甘蓝型油菜隐性细胞核不育恢复基因bnms4的精细定位

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1、华中农业大学硕士学位论文甘蓝型油菜隐性细胞核不育恢复基因BnMs4的精细定位姓名：程玲申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：涂金星201206甘蓝型油菜隐性核不育恢复基因BnlIs4的精细定位与候选区段确定摘要自陈凤祥报道隐性细胞核雄性不育材料9012A以来，大家一直认为其育性是由两对隐性重叠基因(Bnms3ms3、Bnms4ms4)和一对上位抑制基因(nnrpf)共同作用的遗传模式，上位基因纯合隐性时(Bnrfrf)可以抑制Bnms3ms3ms4ms4所控制的不育，使植株表现为雄性可育。但是俎峰等利用分子标记共用和回交自交实验，以及连锁不平衡分

2、析，认为控制736512AB材料(与9012A遗传模式相同)育性的Brggs4和励脬很可能是复等位基因。董发明等也通过9012AB及其临保系T45，与来源不同的自交系和常规品种进行杂交、测交实验，并对其后代进行遗传分析，在此基础上提出了9012AB的遗传新模式。二者得出一个共同的结论，认为9012AB的育性只受2对核基因(BnMs3和B玎∽控制，其中BnMs3位点存在2个等位基因，可育基因BnMs3和隐性不育基因Bnms3，而B，z矿位点存在3个复等位基因，可育基因BnMs，不育基因Bnms和隐性上位基因砌矾究竟是紧密连锁还是复等位?这两对基因间的关系还

3、有待深入证明研究。因此BnMs4和BnRf的精细定位及克隆，对进一步理解此核不育材料的分子机理，以及分子标记辅助选择都具有十分重要的意义。本实验以736512AB为材料，采取图位克隆的方法，利用各种生物信息开发更近的分子标记，对甘蓝型油菜隐性核不育恢复基因BnMs4进行精细定位以及候选区段的确定，取得的主要结果如下：1)前人对BnMs4初定位结果为两侧最短遗传图距分别为1．0cM和2．4cM，在此基础上本实验开发设计了一批与BnMs4更近的分子标记，CLl4，CLl5，CLl6，H3．2，ssrl03YH，DD29，34BJ4，其中ssrl03YH和CL

4、l4分别将两侧最短遗传距离缩短到0．20cM和0．10cM。2)含有白菜和埃塞俄比亚芥菜亚基因组优势的749材料对736512AB进行轮回改良，利用一个改良后的分离群体(含6060个单株)，将BnMs4定位到两侧分别为1．57cM和0．10cM的遗传距离。3)利用一个近等基因系736512AB的多代兄妹交群体(含1993个单株)，将BnMs4定位到两侧分别为0．20cM和O．15cM的遗传距离。4)比较测序发现Bnms4在非编码序列的一个SSR位点发生了6个碱基的缺失突变，并且BnMs4和Bnms4在cDNA水平存在大量SNP差异。5)筛选BAC文库进行

5、shotgun测序，获得部分BnMs4附近的基因信息。华中农业大学2012届硕士学位论文6)利用两侧最近的分子标记，与白菜的stafford进行比对，将目的基因锁定到67kb的遗传范围内，并在此区段内预测了五个候选基因。关键词：甘蓝型油菜；736512AB；BnMs4；精细定位；图位克隆。II甘蓝型油菜隐性核不育恢复基因BnIls4的精细定位与候选区段确定AbstractChenFengxiangreportedthat，thefertilityof9012ABiscomposedbytwopairsofrecessivegenesoverlap(Bnm

6、s3ms3，Bnms4ms4)andaepistaticinhibitiongene(Bnrfrf)，whenepistaticgenehomozygousrecessive(Bnrfrj’CaninhibitthesterilitycontrolledbyBnms3ms3ms4ms4，thentheplantsbeingfertile．736512Aand9012Ahasthesamegeneticpatterns．ZuFengusedthesharemolecularmarkersandbackerossinbredlaboratory，andlin

7、kagedisequilibriumanalysisofperceivedcontrol736512ABfertilityBnMs4andBn矿arelikelytobemultiplealleles．DongFamingdidgeneticanalysisusing9012ABanditstemporarymaintainerlineT45tohybridandconventionalvarietiestestcrosswithsourcesofdifferentmaterial，proposedthenewgeneticmodelof9012AB．T

8、hetwoarticlesdrawacommonconclusion，thefe