宁夏地区牛源大肠杆菌优势血清型和毒力基因检测及耐药性分析

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1、．’：＇．－．．、？＇■Ｖ■．？＇．■．、．Ｖ．．？．分类号：单位代码：１０７４９密级：公开学号：１２０１３１３０７６３宁夏大学专业学位论文宁夏地区牛源大肠杆菌优势血清型和毒力基因检测及耐茹性分析ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＳｕｅｉｉｏｒｉｔＳｅｒｏｔｅｓａｎｄＶｉｒｕｌｅｎｃｅＧｅｎｅｓａｎｄｐｙｙｐＡ’ｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｓＲｅｓｉｓｔａｎｃｅ乂ｎａｌｙｓｉｓｏｆ片ｅ／７ｃ々ｗＣｏ／ＺＩｓｏｌａｔｅｄ

2、ｆｒｏｍＣｏｗｉｎＮｉｎＸｉａｇ学位申请人：张余宅指导教师：王桂琴教授合作指导教师；黄觉池高级兽民师申请学位口类级别：农业推广硕±、＇．ＶＮ．专业名赖：养煎学研究方向：兽睽微牛物学与免疮举所在学院：农学院论文完成日期：２０１５年４月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包當为获得

3、宁夏大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。；时间研究生签名：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解宁夏大学有关保留、使用学位论文的规定：，即学校有权侮留送交论文的复印件和磁盎，允许论文彼查阅和借阅，可巧用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意宁夏大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名时间

4、：年月日导师签名：多＾时间：乃／王年＾月／曰＾本研究受国家自然科学基金项目＂（３１１６０５１９）宁夏地区牛源大肠杆菌毒力基因检测及抗菌药多重耐药机理＂研究资助。－－Ｉ缩略词表￣缩写词英文全称中文全称ＡＴＣＣＡｍｅｒｉｃａｎＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ美国典型培养物保藏中也ｂｐｂａｓｅｐａｉｒ喊基对ＣＸＳＩＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＬａｂｏｒａｔｏｉｙＳｔａｎｄａｒｄｓ美国临床实验室标准化委贾会ＤＮＡｄｅｏｘｒｉ

5、ｂｏｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ脱氧核捷核釀ｙＥＤＴＡｅｔｈｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａｃｅｔｉｃａｃｉｄ己二胺四己酸ｙｇｒａｍ克ｇｈｈｏｕｒ小时Ｋ—ｂｐｋｉｌｏｂａｓｅｐａｉｒ千碱基对ｍｍｉＵｉｇｒａｍ寒克ｇＭＩＣｍｉｎｉｍａｌｉｎｈｉｂｉｔｏｉｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ最低抑苗浓度（最小抑菌浓度）ｍｉｎｍｉｎｕｔｅ分钟ｍＬｍｌｉｔｅｒｉｌＵ畜升ｍｏｌ／Ｌｍｏｌｅｒｌｉｔｅｒ摩尔每升ｐＰＣＲｐｏｌｙｍｅｒａｓ

6、ｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ聚合酶链反应ｒｐｍｒｏｕｎｄｓｐｅｒｍｉｎｕｔｅ转每分ｓｓｅｃｏｎｄ秒－－－－孤ＴＡＴＡＥＴｒｉｓａｃｅｔａｔｅＥＤＴＡｂｕｆｅｒＴｒｉｓ己酸缓沖液－－－ｓｃ－ＴＢＥＴｒｉｂｏｒａｃｉａｃｉｄＥＤＴＡｂｕｆｅｒＴＴｒｉｓ棚酸孤ＴＡ缓冲液－－ＴＥＴｒｉｓＥＤＴＡｂｕｆｅｒＴｒｉｓＥＤＴＡ缓冲液＼ｉｇ／ｍＬ姐ｉｃｒｏｇｒａｍｐｅｒｍｉＵＵｉｔｅｒ微克每寒升Ａａｄｅｎｉｎｅ腺嘿吟Ｔｔｉｂｙｍｉ

7、ｎｅ胸腺略唆Ｇｇａｕｎｉｎｅ鸟曝吟Ｃｃｙｔｏｓｉｎｅ胞唾晓－－ＩＩ摘要’’Ｅ一大肠杆菌ＣＥｓｃＡｍｃＷａｃｏ／：，ｃｏ巧，兽医临床上最常见的病原菌之，可引起人和家畜禽的－，溶血性泉毒综合征多种疾病如引起幼畜严重腹泻巧败血症、猪水肿病、人的出血性结肠炎、新生儿脑膜炎及肾炎等多种疾病，抗菌药物的社度使用，。随着养殖业的逐渐规模化导致大肠杆菌的耐药性及其多重耐药性已严重影响了兽医临床疾病的治疗，因此对本地区奶牛乳房炎大肠杆菌进行奉力基因检测和耐药性分析及耐药性分子流

8、行病学的调查，不但对大肠杆菌引起的疾病防治具有指导意义，而且有利于控制耐药茵株的产生和传播。本研究采用微生物学和分子生物学方法对宁夏地区部分奶牛场临床型及隐性乳房炎奶样，进ＣＬＳＫ－行大肠杆菌分离鉴定Ｉ应用２０１巧推荐的纸片扩散法（ＫＢ）对其进行抗茜药物敏感性试验，采用０抗原平板凝集试验鉴定大肠杆菌优势血清型，运用ＰＣＲ扩增方法对大肠杆菌奉力基因及耐药基因进行检测。？１．２０１１２０１３年采集宁夏地区部