氟化物对体外器官培养人牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达影响68608

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1、第24卷第4期西安交通大学学报(医学版)Vol.24No.42003年8月JournalofXi’anJiaotongUniversity(MedicalSciences)Aug.2003氟化物对体外器官培养人牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响侯铁舟,李志丹,王 强,李相如,王 红,陶 洪(西安交通大学口腔医学院口腔内科,陕西西安 710004)摘要:目的 观察氟对牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响。方法 采用人牙胚体外器官培养模型,组织学观-1-1察低浓度(10mg·L)和高浓度(25mg·L)氟对细胞增殖的影响;免疫组

2、织化学及图像分析技术检测氟对细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和细胞增殖核抗原(PCNA)表达的影响。结果 氟处理组细胞增殖受抑,cyclinD1和PCNA的表达显著降低(P<0.01)。结论 氟化物可能通过抑制cyclinD1和PCNA的表达引起细胞增殖抑制,导致牙胚发育异常。关键词:氟化物;牙胚;器官培养;细胞周期蛋白D1;细胞增殖核抗原中图分类号:R781文献标识码:A文章编号:167128259(2003)0420302204Effectoffluorideonhumantooth2germcellprolifera

3、tionandexpressionofrelatedregulatorsinorgancultureinvitroHouTiezhou,LiZhidan,WangQiang,LiXiangru,WangHong,TaoHong(DepartmentofStomatologicalMedicine,StomatologicalCollegeofXi’anJiaotongUniversity,Xi’an710004,China)ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectoffluorideon

4、humantooth2germcellproliferationandexpressionofrelatedregulators.MethodsByusinganorganculturemodelofhumantooth2germinvitro,the-1-1effectsoflow(10mg·L)andhigh(25mg·L)concentrationsoffluorideoncellproliferationwereobservedhistologicallyandtheexpressionofcyclinD1andpro

5、liferatingcellnuclearantigen(PCNA)weredetectedbyimmunohistochemistrystainingandimageanalysistechnique.ResultsFluorideinhibitedcellproliferationandevidentlydecreasedtheexpressionofcyclinD1andPCNA.ConclusionFluoridemayinhibittooth2germcellproliferationbyinhibitingthee

6、xpressionofcyclinD1andPCNA,whichleadstotheabnormaldevelopmentofteeth.KEYWORDS:fluoride;tooth2germ;organculture;cyclinD;PCNA  氟对人体健康的影响有其特殊性,适量时可以有1 材料和方法效促进骨量增加、降低龋病发病率,过量时则会引起氟化物中毒。氟斑牙是氟化物中毒最早出现的特异1.1 试剂与设备 BGJb培养基(Gibco,USA);L2抗性体征,是牙胚发育期间机体摄入过量氟引起的牙齿坏血酸(Sigma,USA

7、);氟化钠(分析纯,西安化学试剂发育矿化缺陷。牙胚发育是细胞增殖和器官形成的厂);PCNA单克隆抗体(Calbiochem,USA);CyclinD1过程,过量氟与牙胚细胞增殖的研究资料较少。本实单克隆抗体(SantaCruz,USA);SABC免疫组化试剂验将处于增殖期的完整人牙胚进行体外培养,采用组盒,DAB显色试剂盒(武汉博士德生物有限公司);24织学、免疫组化和图像分析技术观察氟对人牙胚细胞孔培养板(Gibco,USA);YT2875型超净工作台(苏州增殖及相关调控蛋白cyclinD1和PCNA表达的影响,净化设备厂)

8、;CO2孵育箱(FormaScientific,USA);旨在探讨氟在牙齿发育过程中毒性作用的可能机制,图像分析系统(Qwin550cw,德国LEICA公司)。为氟斑牙的防治提供理论依据。1.2 实验分组 以右侧人乳牙牙胚作为实验组,左侧同名牙胚作为对照组。对照组:培养液为B

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