对硫磷降解菌的分离筛选及提高其降解作用研究

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1、东北大学硕士学位论文摘要对硫磷降解菌的分离筛选及提高其降解作用研究摘要对硫磷是农业生产中普遍使用的广谱杀虫剂，化学名称为O，0---7,基一O-(对硝基苯基)硫代磷酸酯，属于高毒、内渗性有机磷农药，在自然界的残留时间为3周，使用不当或长期连续使用对人体和环境会造成较大的危害。因此，研究对硫磷的微生物降解作用具有较大的实际意义。本研究从受对硫磷污染土壤中筛选分离到l株能以对硫磷为唯一C源的菌株D5．2，通过形态特征及基本生理生化实验研究，初步确定该菌株属于不动杆菌属微生物(Acinetobactersp．上采用分光光度比浊法研究其最佳生长条件，结果表明：D5．2

2、最佳生长温度为28"(2，最佳初始pH值5．8，最佳C、N源分别为柠檬酸钠、酵母粉，在150mL的培养瓶中培养基体积为50mL时生长最好，NaCl最大可耐受浓度为6％。D5．2在浓度为800mg／L对硫磷的培养液中生长良好，但对该农药的降解率仅为25％。为了提高降解作用，对菌株进行诱变复壮实验，结果显示：紫外诱变后降解率为lI■，一49．1％，盐酸羟胺化学诱变后降解率为69．6％，土壤浸出液复壮后降解率为53．9％。确定在各种诱变方法中的最佳条件为：紫外灯垂直距离30cm辐照lOs；0．8％盐酸羟胺溶液振荡反应30rain；60％土壤浸出液振荡培养48h。在最

3、佳条件下进行复合诱变，对硫磷的降解率得到大幅提高，可以达到82．8％。进一步研究该菌株对模拟对硫磷农药污染土壤的降解效果，结果表明：在对硫磷浓度为lOOmg／kg的土壤中，该菌株对对硫磷农药7d的降解率达到了66．7％，显示出其较好的应用前景。另外，本研究摸索出一种紫外分光光度法检测有机磷农药降解作用的方法，与文献报道的紫外检测方法相比，检测结果更为简便、精确，与气相色谱法检测结果拟合较好，具有一定的实际应用价值。关键词：对硫磷；生物降解；诱变；复壮；土壤修复IA、～●东北大学硕士学位论文AbstractStudyonisolation，screeningof

4、parathion—degradingbacterialstrainandimprovingthedegradationeffectsAbstractParathionwagusedtocontrolofplantdiseasesandinsectpestsinagriculturewidely．ButitalsodestroyedtheenvironmentseriouslyandWasofgreatresidualtoxicitytohumanheath．Biodegradation,especialthedegradationbymicroorganis

5、m，couldeliminatethiskinddamage．AstrainD5—2ofparathion-degradingWasobtainedbyselectiveenrichmentculturefrompesticides—contaminatedsoil．ParathioncouldbeusedbyD5-2asthesolesourceofcarbon．ThecharacteranalySisofmorphologicalandphysiochemicalshowedthatstrainD5-2belongedtoAcinetobactersp．T

6、heoptimumgrowthconditionweredeterminedforD5—2、析tlltemperature28"C，pH5-8，andtheoptimumcarbonandnitrogensourcewassodiumcitrateandyeastrespectively．Oxygencouldmakethestraingrowbetter．ItWasstronglyinhibitedbylli曲concentrationNaCIinthemedium．D5-2couldgrowinparathionsaltmedium(800mg／L，par

7、athion)，however,thedegradationbythestrainwaslow(thedegradationratewasonly25％)．Inordertoimproveit’Sdegradation,themutationandrefreshingwereused．Afterreacting谢mUV，0．8％nitrousacidand60％soilextractliquid，thedegradationratereached49．1％，69．6％，and53．9％respectively．Finally，thedegradationrat

8、ereached82．8％aftert