干酪乳杆菌LC2W胞外多糖制备、功能及结构的研究

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时间:2019-05-12

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1、江南大学博士学位论文干酪乳杆菌LC2W胞外多糖制备、功能及结构的研究姓名:艾连中申请学位级别:博士专业:食品科学指导教师:张灏;郭本恒20070601江南人学博J:学位论文体外淋巴细胞培养实验显示,LCPl、LCP2和LCP3均无细胞毒性,体外免疫活性实验可知,胞外多糖LCPI、LCP2和LCP3能显著抑制T/B淋巴细胞的增殖反应和混合淋巴的增殖反应,显示较强的免疫抑制活性。利用毛细管电泳进一步鉴定LCPl的纯度,通过旋光仪测定LCPl水溶液中的比旋光度【卅;;,=+62.0。(H20:浓度1.12),采用乌氏粘度计测得LCPI水溶液

2、固有粘度【砌为1.930dL/g。示差折光检测仪测得LCPl在0.1mol/L的NaN03溶液中比折光指数增量(dn/dc)为1.20。通过高效凝胶色谱测定LCPl重均分子量Mw为1.236×106Da、固有粘度[砌为1.875dL/g、多分散性指数Pd为1.202和Mark.Houwink指数为O.654,Mark.Houwink指数表明LCPl在0.1moI/L的NaN03溶液中呈无规卷曲构象。通过动态激光光散射研究表明LCPl分子在水溶液中聚集比较严重,达至1J45%,而在NaN03溶液中几乎不发生聚集,故确定0.1mol/LN

3、aN03溶液为研究LCPl溶液分子信息的理想溶剂。采用静态激光光散射测得LCPI在0.1mol/L的NaN03溶液中的重均分子量Mw为1.276×106Da、回旋半径Rg为52.9am、第二维里系数A2为2.44x10‘4cm3mol/92=动态激光光散射测定LCPI水力半径鼬为34.8nnl,p值(&,‰)为1.61表明LCPl分子在溶液中呈无规卷曲的构象。通过对LCPl溶液流变性质研究发现,高浓度LCPl溶液呈剪切变稀,低浓度时,剪切速率对粘度没有影响,溶液粘度随温度升高下降明显,pH对LCPl溶液粘度影响很小,盐可以降低LCPl

4、溶液粘度,粘度降低与盐浓度有关,通过粘弹性研究发现LCPI溶液不能形成胶体。离子色谱测定LCPl由鼠李糖、葡萄糖和半乳糖组成,摩尔比约为3:5:2。通过高碘酸氧化、Smjtl】降解、甲基化分析和部分酸水解的化学方法与GC—MS、GC,HPAEC—PAD、1D和2DNMR技术相结合,分析推测出LCPl的结构如下:∞D_G1学(1p-D-G1w(1上J,6∞L最t1日暖1_'2)·∞DGa坂1_2·o巾Ga驷(1上6[---'.'4)-13·nG≯1—舛)母D£1似1—舛)’pDG宁oAc(193)。。L尉颐1号k个tOAC∞L最《I关键

5、词:干酪乳杆菌LC2W,胞外多糖;分离纯化;降高血压;免疫;物化性质;结构ⅡAbstractStudyonpreparation,functionandstructureofexopolysaccharidesfromLactobacilluscaseiLC2W111eexopolysaccharides(EPS)producedbythefood—gradelacticacidbacteria(LAB)havebeenextensivelystudiedduringthelastdecades.TheseLABEPSareconsi

6、deredtonotonlyplayallimportantroleintherheology,mouthfeelandtextureoffermentationproducts,butalsoprovidebeneficialphysiologicaleffectsonhumanhealth,suchasantimutagenic,antitumour,immunomodulatingandcholesterol-loweringactivity.Theobjectivesofthecurrentworkaretostudythef

7、ermentingconditionsofEPSproducedbyLactobacilluscaseiLC2W,toisolateandpufffyEPS,andtostudythebioaetivity,ph37sicochemicalpropertiesandstructurecharacterizationofEPS.TheeffectsofdifferentculturemediaonEPSproducedbyLactobacilluscaseiLC2Wwerestudied。Skimmilkinwhichtheyieldo

8、fEPSwas83mg/mLwaschosenasabasicmediumofLactobacilluscaseiLC2W,Additionofsoybeanpeptoneasnitrogen,glucoseascarb

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