转基因后代猪pgh基因差异表达的研究

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1、StudyonPorcineGrowthHormoneGeneDifferentialExpressioninTransgenicTi,ubmittedt01taeslsSUbmagngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmemoftheRequirementforthoDegreeofMasterofAgronomySupervisor：ZhangTing-rongSunJin-haiQingdao．ChinaJune，2012独创，l生声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了

2、文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：守减毡时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研

3、究生签名：韧创时间：年月日翮躲彬根帆～日青岛农业大学硕士论文摘要为探讨生长激素在转基因猪后代体内的表达量及其与生长性能的相关性，同时为节粮型高瘦肉率转基因猪品种的培育奠定科学基础，本研究针对用精子介导纳米基因裁体法制备的F0代母猪与非转基因公猪配种所产的16头F1代仔猪，经PCR扩增、克隆测序后确定转基因阳性率．分别提取耳组织和血液中总RNA，RT-PCR，进行实时荧光定量PCR．根据RT-PCR中确定的试验所需内参基因，结合30日龄、90日龄、150日龄样品和内参样品所得的扩增曲线和熔解曲线图谱，分析16个样品不同生长阶段的总荧光强度，峰值特异性及组织差异性

4、，确定猪生长激素基因在转基因猪和非转基因猪体内的表达量差异。测量统计16头后代猪的30日龄、90日龄、150日龄体重，通过独立样本T检验和个体日增重的分析，经校正后与第一阶段所得pGH基因在猪体内的不同表达水平进行关联。结论如下：1．F1代仔猪中有7头为转基因猪，9头为非转基因猪。2．同期耳组织中的pGH表达量低于血液申pGH表达量．3．F1代猪的pGH基因平均表达量在两组待测猪群中呈现明显不同。30日龄时转基因组pGH表达量低于非转基因组；90日龄时，虽然转基因组高于非转基因组pGH表达量，但差异不明显；150El龄时，转基因组pGH表达量明显高于非转基因组

5、。4．Fl代转基因猪的平均日增重在30日龄之内低于非转基因猪17．83729，90日龄时，已超过非转基因猪，90日龄到150日龄之间，持续优势生长速度．5．荧光定量PCR所得倍比关系F值与体重均值、体重均差值趋势相同，pGH基因表达量对动物体的生长发育速度有显著作用．关键词：转基因猪；猪生长激素基因；绿色荧光染料；相对荧光定量PCR青岛农业大学硕士论文AbstractInordertoinvestigatetheassociationbetweenporcinegrowthhormoneexpressionlevelintransgenicpigsandgro

6、wthperformance，settleascientificfoundationforthecultivationofforage·savingandhi曲leanmeatpercentagela'ansgenicpigvariety．16F1pigletswhichwereproducedbyF0wansgenicSOWSmadebynano-genecarriermethodinducedbyspermandnormalboarwereaimedposkiverateoftrans·geneWasensuredafterPCRamplification

7、,cloningandsequencing．AfterextractingtotalRNAandreversetranscriptionPCRfromeartissueandblood,Real·TimefluorescencequantitativePCRWasproceeded．AccordingtorequiredreferencegeneensuredfromRT-PCR,combiningwitheveryamplificationcurveandmeltingcurveearnedfrom30days，90days，150dayssamplesan

8、dreferencesamples，t