小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中高尔基体的作用探索

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1、第四军医大学硕士学位论文小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中高尔基体的作用探索姓名：牛蕾申请学位级别：硕士专业：实验动物学指导教师：朱德生20050501独创性声聪Y727187秉承学较严谨的学风与优良的科学道穗，本人声明所呈交的论文是莪个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽找所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方，}，论文中不包含其他h已经发表或撰写过的硼究成果，不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用辽的成果。与莪一同工作的同志对本研究所馓的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资科若肓不宴之处，本八承担一t)l相关责任。论文作者签名：一——日期：一．一～

2、保护知识产权声明本h完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在较鼍位期闻论文T作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学_可以公1ij论文的全部或部分内容(含电子版，保密内容踪，})，可以采用影flf，缩印或其他复制手段保存论文。学校肓权允许论文被查阅和借阋，并在较固网上提供论文内容的浏览和下载服务。论文I}吉签各：一葺．_立鱼二一一导师签名：秘日期：j!g生盟第四军医大学硕士学位论文缩略语BFAdbcAⅣmCZBMM[PFNEBDPMSGHCGFBSBSA6一DM队PPCCⅣMIVFICSICCBCHXPblGV

3、GVBDCEoNoFCMCLSMFITCTRH℃缩略语表英文全称BrefeldinADibutryrylcyclicAMPCZBmodifiedMaturationpromotionfactorNuclearenvelopbreakdownPregnantmille∞runlgonadotrophinHumanchorionicgonadotzopinFetalbovineserumBovinesel'lH'nalbumin6-dimethylaminopurinPrematurechromosom．econdenMtionIIlvitro-maturedInvitro-rertiiize

4、dIntracytoplasmiesperm蝎ecfionCytochalasinBCycloheximideFirstPolafbodyGerfninalvesicleGerminalvesielebreakdownCumuluscell—enclosedooeyteNudeoocyteFlowcytometryConfocallaserscanningmicroscopyFlouoresceinisothiocyanateRbodamine中文全称布雷菲德菌素A二丁基环磷酸腺苷改良的CZB培养基促成熟因子核膜破裂孕马血清促性腺激素入绒毛膜促性腺激素胎牛血清牛血清白蛋白6．二甲氨基嘌呤早

5、熟染色体浓缩体外成熟体外受精胞浆内单精子显微注射缌胞松弛素B放线菌酮第一极体生发泡生发泡破裂卵丘．卵母细胞复合体裸卵流式细胞分析激光扫描共聚焦显微镜异硫氰酸荧光素罗丹明第四军医大学硕士学位论文小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中高尔基体的作用探索硕士研究生：牛蕾导师：朱德生副教授第四军医大学实验动物中心，西安710032中文摘要高尔基体是细胞内一种重要的细胞器，近年来它在细胞生长发育中的作用日益受到关注。本研究欲通过破坏小鼠卵母细胞和小鼠核移植胚胎中的商尔基体，探索高尔基体在二者体外发育进程中的作用。本实验按常规方法对小鼠进行激素处理，收集未成熟卵母细胞，并以小鼠成纤维细胞为供核体，小鼠去核卵母

6、细胞为受体建立核移植重组胚，在媵运输挪截荆BFA(布雷菲德菌素A)的配合使用下，利用高尔基体特异性标记抗体(p—COP)做免疫荧光染色，通过激光扫描共聚焦显微镜拍摄并记录高尔基体的动态变化，同时也研究了小鼠卵母细胞体外培养和小鼠核移植胚胎体外发育的相关影响因素，主要内容及结果如下：(--)小鼠卵母细胞体外成熟培养用PMSG对小鼠进行腹腔注射，48h后取未成熟卵母细胞，按实验目的，对其进行体外培养的檑关实验和免疫组化实验。结果如下；1．在DMEM培养液中添加FSH或胰岛素比添加牛血清白蛋白更有利于提高裸卵的体外成熟、体外受精和卵裂效率(P

7、的抑制作用最明显。3．联合使用10％的乙醇和2mmol／mL的6-DMAP对小鼠裸卵孤雌激第四军医大学硕士学位论文活的效果最好(P