栀子苷对大鼠软骨细胞损伤的保护作用及相关机制的研究

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1、温州医科大学硕士学位论文分类号：R6单位代码：10343学号：151002453硕士学位论文论文题目:栀子苷对大鼠软骨细胞损伤的保护作用及相关机制的研究研究生姓名：潘天龙学科专业：外科学类型：学术型指导教师：潘骏二O一八年六月温州医科大学硕士学位论文论文题目:栀子苷对大鼠软骨细胞损伤的保护作用及相关机制的研究答辩委员会主席：朱麟勇教授华东理工大学答辩委员会成员：洪盾教授浙江省台州医院钱宇教授绍兴市人民医院论文答辩日期：2018年06月温州医科大学硕士学位论文目录1主要缩略词表……………………………………………………2页2.中文摘要…………

2、………………………………………………3页3.英文摘要…………………………………………………………5页4.前言……………………………………………………………7页5.材料与方法………………………………………………………8页6.实验结果…………………………………………………………20页7.分析与讨论………………………………………………………25页8.参考文献…………………………………………………………30页9.附录………………………………………………………………36页10.致谢……………………………………………………………37页11.综述及参考

3、文献………………………………………………38页12.学位论文独创性声明…………………………………………53页-1-温州医科大学硕士学位论文缩略词表英文缩写英文全称中文全称OAOsteoarthritis骨性关节炎GPOGeniposide栀子苷ECMExtracellularmatrix细胞外基质IL-1βInterleukin-1β白细胞介素-1βINOS诱导型一氧化氮合酶COX-2环氧化酶-2MMPsMatrixmetalloproteinases基质金属蛋白酶类Bcl-2B-celllymphoma-2B淋巴细胞瘤-2基因BaxBc

4、l2associatedXproteinBcl-2相关X蛋白CaspaseCaspaseCysteinylaspartate半胱天冬酶类specificproteinaseNF-κBNuclearfactorkB核转录相关因子NONitricOxide一氧化氮PGE2prostaglandin前列腺素E2CollagenII二型胶原PBSPhosphatebufferedsaline磷酸盐细胞缓冲容液H-EHematoxylin-eosinstaining苏木素与伊红染色法S-O番红—O染色法CCK-8CellcountingKIT-8细

5、胞计数试剂-2-温州医科大学硕士学位论文栀子苷对大鼠软骨细胞损伤的保护作用及相关机制的研究中文摘要实验目的：骨关节炎（Osteoarthritis，OA）是一种进行性的关节功能障碍和关节软骨退变的疾病，是患者以关节持续疼痛为特点的慢性关节疾病。炎症相关因子在OA的病情发生和进展中起到十分关键的作用。作为一个十分重要的炎症因子，IL-1β被广泛地用于OA体外微环境的模拟。细胞的炎症反应与凋亡反应均在OA的疾病发生和发展中起到了至关重要的作用。关节软骨组织由较少的软骨细胞和占大部分体积的细胞外基质（EMC）共同组成。其中软骨细胞的分化程度较高

6、，自身增殖、再生能力较差。而软骨细胞的最主要的功能即为合成与分泌软骨细胞外基质及其相关的蛋白酶类，同时负责维持软骨细胞外基质的新陈代谢生理平衡。对于OA的治疗，临床上通常是以控制疼痛和消除关节肿胀等症状来延缓OA的病情进展，从而达到改善患者生活质量的目的。如今，已有许多治疗OA的药物面世，并且已用投入临床使用。例如非甾体类消炎药（NSAIDs）、氨基葡萄糖类药物、透明质酸钠以及硫酸软骨素类药物等。虽然市面上有着许许多多的OA治疗药物，但其大多数只能缓解OA的临床症状，并不能阻止OA的病理进展。栀子苷（Geniposide，GPO）是一种以

7、环烯醚萜结构为特点的葡萄糖苷类物质，水溶性良好，是我国中药栀子发挥其药效的主要成分之一。栀子苷对人体的心血管系统、消化系统以及大脑的中枢神经系统疾病等均有一定的药理作用。除此之外，有研究发现GPO还具有一定的消炎、镇痛等其他的相关药理作用。GPO在OA治疗方面的应用尚未有过相关报道，本实验旨在探讨GPO对于OA是否具有治疗作用以及其作用的机制。实验方法：在本研究中，我们使用大鼠软骨细胞作为大鼠关节炎的体外模型，以此检测了GPO对于大鼠OA的治疗效果。本实验通过使用CCK-8细胞活力检测试剂盒检测了GPO对于软骨细胞的相对细胞毒性作用强度。

8、利用ELISA等方法检测并分析了NO和PGE2在大鼠软骨细胞中的相对表达量。使用Westernblot法检测CollagenII、INOS、COX-2、MMP-13等蛋白在软骨细胞中的表达水平