基于卟啉的新型电致化学发光生物传感器及其核酸蛋白分析应用研究

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1、分类号密级ＵＤＣＥ＾之乂务；類｜糸寺建’ＭＡＮＪＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＳＣＩＥＮＣＥ＆ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ硕去学位论文基于叩琳的新型电致化学发光生物传感器及其核酸蛋白分析应用研究（题名和副题名）季旭波作者姓名（）指＃名邓盛元期教授学位类别工学巧去学科名称生統工研究方向生斯传惠、孩致分折、蛋白质分析■沧巧較如间２０１６年３月注１：注明《国际十进分类法ＵＤＣ》的类号。硕±学位论文基于ＢＮ林的新型电致化学发光生物传感器及其核酸蜜白分析

2、应用研究作者：季旭波指导教师：邓盛元副教授南京理工大学２０１６年０３月ＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇｈｒ－ＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＮｏｖｅｌＰｏｒｉｎＢａｓｅｄｐｙＥｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＢｉｏｓｅｎｓｏｒｓａｎｄＡｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎＤＮＡ＆ＰｒｏｔｅｉｎＡｓｓａｙｐｐＢｙＸｕｂｏＪｉＳｕｅｒｖｉｓｅｄｂＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｅｓｓｏｒＳｈｅｎｕａｎＤｅｎｐｙｆｇｙｇＮａｎｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔ

3、ｅｃｈｎｏｌｏｊｇｙｇｙＭａｒｃｈ２０１６，声明本学位论文是我在导师的指导下取得的研巧成果，尽我所知，在本学位论文中，除了加Ｗ标注和致谢的部分外，不包含其他人已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的一材料。与我同工作的同事对本学位论文做出的贡献均己在论文中作了明确的说明。研巧生签名；季化瓜；ｗ俾巧《日学位论文使用授权声明南京理工大学有权保存本学位论文的电子和纸质文档，可！＾借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容，可［＾向有关部口或机构送交并授权其保存。、

4、借阅或上网公布本学位论文的部分或全部内容对于保密论文，按保密的有关规定和程序处理。研究生签名；畫加心＞乂年＾月／名日基于？硕±学位论文ｎ［啡的新型电致化学发光生物传感器及其核酸蛋白分析应用研究摘要电致化学发光（ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＥＣＬ技术具有较好的可控性、选择性、重，）现性及较高的检测灵敏度，主要应用于临床、农业、环境和生物检测等领域。核酸是遗传信息的携带者，在生命发展过程中具有重要意义。核酸适配体是能够特异性结合某些小分子或蛋白的具有特殊结构的核酸。核酸适配体在参与构建生物传感体

5、系用于检测某些特定蛋白或小分子的过程中发挥着重要的作用。扑晰（ｐｏｒｐｈｙｒｉｎ及金属）化嘟恤ｅｔａｌｌｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）因具有高度共觀的杂环结构而具备良好的光电效应、电子传输和分离能力及电致化学发光活性。本论文主要研究基于扑嘟的电致化学发光生物传感器并研究其在核酸、蛋白质检测方面的应用。一１．基于＊牌超分子纳米团簇电致化学发光的种通用的ＤＮＡ传感巧略本实验ＷＨ７Ｎ９病毒Ｈ７亚型的引物序列为检测对象，用自行设计的发卡结构ＤＮＡ持异性捕获目标ＤＮＡ，发卡结构打开后暴露的末端修饰基团为传感体系构建提供可能。根据金属

6、卧嘛可参与轴向配位的特点，利用富勒帰苯胺眯嗤复合物富集ＺｎＴＰＰ合成了一－ＺｎＴＰＰ复合物种卧琳超分子纳米团簇Ｃｅｏ，并作为电致化学发光的信号分子。我们利用环糊精分子的中空桶状结构及其常作为物质包络主体的特性，将电致化学发光体组装并固定在ｃＤＮＡ末端，构建了基于电致化学发光的通用ＤＮＡ传感策略。经电致化学发光分析检测，本实验发现，构建的电致化学发光生物传感体系能够很好地检测到目标ＤＮＡ，检测下限可达ｌ．ＯｐＭ。该体系使用通用、简易的信号标记、放大手段和ＤＮＡ检测策略，对核酸的灵敏度髙、重现性好、检测下限低、线性范围宽、稳定性

7、良好，具有广阔的应用前景。２．Ｗ洛菌巧和血红素共触发的适配体功能化量子点的特异性电致化学发光检测平台一本工作基于血红素／Ｇ四链体复合物设计并构建了种窩效快速的电致化学发光平台用于检测溶茜酶蛋白。利用吸附在壳聚糖上的纳米金来固定末端为琉基的发卡结构核酸适配体，该发卡结构ＤＮＡ由溶菌酶适配体和Ｇ四链体序列组成。在血红素和溶菌酶同时存在的情况下－，发卡结构可打开并生成血红素／Ｇ四链体和溶菌酶适配体复合物，前者可通过消耗电致化学发光内源性共反应剂〇２巧灭量子点ＥＣＬ效应。送种电致化学ｉ２０ｍｌ／￣ｍＡ发光检测策略显示出

8、了较好的线性响应区间，且检测范围可达ｐｇ５帖ｌ关键词：电致化学发光，生物传愈Ｇ四链体，核酸适配体，扑嘛，量子点ＩＡ