长穗偃麦草和大米草全长cdna文库的构建与耐逆基因筛选

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1、分类号Ｓ：３３０学＾２０１２１０１１１０．■‘？％‘＇．．爲音策禱义聲学术型硕±学位论文长穗偃麦草和大米草全长ｃＤＮＡ文库的构建与耐逆基因錄选’．７．片’＾＇、王侄隹？４．．．打，＂＇．朽、．人；．，－－，■户＇、－＇＇、、－：二‘ｒ：■？．，指导教师刘康教授学科口类农学专业名称作物遗传育种硏巧方向玉米遗传育种＇答辩日期二〇－－五年六月；－ＬｅｎｔｈｃＤＮＡＣｏｎｓｔｒｕｅ村ｏｎｏｆＴｗｏＦｕｌｌｇＬ比ｒａｒｉｅｓｏｆＬｏｈｏｐｙｒｕ

2、ｍｅｌｏｎａｔｕｍａｎｄＳａｒｔｉｎａａｎｌｉｃａＨｕｂｂａｎｄｐｇｐｇ－ＳｃｒｅｅｎｉｎｏｆＳｔｒｅｓｓｔｏｌｅｒａｎｃｅＧｅｎｅｓｇＢｙＷａｎＪｉａｉａｇｊＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｅｄ化ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙ’ＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ民ｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒＭａｓｔｅｒｓＤｅｇｒｅｅＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆｅｓｓｏｒＬｉｕＫａｎｇＣｏｌｌｅｅｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅｇｇ，ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖ

3、ｅｒｓｉｔｊｇｇｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００９５，Ｐ．民．Ｃｈｉ打ａ原创性声明本人郑重声明，：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担（－学位论文作者需亲笔）签名：至ＴＵ５＾２０１５年６月１０日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印

4、件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可采用汇’编学位论文影印、缩印或扫描等复制手段保存和。。１保密□，在年解密后适用本授权书本学位论文属于不保密曲＂＂（请在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名：２０１５年６月１０日￣￣■导师：２０１５年６月１０日（需亲笔）签名目录目录摘要ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ缩略職ＶＩＩ一第部分文献综述１一１第章玉米耐盐性研究进展１±地盐溃化现状１２盐胁迫对植物的影响２３盐胁迫对玉米的影响２

5、４玉米耐盐机制３４．１渗透调节３４．２离子平衡３４．３质外体酸化３４．４抗氧化防御系统３４．５激素调节４４ｉ．６分子机串４ｊ５提高玉米耐盐性的途径４５．１传统选择育种４５．２分子标记辅助育种６．５３转基因育种６６ｃＤＮＡ文库转化玉米的意义７第二章植物耐逆相关基因的挖掘与鉴定９１植物耐逆相关基因的挖掘９１．１基于表达序列标签（ＥＳＴ）数据库的基因挖掘９１．２通过转录谱确定胁迫响应的基因９２植物耐逆相关基因的鉴定１０２１．１正向遗传学方法１２１．２反向遗传学方法１２．

6、２．１ＲＮＡｉ１１．１２２２．２插入突变．２．ＴＩＬＬＩＮＧ２２３１３１本研巧的目的和意义３１长穗偃麦草和大米草全长ｃＤＮＡ文库的构建与耐逆基因筛选第二部分研究报告１５第Ｈ章耐逆ｃＤＮＡ文库的构建１５１材料与方法１５１１５．试验材料１１丄１植物材料１５１丄２菌株１６、质粒、试剂及引物１．２试验方法１７．１ＲＮＡ１１．２长穗偃麦草和大米草的总的提取及纯化７１．２．２ｃＤＮＡ的合成１８１．ＤＮＡ的１．２３ｃ分级回收９双链、纯化及扩增１．２．４入口文库的构建２０１．２．５目标文

7、库的构建２３１．２．６文库插入片段的测序２５２结果与分析２５２．１长穗偃麦草抗盐性初步观察２５２．２总ＲＮＡ的提取％２．３ｃＤＮＡ的合成２７２．４ｃＤＮＡ的分段回收及扩増２９２．５ｃＤＮＡ入口文库的滴度测定３０２．６ｃＤＮＡ入口文库的质量检测３０２．７ｃＤＮＡ目标文库的滴度测定３１２．８ｃＤＮＡ目标文库的质量检测３１２．９ｃＤＮＡ文库插入片段的序列比对３２？３巧论３５第四章耐逆ｃＤＮＡ文