无水乙酸钠（3.1.6），立即涡旋混合1min，以10000r/min离心5min使乙腈和水相分层。1.2　净化精密量取上层乙腈溶液4mL置于QuEChERS离心管（含300mg无水硫酸镁和100mgC18）（4.8）中，涡旋混合2min，以14000r/min离心

8、5min，移取全部上清液于15mL离心管（4.7）中，于45℃水浴中氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，涡旋混匀1min，以14000r/min离心5min，上清液经0.22µm有机相滤膜（4.9）过滤后，取续滤液供高效液相色谱-串联质谱测定。1.3　色谱测定1.3.1　液相色谱