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1、田枫等增龄对SAM小鼠脑线粒体DNA氧化损伤的影响第6期·671·增龄对SAM小鼠脑线粒体DNA氧化损伤的影响田枫刘新文张宗玉(北京大学医学部生化与分子生物学系北京大学衰老研究中心,北京100083)〔摘要〕目的探讨增龄对SAM小鼠脑线粒体DNA(mtDNA)缺失、活性氧自由基水平及脑组织总抗氧化能力的影响。方法SAM2P/8和SAM2R/1小鼠分别分为三组幼年组(015月龄)、青年组(2月龄)和老年组(12月龄)各6只。用PCR方法测定脑组织线粒体DNA缺失、用化学发光法测定总抗氧化能力及活性氧自由基。结果随增龄,SAM2P/8小鼠
2、脑组织线粒体DNA缺失增加,线粒体活性氧自由基水平升高,脑组织总抗氧化能力下降。结论随增龄,SAM2P/8小鼠脑组织氧化损伤增加,可能是导致其记忆学习障碍的原因之一。〔关键词〕线粒体DNA;SAM小鼠;氧化损伤〔中图分类号〕Q731〔文献标识码〕A〔文章编号〕100529202(2005)0620671203EffectofagingoncerebralmitochondrialDNAoxidativedamageofSAMmiceTIANFeng,LIUXin2Wen,ZHANGZong2Yu1ResearchCenterforAg
3、ingofBeijingUniversity,Beijing100083,China【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectofagingoncerebralmitochondrial(mt)DNAdeletions,activeoxygenradicallevelandtotalanti2oxidizationabilityofbraintissues1MethodsSAM2P/8andSAM2R/1micewererespectivelydividedintothreegroups,i1e1inf
4、antgroup(015month2old),youthgroup(2month2old)andseniorgroup(12month2old),withsixmiceineachgroup1CerebralmtDNAdeletionsweredeterminedbyPCRwhiletotalanti2oxidizationabilityandactiveoxygenradicallevelsweredetectedbychemicalluminescentmethod1ResultsWithaging,mtDNAdeletionsi
5、nthebraintissueofSAM2P/8miceincreasedwithanelevatedlevelofmtactiveoxygenradicallevelandloweredtotalanti2oxidizationability1ConclusionsTheincreaseofoxidativedamageinbraintissueofSAM2P/8micewithageingmightbeoneofthecausesresultinginmemorylearningimpediment1【Keywords】Mitoc
6、hondrialDNA;SAMmouse;OxidativeDamage线粒体氧化损伤是生物衰老及老年病发生的主要原因之1材料与方法一。已有许多实验证实线粒体DNA(mtDNA)损伤随增龄积111实验动物SAM2P/8快速老化模型小鼠及同源正常老化〔1〕累,mtDNA损伤积累与生物衰老之间存在高度的相关性。的SAM2R/1小鼠,由北京大学医学部实验动物科学部提供,清〔2〕Zeng等以脑缺血小鼠为研究对象表明随增龄mtDNA缺失程洁级。SAM2P/8和SAM2R/1小鼠分别分为3组,幼年组(015〔3〕度增加。Trifunovic等培育
7、了DNA聚合酶校对结构域突变的月龄)、青年组(2月龄)和老年组(12月龄),每组6只动物,雌基因敲除小鼠,其研究结果发现,基因敲除小鼠细胞内mtDNA雄各半。断髓处死小鼠,并迅速取出脑组织,液氮速冻,-80℃突变明显积累,线粒体功能下降,小鼠出现早衰,寿命缩短。从冰箱保存。而证明了mtDNA损伤是动物衰老的直接原因。此外,有人认112PCR引物由北京三博远志生物技术有限公司合成。引为,mtDNA氧化损伤增加导致的线粒体氧化磷酸化功能障碍、物合成参照文献〔6〕。L8805(5'2TACCAAGGCCACCACACTCC2细胞能量代谢削弱
8、,也会对能量需求较高的中枢神经系统产3',8805-8824)和H9311(5'2AGTATCATGCTGCGGCTTCA23',生影响,可能导致神经退行性病变。已有一些实验表明,931129330)用于扩增非缺失mtD
