山羊副流感病毒3型hn基因原核表达与单克隆抗体的制备

《山羊副流感病毒3型hn基因原核表达与单克隆抗体的制备》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、：１分类号：Ｓ８５５．３０３６４单位代码密级：学号２７２０２３８：１各傲怎也；ｔｆ学位论文山羊副流感病毒３型巧７Ｖ基因原核表达与单克隆抗体的制备ＰｒｏｋａｒｙｏｔｉｃＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｔｈｅＨＮＧｅｎｅｏｆＣａｐｒｉｎｅＰａｒａｉｎｆｌｕｅｎｚａＶｉｒｕｓＴｅ３ａｎｄＰｒｅａｒａｔｉｏｎｏｆＩｔｓＭｏｎｏｃｌｏｎａｌｙｐｐＡｎｔｉｂｏｄｙ研究生：邓加武指导教师：魏律庶教授合作指导教＂巧：江杰元研究员申请学位口类级别：农学硕±专业名称

2、：预防兽医学研究方向：家畜传染病学所在学院：动物科技学院＇答辩委员会主席：抑屯Ｉ二零一五年六月AnhuiAgriculturalUniversityDissertationfortheMasterateProkaryoticExpressionoftheHNGeneofCaprineParainfluenzaVirusType3andPreparationofItsMonoclonalAntibodyCandidate:DengJiawuSupervisor:Prof.WeiJianzhongCooperantSupe

3、rvirsor:Prof.JiangJieyuanAcademicDegreeappliedfor:MasterofAgricultureSpeciality:PreventiveVeterinaryScienceResearchfield:InfectiousdiseasesofdomesticanimalsCollege:AnimalScienceandTechnologyCollegeJune,2015独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研巧工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

4、经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研巧所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＾／王研究生签名：巧如时间：／年月孩日关于论文使用授权的说明目本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，Ｐ：学校巧权保留送交论文的复印件和髓盘，允许论文被查阅和借阅，可レッ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可抖用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。乂保密的学位论文在解密后应遵守此协议）

5、＾研巧生签名：抑加时间ｇ日：如年月，＾第：导师签名时巧；／ｄ年月Ｓ曰中文摘要副流感病毒3型（parainfluenzavirustype3，PIV3）属于副粘病毒科呼吸道病毒属，是囊膜的单股负链RNA病毒，是引起人和动物呼吸道疾病的重要病原，包括：人副流感病毒3型（Humanparainfluenzavirustype3，HPIV3）和牛副流感病毒3型（Bovineparainfluenzavirustype3，BPIV3）。目前国内外对HPIV3与BPIV3的研究报道较为广泛，但PIV3在羊群中的感染情况在国内外都鲜有报道。本实验室从发病山

6、羊中分离出一株新的PIV3病毒，命名为为山羊副流感病毒3型（Caprineparainfluenzavirus3，CPIV3）JS2013。因此为监测该病在羊群中的流行情况，急需建立一种病原学及血清学检测方法，为开展流行病学调查提供依据。PIV3基因组至少编码6种结构蛋白，即NP、P、M、F、HN和L蛋白，其中HN蛋白和F蛋白是副流感病毒3型的主要保护性抗原。HN蛋白存在至少6个抗原表位，其N端具有强烈的疏水性，从而使HN蛋白能够牢固地嵌入病毒囊膜的双层质膜内，3个中和性抗原表位均存在于其中。因此本研究利用大肠杆菌原核表达系统，成功表达PIV3JS2013重组

7、蛋白His-HN，并制备出针对CPIV3HN的单克隆抗体，以期为副流感病毒3型诊断方法的建立和HN蛋白的结构和功能的研究奠定基础。主要研究内容包括：1、CPIV3JS2013HN基因片段克隆与表达参考GenBank中发表的牛副流感病毒3型（BPIV3）内蒙09毒株（NM09）全基因组序列（GenBank登录号:JQ063064），设计一对特异性引物扩增山羊副流感病毒3型（CPIV3）JS2013株HN基因部分序列，将扩增得到的基因进行测序，比对分析其与已报道HPIV3、BPIV3的序列同源性最高分别为74.3%、79.8%。进化分析表明JS2013株并不属于H

8、PIV3与BPIV3，形成一个独立的分