用rna-seq技术鉴定bt蛋白对拟环纹豹蛛安全性的影响

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1、＠轉从＃勺＾博±学位论文＃＇響用ＲＮＡ－ｓｅ技术鉴定Ｂｑｔ蛋白对拟环纹拘妊安化曲全性的穀响＞？硏巧生姓备变泰晋指导老师黄读教授王智教授赵运林教授学科专业生态学硏究方向农业生态Ｍ二。一五年五月分类号Ｑ密级八巧ＵＤＣ口斗单位代码１０５３７顯斋祭典乂＃博：ｔ学位论文用ＲＮＡ－ｓｅｑ技术鉴定化蛋白对拟环纹豹蛛安全性的影响Ｅ＊ｆｆｅｃｔｏｆ化ＰｒｏｔｅｉｎｏｎＳｅｃｕｉｉｔｏｆ加ｙ７５６Ｗ抓伯ｂＲＮ乂－ｓｅＴｅｃｈ凸ｏｙｌｏｇｙ／ｑ

2、研究生姓名李秦晋指导老师黄墳教授王智教授赵运林教授学科专业生态学硏究方向农业生态？兰提交论文円期知皆／＾．／多论文答辩日期壬豁地王贵这答辩蚕切会主席论义评阅人俾ｉｊ兩半学位授予日期＿＿妓东爲滤走二０？五年六月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外究成果，论文中不包含其他。尽我所知人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得湖南农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所

3、做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研巧生签名：＾＾时间：年＾月像日关于论文使用授权的说明本人完全了解湖南农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意湖南农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：李秦ｉ时间：文ｐＬＴ年＾月／《曰导师签名；时间：心广年／月／义百更奇／３用ＲＮＡ－ｓＢ巧技术

4、整定ｔ蛋白对拟环纹巧安全性的影响摘要近年来，转Ｂｔ基因粮食作物对害虫的控虫作用受到广泛的应用，它可Ｗ减少广谱杀虫剂对环境造成的污染。水稻作为亚洲国家主要的粮食作物，正面对严重的虫害问题和杀虫剂污染问题。因此，转Ｂｔ基因水稻逐渐被用来缓解这种局势。转Ｂｔ基因水稻给环境与农业生产带来巨大利益的同时，其潜在的危险同样受到关注。Ｂｔ蛋白在稻田生态系统复杂的食物网中的传递，Ｗ及对非祀标生物一的影响是人们担忧的主要问题之。本研究就试图利用转录组高通量测序技术鉴＂试ｗａｗ定Ｂｔ水稻对稻田蜘蛛优势种拟环纹豹蛛（化？／ｅｗ成安全性的影

5、响。内容具体如下：１ＲＮＡ－．ｓｅ技术鉴定Ｂ甩ｑｔ蛋白对掛环纹豹蛛捕食功能及捜寻行为的影响为了探究Ｂｔ蛋白对拟环纹豹蛛捕食功能的影响及其机理。用富集化蛋白的褐飞風饲养拟环纹豹蛛，比较富集过Ｂｔ蛋白的拟环纹豹蛛与正常蜘蛛捕食功能心文及搜寻行为差异，并解剖拟环纹豹蛛的神经节做转录姐分析，观察Ｂｔ蛋白作用下神经节基因的表达情况。同时，随机选择了４个ＤＥＧｓ基因进行了ＰＣ艮验ｑ证。结果表明，化蛋白对巧环纹豹蛛的捕食功能没有影响，但会显著增强拟环纹豹蛛的搜寻行为。结合转录组分析，神经细胞内氧化磯酸化反应显著增强可能一是拟环

6、纹豹蛛变得兴奋的关键因素，而其体内些次级代谢产物代谢途径的富集可能与蜘蛛体内对ＢＰＣＲ验证结果一ｔ蛋白的防御机制相关，其转录组结果与ｑ致。２－．用ＲＮＡｓｅｑ技术鉴定化涅白对巧环纹豹蛛毒腺基因表达的影响Ｂ一ｔ种杀虫晶体蛋白，能与昆虫脑道上皮细胞上的特异性蛋白结合蛋白是，导致膜上孔洞的形成，，造成昆虫的死亡。本研究利用转录组高通量测序技术对富集了Ｂｔ蛋白的拟环纹豹蛛毒腺与正常巧环纹豹蛛毒腺进行了深度测序，得到ｉ１１３３５８条ｕｎｇｅｎｅ。通过比对ＣＯＧ，Ｇ０，ＫＥＧＧ等数据库，对拟环纹豹蛛毒腺基因进行功能注释，并且探究了

7、在两样本中差异表达的基因。其中上调基因３７６５条，下调基因３１５７条，主要参与的代谢途径为氧化磯酸化途径、核糖体等相关途径化蛋白对拟环纹豹蛛毒腺基因表达有一。本研巧初步证明定影响。同时也为全方面了解蜘蛛毒腺基因组レ义及基因进化提供了帮助。义用ＲＮＡ－ｓｅｑ技术鉴定化蚕白对巧环纹豹蛛生长发育的影喃Ｉ湖南农化大学悼Ｉ；学位论义为了探究化蛋白对拟环纹豹蛛生长发育的影响及其机制，通过ＥＬＩＳＡ检测来探究化蛋白在拟环纹豹蛛成蛛和３龄，５龄幼蛛体内各组织中的富集规律；分别记录实验组和对照组幼蛛的发育历期，体长、背甲宽、体重变

8、化，取食量，存活率等参数；比较两组成蛛和幼蛛体内Ｈ大组织（肌肉组织，消化组织，神经５（