苹果花发育相关基因mdsoc1和mdflc克隆与表达分析

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1、CloningandExpressionAnalysisofFloweringGenesMdSOClandMdFLCInvovedinFloralDevelopmentinMalusDomesticaThe："ubmittedtoeslssbmlttedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeof—MasterofAgronomy1一．一SunXiaoqian(DepartmentofLandscapingandHorticulture)Sup

2、ervisor：ZhangYugangQingdao．ChinaJune，2012IIIIIIIUlIIII独创性声明_丫印矽95本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致诩}的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：孙咙劫时间：切f>年多月多)日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论

3、文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：弓4、咙扬时间：≯p年易月27日导师签名：时间：珈，汐年占月矽日青岛农业大学摘要苹果花发育相关基因MdSOCl和PldFLC克隆与表达分析摘要成花是果树结实的前提，深入研究花发育的机理对于果树栽培与育种工作的发展以及促进果品生产都具有重要意义。因此，果树开花机理的研究一直备受果树研究者的重视。与一

4、年生植物不同，大多数果树的花器官在开花前是以花芽形式存在，这一特点使果树花芽成为研究自然界花发育的独特材料之一。果树童期是实生树从种子萌发到具有开花潜能之前，采取任何措施都不能人工诱致开花的发育时期。对木本植物的育种和以果实为收获对象的果树种类来说，童期是缩短育种期限和早期丰产的严重障碍。因此对于如何缩短童期，促进开花的研究具有重要的现实意义。本文结合模式植物花发育的研究热点，对柱型苹果花发育相关的重要基因进行了研究。本试验利用同源基因克隆的方法，以柱型苹果的早花株系为试材，用RT-PCR的方法克隆得到柱型苹果花发育相关基因且蒯兕c及^纪SDCJ

5、，并对其核苷酸和编码的氨基酸序列进行分析，为从分子水平上分析柱型苹果的早花机理以及今后通过基因工程手段缩短苹果童期打下基础。同时利用Real．timePCR技术检测凡印UOCl基因在柱型和富士苹果中的相对表达量，试图从分子水平上解释机理凡c及．如cJ基因的作用机理。研究结果如下：J．以柱型苹果花芽为供试材料，利用同源基因克隆方法从花芽中克隆得到苹果成花途径中的3个关键基因舰C和MdSOCla，MdSOClb，其中克隆得到的MdSOCla和MdSOClb基因为删D孓6锨基因家族的两个同源基因。2．运用生物信息学对获得的MdFLC和朋搬DC舰MdSO

6、Clb的核苷酸以及编码的氨基酸序列进行分析。分析结果表明，MdFLC开放阅读框长度为603bp，编码201个氨基酸，推测蛋白质分子量为47．68kD，等电点为5．18；脚Cla开放阅读框长度为708青岛农业大学摘要bp，编码235个氨基酸，推测蛋白质分子量为26．95kD，等电点为9．13；MdSOClb开放阅读框长度为717bp，编码238个氨基酸，推测蛋白质分子量为27．49kD，等电点为9．61。MdSOCla和MdSOClb的编码区被基序列相似性为83．49％，氨基酸的相似性为73．72％。MdSOCla虿-的二级结构有8个仅一螺旋，5个

7、B折叠区，13个p．转角；而MdSOClb蛋白有11个Q一螺旋，7"i'-13折叠区，11个p．转角；MdFLC蛋白二级结构包含9个0【一螺旋，2个p．折叠区和12个B．转角。氨基酸亲扣}生分析显示MdSOCla、MdSOClb和MdFLC蛋白的大多数氨基酸为亲抽}生氨基酸。3．并lJ用Real．timePCR技术检测A纪融c及^织sDcJ基因在富士苹果和柱型苹果株系(95．31，95—41，95—45，95．107，95．152)中花芽和花不同部位中(花瓣，花蕊，花萼，花托)的相对表达量，分析结果表明舰c和朋搬DcJ基因在富士及柱型苹果株系的花

8、芽和花不同部位(花瓣、花蕊、花萼、花托)均有表达：MdFLCff-柱型苹果花芽、花瓣、花蕊、花萼及花托中的表达量均低于在富士苹果中对应部