旋毛虫成虫cdna文库构建及特异性基因pcna的克隆、表达及功能鉴定

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1、中图分类号：R383.15编号：20100113承德医学院硕士研究生毕业论文旋毛虫成虫cDNA文库构建及特异性基因PCNA的克隆、表达及功能鉴定SpecificgeneofTrichinellaspiralisadultwormcDNAlibraryconstructionandPCNACloning,expressionandfunctionalidentification研究生：李丽娜导师：陈晓宁教授许士奇副教授学科专业：病原生物学所在系部：基础医学部研究起止日期：2011年10月~2012年9月论文提交日期：2013年3月承德医学院学位

2、论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归承德医学院所有。承德医学院有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为承德医学院，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归承德医学院所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名：导师签章：年月日承德医学院研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行

3、了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：导师签章：年月日旋毛虫成虫cDNA文库构建及特异性基因PCNA的克隆、表达及功能鉴定SpecificgeneofTrichinellaspiralisadultwormcDNAlibraryconstructionandPCNACloning,expressionandfunctionalidentification研究生:李丽娜学号:20100113年级:2010级导师:陈晓宁教授许士奇副教授学科专业:病原生物学所在系部:基础医学部研究方向:分子寄生虫学研究起止日期：2011年10月~20

4、12年9月论文提交日期：2013年3月目录中文摘要…………………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………………4英文缩写…………………………………………………………………………7研究论文旋毛虫成虫cDNA文库构建及特异性基因PCNA的克隆、表达及功能鉴定前言…………………………………………………………………………8材料与方法…………………………………………………………………10结果…………………………………………………………………………21附图…………………………………………………

5、………………………23讨论…………………………………………………………………………27结论…………………………………………………………………………32参考文献……………………………………………………………………30综述…………………………………………………………………………33致谢…………………………………………………………………………39个人简历…………………………………………………………………………40中文摘要旋毛虫成虫cDNA文库构建及特异性基因PCNA的克隆、表达及功能鉴定摘要旋毛虫病（trichinellosistrichinosi

6、s）的病原体是旋毛形线虫（Trichinellqspiralis）简称旋毛虫，寄生于猪、野猪、鼠、熊等150种动物和人体内，成虫和幼虫分别寄生于同一宿主的小肠内。旋毛虫病是因为生食或半生食含有旋毛虫幼虫囊包的猪肉和其他动物肉类而感染，本病是世界上较常见的人兽共患病。不仅严重危害人类健康，而且对养猪业可造成巨大损失。近年来在我国17个省、市、自治区发现有多起人体感染的暴发流行。河南省为我国旋毛虫病高发区之一，仅郑州市已发生7次暴发流行，发病400多人。若不及时诊断和治疗，患者死亡率可高达3%一30%。因而旋毛虫成为我国肉食品卫生检验中的首检寄生

7、虫，开展旋毛虫病的预防和控制工作在我国更具紧迫性和重要性，而预防和控制旋毛虫病的关键在于建立一套快速、简便、特异性高的检测手段以及采取各种有效预防措施降低动物感染率。对旋毛虫病的免疫预防的研究表明，由于旋毛虫在不同的发育期虫体抗原组分存在明显的差异并且在同一期虫体抗原结构也极其复杂，在长期寄生生活中，逐渐形成了免疫逃避机制，所以目前采用成份复杂的虫体抗原往往难以取得理想的免疫预防效果。旋毛虫抗原具有其特异性，成分极其复杂，并且不能在体外进行培养和繁殖，而且其临床表现较为复杂，因此给旋毛虫病免疫诊断及预防带来困难，故寻找旋毛虫特异性抗原基因就成

8、为我们工作的重点。而构建cDNA文库，采用免疫学方法钓取cDNA片段，从而分析抗原蛋白的抗原表位，选取最佳抗原，是研究旋毛虫抗体的有效途径之一。目的：收集纯净的5日