细菌和放线菌杀线虫活性筛选及其活性成分的研究

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1、分类号密级公开编号碛士所究嗲像伦夂题目细菌和放线菌杀线虫活性筛选及其活性成分的研宄学院所、中心）云南省生物资源保护与利用重点实验室一省部共建国家熏点实验塞培育碁地专业名称微生物学研究生姓名苏会宁学号导师姓名李国红职称副研究员二—五年五月云南大学硕士学位论文资助项目项目：农作物重要病原线虫生物防控的基础研究，第五课题“新型天然杀线虫活性化合物的发掘及作用机制”（云南大学硕士学位论文论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研宄成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人

2、己经发表或撰写过的研宄成果，不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可以将论文用于査阅或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研宄生签名：本、令？导师签名：红

3、日期：务云南大学硕士学位论文摘要本文通过杀线虫活性和薄层层析次生代谢产物丰富度检测对株细菌和株放线菌进行了筛选，活性达到及以上的有株。对部分活性菌株进行了初步的种属鉴定。选取菌株和进行进一步研究，对其进行放大发酵和其次生代谢产物的分离鉴定，对所分离得到的化合物进行了杀线虫活性和抗菌活性检测。具体结果如下：基于基因序列的鉴定结果，对部分活性菌株进行了分子生物学鉴定，其主要分布于个属，分别为：，和。其中菌株和分别鉴定为和。从菌株中分离到个化合物：、、、和，均首次从该菌中分离得到。杀线虫活性结果表明：

4、化合物、、、有微弱的杀线虫活性，化合物对秀丽隐杆线虫（和根结线虫（的毒杀活性较强，在浓度为时，后，秀丽隐杆线虫（全部死亡，经过，南方根结线虫全部死亡。当化合物浓度为时，秀丽隐杆线虫的致死率为，南方根结线虫的致死率为。当化合物浓度为时，，南方根结线虫的死亡率为。抑菌活性结果表明这些化合物均无明显抑菌活性。从菌株中分离到个化合物：、和，其中化合物、为新化合物，化合物和正在鉴定当中。杀线虫活性显示：化合物、和均没有明显杀线虫活性。抑菌活性显示：化合物对枯草芽孢杆菌有较强抑制活性。化合物对枯草芽孢杆菌的

5、抑制活性最强，对铜绿假单胞菌抑制活性最弱。化合物对种供试病原菌有不同抑制活性，其中，对大肠杆菌的抑制活性最强，对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制活性较弱。云南大学硕士学位论文本论文的创新点：首次对细菌的次生代谢产物构成进行研宄，并首次发现化合物具有较强杀线虫活性。从放线菌中分离到两个新化合物，并且对供试菌株有不同程度的抑制作用。关键词：细菌；放线菌；次生代谢产物；杀线虫活性；抑菌活性云南大学硕士学位论文，，，，，，，，，，，，‘，，，，，云南大学硕士学位论文，，云南大学硕士学位论文目录胃目第一

6、章前言线虫的危害及防治二杀线虫细菌的研究进展三放线菌杀线虫活性代谢产物研究进展四两种微生物次生代谢产物研究进展次生代谢产物研究进展次生代谢产物研究进展五研究意义第二章杀线虫活性筛选及菌株鉴定实验材料和仪器实验菌株和供试线虫实验所用培养基实验所用主要仪器生化试剂二实验方法供试线虫的培养和获得实验菌株的活化菌株发酵发酵液预处理细菌发酵产物预处理放线菌发酵产物预处理细菌筛选方法放线菌筛选方法放线菌初筛方法放线菌复筛方法云南大学硕士学位论文活性菌株的鉴定方法细菌基因组提取方法放线菌基因组提取方法扩增反应

7、体系和条件菌株的保存魏结细菌师选结果放线菌筛选放线菌初师结果放线菌复筛结果发酵提取物的重量菌株发酵提取物的分析分子生物学鉴定结果杀线虫细菌的鉴定结果杀线虫放线菌的鉴定结果四小结和讨论第三章的化学成分研究—实验材料和仪器实验仪器实验试剂供试线虫供试病原微生物所用培养基二实验方法菌株粗提物样品累积方法种子培养扩大培养粗提物的收集化合物杀线虫活性测定云南大学硕士学位论文化合物抑菌活性检测方法三实验结果化合物的分离菌株发酵液乙酸乙醋萃取部分的分离化合物的分离化合物的分离化合物和的分离菌株发酵液正丁醇萃取

8、部分的分离化合物的分离化合物的结构鉴定化合物旳结构解析化合物的结构解析化合物的结构解析化合物的结构解析化合物的结构解析化合物生物活性测定化合物杀线虫活性测定化合物抑菌活性测定四小结与讨论第四章链霉菌的次生代谢产物研究实验材料和仪器实验仪器实验试剂供试线虫供试病原微生物发酵用培养基二实验方法菌株粗提物样品累积方法化合物杀线虫活性测定云南大学硕士学位论文三实验结果化合物的分离化合物的分离化合物的分离化合物的分离化合物的分离化合物的结构鉴定新化合物的结构鉴定新化合物的结构鉴定化合物的结构鉴定化合物生物