小鼠形觉剥夺性近视中巩膜后极部巨噬细胞分泌功能的研究

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1、万方数据论文题目：!』!鼠理堂剥查!哇遁褪圭丑蹉后拯部巨咝细胞坌逆功篚的塑究答辩委员会主席：趑益丝蕉：答辩委员会成员：王兰丕垫盗墓纽垫盔牢整龇立碰L万方数据目录1IIIIIIItllllllllIIHIII111Y2691571英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．4引雷⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6々l置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．12分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35学位论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43万方数据溢州医科大学坝I：学位淦文英汉缩略词对照表万方数据湛州医秘大学颈l：学位沦文小鼠形党剥夺性近视巩膜后极部巨噬细胞分

3、泌功能的研究中文摘要目的：近视是眼调节放松时，平行光线聚焦在视网膜前的一种屈光状态。近视的发生与多种因素相关。到目前为止，多数学者认为近视与巩膜后极部细胞外基质的重塑有关，但其具体机制仍不清楚，本课题组前期发现形觉剥夺性小鼠近视眼巩膜后极部巨噬细胞增多，本研究将观察近视形成过程中巩膜后极部巨噬细胞是否参与了胶原的调控，从而研究后极部巨噬细胞对小鼠屈光发育及近视的影响。方法：(1)采用出生后18日龄的野生型(wildtype，WT)雄性近交C57BL／6小鼠为实验动物。随机将实验动物分成形觉剥夺组(FDM组)和对照组(Contr01)，其中形觉剥夺组(FDM组)右眼用不透

4、光的眼罩遮盖，对侧眼不做处理。对照组小鼠不做任何处理。在实验后2周用红外偏心验光仪(E取)检测眼球屈光度，用光学断层扫描仪(OCT)检测眼球生物学参数。(2)免疫荧光双染的方法检测巩膜后极部巨噬细胞分泌的细胞因子的改变：巨噬细胞包括M1型和M2型两个亚型。其中F4／80标记总巨噬细胞(包括M1型和M2型)，CD206标记M2型巨噬细胞。分别用以下抗体MMP．2、MMP一9、TGF．pl、TGF—p2标记基质金属蛋白酶2(MMP．2)、基质金属蛋白酶9(MMP．9)、转化生长因子(TGF．131,TGF—B2，TGF—p3)。本研究采用冰冻切片免疫荧光双染的方法及细胞计数

5、的方法，比较实验眼、对侧眼以及对照组巩膜后极部巨噬细胞分泌细胞因子(与胶原调控相关)的量。结果：FDM眼与对侧眼和对照组比较，明显向近视偏移，屈光度有显著统计学差异，形成了明显的近视(约一2．5D)(p<0．01)，同时伴有眼轴的延长，玻璃体腔深度与前房厚度、晶体厚度无显著统计学差异。1．FDM眼巩膜后极部巨噬细胞数量有显著增加(p<0．01)：巩膜后极部分泌基质金属蛋白酶一2(MMP一2)的细胞数量显著高于对侧眼和对照组；分泌MMP．2的巨噬细胞数量增加，有显著统计学差异；FDM眼分泌MMP．2的巨噬细胞占巩膜后极部总巨噬细胞的百分比为56．3％，较对侧眼(20．1％

6、)和对照组(19．7％)有显著增高。2．巩膜后极部基质金属蛋白酶．9(MMP．9)的表达与对侧组和对照组相比无明显统计学差异。3．FDM眼巩膜后极部表达TGF．p1的细胞数量(67．2±26)低于对侧组(91．4±12．7)和对照组(103．1±13．4)(p<0．05)。FDM眼分泌TGF．13l的非巨噬细胞降低。4．FDM眼巩膜后极部分泌TGF．B2的细胞数量(73．3±9．4)相比对侧组(110±12．5)和对照组(119±27．8)增多(p<0．05)，丰要来源于分泌TGF—B2的非巨噬细胞增多。FDM眼分泌TGF．p2的巨噬细胞占巩膜后极部总巨噬万方数据湛州医

7、科大学硕：i：学位沦文细胞的百分比为27．6％，与对侧眼(59．1％)和对照组(50．8％)相比，，降低有显著统计学差异(p<0．05)。5．FDM眼巩膜后极部表达TGF．B3的细胞数量(114．7±23．0)明显低于对侧组(88．4±13．4)和对照组(87±12．6)(p<0．05)。后极部分泌TGF。B3的非巨噬细胞数量下降。分泌TGF．B3的巨噬细胞占巩膜后极部总巨噬细胞的百分比在剥夺眼为54．0％，与对侧眼(59．4％)和对照组(50．8％)相比，差异无显著统计学意义(p=0．129)。结论：1．形觉剥夺性近视中，巩膜后极部巨噬