革兰阳性菌分类生物学特性及鉴定

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1、革兰阳性菌分类生物学特性及鉴定内容革兰阳性球菌革兰阳性杆菌API鉴定系统细菌分类工具书《伯杰氏细菌系统分类学手册》(Bergry’sManualofSystematicBacteriology)—细菌分类的标准Springer-Verlag公司2001年春出版《手册》,第二版五卷本是最新版本革兰阳性球菌新分类BXIII门1目2目第5科第III纲葡萄球菌科乳杆菌科第2科气球菌科其他目第1科第4科肠球菌科第5科明串珠菌科第6科链球菌科葡萄球菌科葡萄球菌属(Staphylococcus)孪生球菌属(Gemella)

2、其他属乳杆菌科片球菌属(平面球菌)(Pediococcus)其他属气球菌科气球菌属(Aerococcus)乏养菌属(Abiotrophia)狡诈球菌属(Dolosicoccus)其他属费克蓝姆氏菌属(Facklamia)球链菌属(Globicatella)肠球菌科肠球菌属(Enterococcus)漫游球菌属(Vagococcus)其他属四联球菌属(Tetragenococcus)明串珠菌科明串珠菌属(无色藻菌属)(Leuconostoc)其他属链球菌科链球菌属(Streptococcus)乳球菌属(Lact

3、ococcus)BXIV门I纲II亚目第I科微球菌属(Micrococcus)口腔球菌属(Stomatococcus)其他属微球菌科革兰阳性球菌生物学特性G+球菌触酶+-微球菌属链球菌属葡萄球菌属口腔球菌属肠球菌属孪生球菌属片球菌属明串珠菌属气球菌属其他属葡萄球菌属微球菌属口腔球菌属常见触酶阳性菌属触酶阳性常见菌属鉴别菌属GLUO/F氧化酶杆菌肽0.04U/片呋喃唑酮100ug/片葡萄球菌属发酵-RS微球菌属氧化+SR口腔球菌属-SS葡萄球菌微球菌呋喃唑酮杆菌肽呋喃唑酮葡萄球菌属分类35个种、17个亚种分为凝

4、固酶阳性和阴性的葡萄球菌主要鉴定试验触酶血浆凝固酶新生霉素敏感试验DNA酶触酶试验(Catalase):原理:2H2O2O2+2H2OCatalasePOSStaphylococcusCatalaseNEG注意事项:1、细菌、试剂新鲜2、血琼脂上菌落不宜作此试验3、阴、阳性对照凝固酶试验(Coagulase)玻片法:结合凝固酶(凝集因子)纤维蛋白原—纤维蛋白试管法:游离凝固酶凝血酶原—凝血酶类物质CoagulaseNEGCoagulasePOSStaphylococcusaureus阳性胶胨状阴性液体状DN

5、A酶原理:DNA酶水解DNA长链,形成数个单核苷酸组成的单核苷酸链。长链DNA被酸沉淀、单核苷酸溶于酸而出现透明环。操作:将待测菌点种于DNA琼脂平板上,35℃培养24-48h,在细菌生长物上加试剂(菌落浸没)试剂:1mol/L盐酸注意事项:培养基表面凝固水烤干避免细菌蔓延状生长葡萄球菌生物学特性菌落特点:血平板上中等大小,光滑,凸起,边缘整齐、金黄色、黄色或白色,溶血或不溶血的菌落麦康凯上红色菌落CLED上黄色菌落中国兰上不生长金黄色葡萄球菌菌落特点:光滑、完整微隆起、半透明,β-溶血,奶黄色、橙黄色、柠檬

6、色、白色,(脂溶性色素)表皮葡萄球菌菌落特点:菌落相对较小,2.5~6.0mm,取决于不同菌株,通常不产生色素,某些菌株产生黏液性常黏附在琼脂表面腐生葡萄球菌菌落特点:菌落5~8mm大小,完整,有光泽,不透明、光滑,比前面提到菌种菌落较凸起,约一半菌株产色素,奶油、黄-橙色。腐生葡萄球菌头葡萄球菌孔氏葡萄木糖葡萄镜下特点:G+C、葡萄状排列葡萄球菌生物学特性凝固酶阳性葡萄球菌鉴别试验菌名凝固酶触酶溶血硝酸盐海藻糖半乳糖苷酶金黄色葡菌球菌金黄色亚种+++++-金黄色萄淘球菌厌氧亚种+-+---施氏葡萄球菌聚集亚

7、种++++-ND中间葡萄球菌++d+++海豚葡萄球菌++++-ND水獭葡萄球菌++++++猪葡萄球菌d+-++-凝固酶阴性葡萄球菌鉴别试验菌名色素溶血碱性磷酸酶吡咯烷酮酶脲酶Β葡萄糖苷酶VP新生霉素多粘菌素B表皮葡萄球菌-(d)+-+(d)+SR溶血葡萄球菌d(+)-+-d+SS里昂葡萄球菌d(+)-+d++Sd腐生葡萄球菌d---+d+RS木糖葡萄球菌d-dd-+dRS头状葡萄球菌-(d)----dSS孔氏葡萄球菌-(d)----dRS人葡萄球菌d---+-dSS鉴定流程菌落观察:金黄色、黄色或白色,溶血或

8、不溶血涂片染色:G+球菌、单个、成双,葡萄状排列触酶试验++凝固酶试验-金葡菌中间葡萄猪葡萄施氏葡萄海豚葡萄水獭葡萄葡萄糖O/FCNS微球菌属+-微球菌属分类微球菌属共9个菌种代表菌为藤黄微球菌微球菌属生物学特性菌落特点:血平板上小、圆形、凸起、光滑不透明菌落,可产生黄色、粉红色菌落。镜下:GC+、多为四联、八叠状排列藤黄微球菌菌落:BA上菌落小于葡萄球菌,呈圆形、突起、光滑、不透明黄色菌落镜下:G

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