资源描述：
《茶多糖 TGC 的结构表征》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、178中国科学C辑生命科学2004,34(2):178~185*茶多糖TGC的结构表征1)**周鹏谢明勇聂少平(南昌大学食品科学教育部重点实验室,南昌330047)王小如(厦门大学现代分析科学教育部重点实验室,厦门361005)摘要采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析均一茶多糖TGC的单糖组成,并与NMR,圆二色谱、紫外扫描等其他分析方法结合,对茶多糖TGC的一级结构及其在溶液中的构象加以探讨.结果表明:茶多糖TGC是由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖等6种单糖组成,它在水溶液中应以有序的螺旋构象存在,其一级结构为:主链的骨架
2、结构由鼠李糖、葡萄糖和半乳糖构成,这3种单糖都有可能连接支链,不接支链时其连接方式为β1→3,支链主要由阿拉伯糖构成,其连接方式可为β1→2,β1→3,β2→3三种,木糖以β1→存在于主链和支链的末端.关键词GC-MSNMR茶多糖一级结构构象[3,4]多糖是来自于自然界的天然大分子物质,现已微镜(AFM)、投射电子显微镜(TEM)、圆二色谱[5~7]证明其具备诸多的生物活性.虽然对于糖类的研究(CD)、X射线衍射等手段目前已成功应用于多糖[1]较核酸及蛋白质而言还处于落后状态,但是近年来的构象研究.仍然取得了巨大的进展,主要表现在多糖的结构及利用酶
3、的专一性和高效性,酶学方法已成为糖构效关系的研究方面.生物大分子的空间构象最终链结构分析中的一种重要手段.试剂阵列分析方法[8]决定其生物活性,因此多糖空间构象的研究对于解(reagentarrayanalysismethod,RAAM)的发展,使析其在生命过程中的作用具有极为重要的意义.随酶解方法的操作简化,结合计算机技术可直接得到[9~11]着现代生物学手段及现代分析仪器在糖类研究中的多糖的结构信息.气相色谱(GC)、液相色谱[12,13]应用,以精确三维结构知识为基础揭示重要生命活(LC)及毛细管电泳方法目前广泛用于分析单糖[2]动的规律已达
4、到前所未有的广度和深度.原子力显及其衍生物的分离、鉴定和糖类纯度的检测.气质联2003-07-23收稿,2003-11-18收修改稿*教育部高等学校骨干教师资助计划项目及江西省主要学科学术和技术带头人培养计划项目资助**联系人,E-mail:myxie@ncu.edu.cn1)现在单位:诺维信(中国)投资有限公司,北京100085SCIENCEINCHINASer.CLifeSciences第2期周鹏等:茶多糖TGC的结构表征179用(GC-MS)技术可以同时提供保留时间和荷质比信采用尺寸为30m×0.32mm×0.25µm的石英毛细管[11]息,
5、在分析多糖的全甲基化产物、Smith降解产物柱;其工作条件为:(ⅰ)以30℃/min的升温速率将温中具有独特的优势.高效液相色谱-电喷雾电离质谱度从50℃升至140℃,然后以5℃/min的升温速率再(HPLC-ESI-MS)联用技术已被用于多糖分子量的测将温度从140℃升至190℃;(ⅱ)所用载气为氦气;定.基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-MS)具有极(ⅲ)注射器温度维持在250℃;(ⅳ)气-质谱联接通高的质量上限,能将极大的生物分子电离,又不使分道温度为250℃;(ⅴ)离子化模式采用电子冲击;(ⅵ)[14,15][16]子破裂分解,Garo
6、zzo等人对MALDI-MS与分电子倍增器电压为1850V;(ⅶ)电子能量为70ev.子排阻色谱的联用进行了尝试.核磁共振(NMR)技J-180圆二色谱仪(CD)为日本Jasco公司生产,检术已被用于探讨多糖结构中糖苷键的构型以及重复测温度为室温,狭缝宽度为1nm,扫描速度为100＋结构中单糖的数目,二维NMR技术也可用于鉴定多nm/min,扫描范围为180~400nm.UNTY500核磁共糖的纯度,计算机专用程序CASPER(computerassisted振仪(NMR)为Varian公司生产.DU7400紫外可见分spectrumevaluat
7、ionofregular)可以对采集的NMR数据光光度仪为Beckman公司生产.HP-1100液相色谱仪进行分析处理,并可根据得到的信号进行搜索进而模为惠普公司生产,联接G1315BDAD二极管阵列检[17,18]拟出多糖结构.平板电泳技术可用于糖链的纯度测器.ZK-82A型烘箱为上海实验仪器厂生产.THZ-850和结构分析,又可对糖的酶解产物进行定性定量分析.恒温水浴振荡器为嘉兴电热仪器厂生产.Milli-Q超荧光基团标记的糖的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGEFS)纯水仪为Milli-Q公司生产.[19]技术通过对糖类分子的还原端羰基进行荧光基团衍
8、(2)试剂及实验材料:盐酸羟胺、乙酸酐、吡啶、生化标记后进行电泳分析,可把电泳凝胶上的糖蛋白硫酸、碳酸钡、高碘酸钠、乙酸、
