精子预处理和母牛热应激对牛单性生殖胚胎发育的影响

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1、分类号密级公开华中农业大学博士学位论文精子预处理和母牛热应激对牛单性生殖胚胎发育的影响EffectsofSpermPretreatmentandMaternalHeatStressonDevelopmentalCompetenceofBovineUniparentalEmbryos研究生指导教师指导小组肖遥杨利国教授周荣家教授张晓东教授刘澎涛研究员蒋思文教授霍立军教授专业：动物遗传育种与繁殖研究方向：动物生殖生理与生物技术获得学位名称：农学博士获得学位时间：2012年12月华中农业大学动物科学技术学院二。一二年十二月本课题由现代农业产业技术体系岗位(CARS一37—04B)和国家国际科技合作

2、专项(2011DFA32250)资助ThisstudywasfinanciallysupportedbyModernAgricultureTechnologyResearchSystem(CARS一37-04B)andInternationalS&TCooperationProgramofChina(201DFA32250)华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文否如需保密，解密时间年月曰是否保密独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其毽人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获褥

3、华中农业大学或其他教育规构的_q-位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。．研究生签名：瑚趁对问：弘组年，≯月／日学位论文使用授权书本人完金了解华中农业大学关于保存，使用q-位论文的规定，校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文刍并提供目录检索和阙览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手论文。本人同意华中农业大q-可以用不同方式在不嗣媒体上发表、部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递本人保留在其他媒体发表论文的权力。注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专

4、利等潜在文)在爝密后适用予本授权书．l学位论黼鲐证栅张物形，刚签名日期：弘馏午，拥；疆签名掰期：知／2年，嘲‰精子预处理和母牛热应激对牛单性生殖胚胎发育的影响目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯iAbstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．、，缩略语表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．X第一部分文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1l哺乳动物单性生殖胚胎研究意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一11．1单性生殖胚胎应用于基因组印记

5、研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2单性生殖胚胎干细胞的应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．3孤雄生殖胚胎应用于哺乳动物基因修饰⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42家畜单性生殖胚胎发育存在的问题⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．52．1精子注射技术缺陷与预处理的必要性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．1．1家畜精子注射技术存在的问题⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52．1．2精子预处理应当模仿正常受精过程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．2供体母畜热应激对卵母细胞质量的损害及其衡量方法的缺陷⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2．1母畜热应激改变了卵母细胞发育环境⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．102．2．2母畜热应激损害卵母细胞质量⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．112．2．3母畜热应激降低卵母细胞发育能力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．112．2．4以季节评价母畜热应激的缺陷⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1l3甜菜碱的潜在抗热应激作用与体外细胞模型优势⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯123．1目前尚无减弱母牛热应激危害的有效营养管理方案⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．123．2甜菜碱的生理功能与抗母牛热应激应用潜力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．133．3三维培养的乳腺上皮细胞模型是理想的奶牛热应激研究工具⋯⋯⋯⋯⋯．．134本研究目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14第二部分实验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15实验研究一：精子预处理对牛精子顶体及质膜的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．1．1主要仪器和设备