抗人卵巢癌scFv基因的构建、克隆、筛选和表达

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1、秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是莪个人在导师指导下进行的研究I作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果不包含本八或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究‘所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若肓不实之处，本八承担一切相关责任。论文作者签名：表渔日期知，7，．0如本八完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第四军医

2、大学。本人保证毕业离较后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查闻和借闻；学校可以公布论文的全部或部分内容(保密内容除，})，可以采用影印、缩印或其他夏制手段保存论文。论文作者婚一扭导师婚聋幽帆逝世塑篁四呈垦奎塑主堂堡!鱼塞!．!墨英文缩写词表英文缩写AbABTSAmpApBpBSABsAbBFAbpCregionC—terminalCDRscplIIcpⅧDABDTTDMS0DNaseIEBECLE．coliEDl’A英文全称antibody2，2’一azin

3、o-di一(3一ethylbenzthiazoline)AmpicillinAmmoniurnpersulfateBasepairBovineserlJlllalbuminBispecificantibodyBifunctionalantibodyBasepairConstantregionC．terminalComplementarydeterminingregionsCoatproteinIIICoatproteinⅧ3,3"-diaminobenzidineDithiothreitolDimethylsulfoxi

4、ddeoxyribonucleaseethidumbromideEnhancedchemiluminescenceEscherichiacoliEthylenediaminetetraceticacid中文名称抗体2，2’．连氮．双·(3一乙基苯并噻)氨苄青霉素过硫酸铵碱基对牛血清白蛋白双特异抗体双功能抗体碱基对(抗体)恒定区(多肽链)羧基末端互补决定区外壳蛋白III外壳蛋白Ⅷ3，3’．二氧基联苯胺二硫苏糖醇二甲基亚砜DNA酶I溴化乙锭增强化学发光大肠杆菌乙二胺四乙酸DepartmentofObstericsandGyn

5、ecology,XIJlng,Hosptta‘FMMU第四军医大学博±学位论文第3页DepartmentofObMedaandGynecology,,JInR,Hospital,FMMU第四军医大学博士学位论文第4页PEGRNaseTEAscFvSDSTEMEDTrisVregionsVHVLVKV凡PolyethyleneglycolRibonucleaseTetraethylammoniumSinglechainFvfragmentSodiumdodecylsulfateN，N，N’，N'-tetramethylet

6、hylenediamineTris(hydroxymethyl)aminomethaneVariableregionsHeavychainvariableregionLightchainvariableregionKlight-chainvariableregion^light-chainvariableregion聚乙二醇核糖核酸酶四乙铵单链抗体十二烷基硫酸钠N，N，N’，N’一四甲基乙二胺三羟甲基氨基甲烷(抗体)可变区(抗体)重链可变区(抗体)轻链可变区K轻链可变区九轻链可变区oq心^蚋e眦o，obs把一aandGy

7、necolo翌y,XIJlng,Hospital,FMMU．一蔓婴呈垦丕堂堕圭堂堡堡塞笙!里—————————————————————————————————————一一一抗人卵巢癌单链抗体基因的构建、克隆、筛选和表达博士研究生导师辅导教师杜辉郑维国教授王健副教授辛晓燕教授第四军医大学西京医院妇产科，西安710032摘要(卵巢癌是妇科恶性肿瘤中最主要死亡原因之一。尽管近十年来，随着肿瘤细胞减灭术和化疗水平的提高，卵巢癌的生存率有所提高，但由于大多数病人发现时已是晚期，所以生存率一直很差，其5年生存率在30％左右，因此探索

8、新的治疗方法非常必要。自从杂交瘤技术问世以来，单克隆抗体在人类肿瘤诊断和治疗上的应用成为人们关注的焦点。然而，单克隆抗体在肿瘤诊断治疗上所取得的成就并不大，因为抗体的应用有很高的要求。例如，治疗性的或用于体内诊断的抗体片段要求肿瘤穿透力强，在血液中清除更快、免疫原性低。此外，抗体应用所需的高标准，以及应用量的目益增加