吡柔比星诱导人膀胱癌t24细胞凋亡及其机制的实验研究

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1、分类号学校代码密级编号硕士学位论文吡柔比星诱导人膀胱癌T24细胞凋亡及其机制的实验研究学科专业:外科学研究方向:泌尿系肿瘤研究生姓名:张旭学号:Y1002103学位类型科学学位导师姓名:葛波教授二O一三年四月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签

2、字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，

3、并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录吡柔比星诱导人膀胱癌T24细胞凋亡及其机制的实验研究………………Ⅰ中文摘要…………………………………………………………………ⅠABSTRACT……………………………………………………………Ⅲ英汉缩略词对照表……………………………………………………………Ⅳ前言……………………………………………………………………………11材料与方法…………………………………………………………………41.1实验材料与仪器…………………………………………………

4、………41.2主要实验试剂……………………………………………………………41.3主要实验仪器……………………………………………………………51.4实验方法…………………………………………………………………61.5相关试剂的配置…………………………………………………………82实验内容…………………………………………………………………102.1倒置显微镜下观察细胞形态……………………………………………102.2细胞增殖曲线实验（CCK-8法）………………………………………102.3流式细胞仪PI单染法检测细胞周期…………………………………112.4流式细胞仪Annexin-

5、V/PI双染色法检测细胞凋亡………………………122.5通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SurvivinmRNA的表达……142.6统计学分析处理………………………………………………………173实验结果………………………………………………………………183.1倒置显微镜下观察THP作用后的细胞生长状态………………………183.2THP对膀胱癌T24细胞增殖活性的抑制作用……………193.3THP对膀胱癌T24细胞周期的影响…………………………233.4THP对膀胱癌T24细胞凋亡的影响…………………………243.5THP对膀胱癌T24细胞SurvivinmRN

6、A表达水平的影响……………264讨论…………………………………………………………………285结论…………………………………………………………………33参考文献………………………………………………………………34综述……………………………………………………………………………37攻读学位期间发表的学术论文目录…………………………………………53致谢……………………………………………………………………………54吡柔比星诱导人膀胱癌T24细胞凋亡及其机制的实验研究中文摘要目的：研究不同质量浓度吡柔比星(Pirarubicin，THP)对膀胱癌T24细胞增殖，细胞周期及凋亡的影响

7、，并检测其对SurvivinmRNA的表达变化，探讨THP对膀胱癌T24细胞凋亡的诱导作用及其机制，为THP在膀胱癌的灌注治疗中提供一定的实验理论依据。方法：1.使用不同质量浓度的THP(0、0.1、1、10μg/ml)作用膀胱癌细胞株T24，在倒置相差显微镜下观察细胞形态学的改变。2.使用不同质量浓度的THP(0、0.1、1、10μg/ml)处理膀胱癌细胞株T24，应用CCK-8法实验检测THP对人膀胱癌细胞株T24增殖的影响。3.应用流式细胞仪碘化丙啶(PI)单染法，检测不同浓度THP作用T24细胞株24小时后对其细胞周期的影响。4.