高考生物生物技术实践课时分层集训35无菌操作技术苏教版

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1、课时分层集训训(三十五)(建议用时：45分钟)A组　基础达标1．(2018·广东惠州模拟)日前微博传言手机细菌比马桶多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：(1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、______________。(2)据图，两电视台均采用____________法接种，该方法需要________(多选)。A．接种环B．酒精灯　　C．移液管　　D．涂布器　E．无菌水(3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：________

2、__________________。(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。该实验对照组该如何设置______________________。[解析]　(1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。(2)根据图形分析，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的

3、手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/平方厘米)。[答案]　(1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板　BCDE(3)形态、大小　手机的取样和马桶的取样都不相同(4)2×104　取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养2.如图是某细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。回答下列问题。(1)在________(填图中编号)区域出现了单个菌落，产生每个

4、菌落的最初细菌数目是________个细菌。据图分析，在培养基上划线接种时，划线的顺序依次是________(用编号表示)。(2)下表是某微生物培养基成分。编号成分含量编号成分含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O100mL———①若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌，该培养基应添加________，去除________。②若要鉴别纤维素分解菌，可用________法，若要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入________。[解析]　(1)从图中可知，②号区域出现了单个菌落；1个菌

5、落最初是由1个细菌形成；根据线条数量可判断，划线的顺序依次是①→③→②。(2)自生固氮菌是异养生物，能自身固氮而获得氮源，但自身无法获得碳源，因而培养基中应添加碳源去掉氮源。鉴别纤维素分解菌可用刚果红染色法，要鉴别尿素分解菌，可在培养液中加入酚红指示剂。[答案]　(1)②　1　①→③→②　(2)①碳源　氮源　②刚果红染色　酚红指示剂3．(2016·四川高考)图甲是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程，图乙是脲酶基因转录的mRNA部分序列。(1)图中选择培养基应以________为唯一氮源；鉴别培养基还需添加________作指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围

6、的指示剂将变成________色。(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是________，每克土壤样品中的细菌数量为________×108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较________。(3)现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图乙箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图乙序列中出现终止密码(终止密码有UAG、UGA和UAA)。突变基因转录的mRNA中，终止密码为________，突

7、变基因表达的蛋白含________个氨基酸。[解析]　(1)脲酶能够催化尿素水解释放出氨和二氧化碳，因此选择培养基中应以尿素为唯一氮源。挑取单菌落接种到加有酚红指示剂的鉴别培养基中，培养一段时间后，菌落周围的氨增加，pH升高，酚红指示剂将变红。(2)该过程采取的接种方法为稀释涂布平板法。利用稀释涂布平板计数法对细菌进行计数时，应选择菌落数在30～300的平板，因此平板上长出的细菌菌落平均数为(156＋178＋191)÷3＝175个。每克土壤样品中的细菌数为175÷0.1×105＝1.75×108。血细胞计数板计数法能将死细胞计