动物疫病监测诊断规范化工作程序

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1、李春四川省动物疫病预防控制中心2011年10月动物疫病监测诊断规范化程序及兽医系统实验室考核准备工作第一部分、动物疫病监测诊断规范化程序监测任务制定样品采集与送检实验室检测样品流转检测记录检测报告统计分析一、监测任务的制定国家、省、市、县逐级制定监测计划并组织实施《2011年四川省动物疫病监测计划》《2011年四川省口蹄疫等主要动物疫病流行病学调查方案》监测原则——“五结合”省级监测与地方监测相结合定点监测与全面监测相结合日常监测与集中监测相结合抗体监测与病原学监测相结合疫病监测与流行病学调查相结合监测模式——“四

2、定”模式定点、定期、定量、定性二、样品采集与送检动物疫病采样技术规范DB51/T949—2009动物疫病实验室检验采样方法NY/T541-2002采样原则：适时、典型、无菌、适量和生物统计根据不同的检测要求采集不同样品（血液、组织器官、内容物、分泌物、排泄物或其他材料）无法估计病因时，可进行系统全面的样品采集进行流调、抗体监测、健康评估或环境卫生检测时，样品数量应满足生物统计学的要求死亡畜禽，采集样品夏天不得超过6h，冬天不超过24h疑似炭疽，禁止解剖；一般采耳静脉或割耳尖2.1样品的采集2.1.1血样的采集根据动物

3、种类确定采血部位。选用真空管、无菌注射器、无菌采血瓶、毛细管的采血，采血量须满足试验需要若需抗凝血，则视实验要求选择抗凝剂。如需血清，则待血凝固后无菌分离血清并分装于灭菌瓶（管）中。3.8%柠檬酸钠溶10%EDTA溶液0.1%肝素钠动物采血部位动物采血部位猪耳静脉、前腔静脉鸡翅静脉、心脏牛耳静脉、颈静脉、尾静脉鸭鹅翅静脉、脚蹼静脉、心脏羊耳静脉、颈静脉兔耳静脉、心脏2.1样品的采集?2.1.2家禽咽喉、泄殖腔拭子采集棉签插入后捻转2-3圈，两个拭子一并置入盛0.8mL左右的生理盐水或0.01MPBS（含双抗）的1.5

4、mLEP管中。其它动物拭子采集类似。2.1.3实质脏器的采集肺脏、肝脏、脾脏、扁桃体、淋巴结、脊髓。无菌采集脏器组织块放入无菌容器内。每块组织应单独放在无菌容器中，注明采样动物名称、日期、组织。注意防止组织间互相污染。2.1样品的采集2.1.4其它样品采集皮肤、奶样、精液、胚胎、肠内容物、粪样、尿液、脑、脊髓等2.1.5注意事项个人防护（炭疽等人畜共患病）采样后的无害化处理畜禽及其产品无害化处理采样废弃物无害化处理环境消毒采样器械消毒样品外包装消毒2.2样品包装液体：离心管封口瓶有形病料：塑料自封袋，大袋套小袋，分病

5、例包装《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》2.3样品标识管上、瓶上、袋上都要标识清楚，用防脱色记号笔样品编号要与“采样单”对应，惟一性、可追溯性采样单一式三份（被采样单位、采样/送检单位、检测单位）采样单记录内容包括：动物场（厂）地址、动物种类、群体规模、发病日期、临床症状、治疗用药、样品编号、采样人、采样日期等。2.4样品保存抗凝血：4-8℃冷藏，不超过1w。血清：短时间可4-8℃冷藏冷藏，否则须-20℃以下保存病毒检测样品：短时间可冷藏，否则须-20℃以下保存，无条件的可置灭菌50%甘油-PB

6、S液中冷藏，不宜反复冻融。细菌检测病料：冷藏，不宜冷冻，可置灭菌液体石蜡或30%甘油-PBS液/盐水中冷藏。动物疫病检测用样品一般存放条件样品名称检测项目贮存温度保存时间其它事项血清血清学检测4℃5天血清解冻时，先放4℃冰箱解冻，再放室温。禁止反复冻融-20℃以下三个月奶样品血清学检测4℃5天细菌学检测4℃5天病毒学检测24h内送检分泌物、排泄物细菌学检测4℃5天病毒学检测4℃尽快送检粪便鼻咽拭子细菌学检测4℃5天病毒学检测-30℃以下24h内送检加含抗生素PBS病毒保存液组织样品病理组织学4℃或室温放入10％福尔马

7、林溶液中固定细菌学检测4℃或0℃以下5天病毒学检测-30℃以下-70℃以下24h内送检-70℃下可长期保存可加30～50％甘油生理盐水或PBS病毒保存液2.6样品送检2.6.1样品运输密封、无泄漏、冷藏保存运输，2.6.2样品送检“送检单”或“委托检测书”一式两份（送检单位、检测单位）要有详细的“采样单”《高致病性动物病原微生物菌（毒）种或者样本运输包装规范》三、实验室检测检测记录检测操作任务下达收样检测报告三、实验室检测3.1.1样品的接收按送检方出具的“抽样登记表”或“检测委托书”等送检凭证检查样品状态，清点数量

8、，核实无误后，办理接收手续,填写“送检样品登记表”3.1.2样品的编号、登记样品包装外贴XX-XXX编号，并注明样品类别、样品数、要求检测项目的总标签；该样品编号作为唯一性标识，直至检测工作结束。3.1样品流转3.1样品流转3.1.3样品的发放按程序要求填写检测任务书，送相应检测室检测主检人员领取样品，进行样品交接签字，再次对样品进行核实凡委托