油松幼苗菌根围优良磷钾细菌的筛选与对油松的促生作用

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1、摘要本实验采用稀释平板法研究了褐环乳牛肝菌对油松幼苗根围土壤中微生物数量的影响，并从中分离和筛选出优良的解磷钾细菌对其进行显微观察、生物学鉴定和16SrDNA序列分析；通过单因素和正交试验筛选出优良的解磷钾细菌的最佳培养条件；最后验证褐环乳牛肝菌和解磷钾细菌混合接种对油松幼苗生长的影响。从而为复合菌根菌肥的研制提供依据。本论文主要试验结果和研究结论如下：1、褐环乳牛肝菌-油松幼苗菌根围与非菌根根围土壤中微生物数量相比，细菌增加了114.1%，放线菌增加了163.4%，固氮菌增加了100%，真菌增加了71.0%，解

2、钾细菌数增加了24.4%，解无机磷细菌增加了38.0%，解有机磷细菌增加了100%。多样性指数表现为：根围土>菌根根围土>非根围土。2、通过钼蓝比色法和原子吸收法筛选出一株解无机磷细菌P15和一株解有机磷细菌P6，其最大解磷量分别为898.5μg/mL和282.7μg/mL；三株解钾细菌K1，K12和K2，其最大解钾量分别为：21.63μg/mL，19.25μg/mL和26.38μg/mL。并且通过传统和分子鉴定相结合的方法鉴定出P6为Arthrobacternitroguajacolicus，P15为Pseud

3、omonasfluorescens，K2为Bacillusmucilaginosus，K12为Sinorhizobiumsp.，K1为Agromycescerinus。3、采用单因素和正交试验筛选出五株褐环乳牛肝菌-油松菌根根围优良磷钾细菌的7最佳培养特性，其中，P15（解无机磷）的最大菌落数为：19.46×10个/mL；P677（解有机磷）的最大菌落数为17.36×10个/mL；K1的最大菌落数为：2.218×1077个/mL；K12的最大菌落数为4.997×10个/mL；K2的最大菌落数为：18.79×10个

4、/mL。4、磷钾细菌与褐环乳牛肝菌混合接种可提高油松幼苗的菌根真菌侵染率，极大的改善油松幼苗的生长。其中，P6/SP、P15/SP、K1/SP、K2/SP和K12/SP组合比单接种侵染率分别提高了13.7%、36.1%、39.2%、24.5%和13.1%。与对照相比，P6/SP、P15/SP、K1/SP、K2/SP和K12/SP组合苗高增加了0.6120cm、1.514cm、1.898cm、2.231cm和0.3730cm，地径增加了0.14mm、0.19mm、0.08mm、0.37mm和0.29mm，生物量（干

5、重）增加了0.3177g、0.3542g、0.2024g、0.2264g和0.3370g。与对照相比，P6/SP和P15/SP组合使油松幼苗针叶的磷含量提高了14.7%和7.27%；K1/SP，K2/SP和K12/SP组合使油松幼苗针叶的钾含量分别提高了39.2%、24.5%和13.1%。关键词：磷细菌；钾细菌；外生菌根；油松；褐环乳牛肝菌IsolationofPhosphobacteriaandSilicateBacteriafromtheMycorrhizosphereofChinesePineandThei

6、rInfluenceontheGrowthofChinesePineAbstractPhosphobacteriaandSilicatebacteriawereisolatedbytheplatedilutionmethodfromthemycorrhizosphereofpinetrees.Theefficientstrainswereselectedandidentifiedbymicroscopicobservations,biochemicalidentificationand16SrDNAsequenc

7、eanalysis.Theoptimalcultureconditionswerestudiedbysinglefactorandorthogonaltests.TheirinfluenceonthegrowthofChinesepinewerestudiedinpotinoculatedcultivation.Resultsasfollowing:1.ComparedmycorrhizospherewiththenonmycorrhizosphereofChinesepine,theamountofbacter

8、ia,actinomycetes,nitrogen-fixingbacteria,fungi,silicatebacteria,inorganicandorganicphosphorus-dissolvingbacteriawereincreasedby114%,163%,100%,71.0%,38.0%and100%respectively.Theshannon-wie