il-17d对人上皮性卵巢癌细胞的体外影响

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：璇盟导师签章：q了迕二级学院领导砂Df争河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢

2、等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：2K重导师签章：<亍E缸沙f中年≥月万曰目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文IL一17D对人上皮性卵巢癌细胞的体外影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．29讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．31结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．36参考文献⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36综j盎⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．47个人简历⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．48中文摘要IL一17D对人上皮性卵巢癌细胞的体外影响摘要目的：以基因转染的方法建立能稳定表达和分泌IL．17D的人上皮性卵巢癌细胞株，通过检测基因转染前后卵巢癌细胞中IL。17D的表达差异以及外源性IL．17D转染对卵巢癌细胞表面NKG2D配体ⅫCA的影响，探讨IL．17D对人卵巢癌细胞及固有免疫的体外影响。方法：l体外培养人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞SKOV3、空载体对照细胞SKOV3／vector、外源性人IL．17D基因稳定转染细胞SKOV3／】[L．17D及顺铂耐药细胞

5、SKoV3／CDDP；以及人卵巢腺癌细胞0VC—锄、空载体对照细胞0VC灿鹃／Vector、IL．17D基因稳定转染细胞0VC铷芯／IL．17D，连续传代培养，于倒置显微镜下观察细胞形态。2MTT法检测不同浓度的顺铂对SKOV3及SKOV3／CDDP的抑制率，计算半数抑制浓度IC50及耐药细胞SKOV3／CDDP的耐药指数。3MTT法检测不同时间点(12、24、48、72、96h)7种上皮性卵巢癌细胞的增殖情况，绘制生长曲线。4提取7种上皮性卵巢癌细胞的RNA，利用real．timePCR在RNA水平检测7种卵巢癌细胞IL．

6、17D的表达情况。5应用流式细胞术(FCM)检测M∞2D主要活化性配体MCA在7种上皮性卵巢癌细胞表面的表达水平，以荧光指数(FI)表示ⅫCA蛋白表达的相对含量。FI=试验品均道值／对照品均道值，均道值=lg(x．mode值)×340。结果：1人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3／CDDP耐药指数=SKOV3／CDDP的IC50值／SKOV3的IC50值，即36．09／7．83=4．61，可进行耐药试验。2人卵巢浆液性乳头状腺癌SKOV3细胞、人卵巢腺癌0VC铷R3细胞分别组内两两比较，转染组生长速度明显快于未转染组与空载体组(

7、氏O．05)，差异有统计学意义；未转染组与空载体组间无明显差异(胗O．05)；耐药组SKoV3／CDDP细胞生长速度明显快于亲本未转染组中文摘要(尸O．05)。3qRr-PCR分别检测SKOV3、SKOV3／CDDP、SKOV3／vector、SKOV3／IL．17D及OVCAR3、OVCAR3／vector、0VCAR3／IL．17D七种细胞内IL．17D的表达。以2’△△CT表示IL．17D的相对表达量。以SKO

8、V3细胞内IL．17D的表达为对照组，我们通过qImPCR可以检测出SKOV3／vector、SKOV3／IL．17D、SKOV3／CDDP细J咆内IL．17D表达量分别为1．13士O．24、113．11士24．45、91．96士18．13，经单因素方差分析示组间比较差异有统计学意义(F=