细胞工程中研究中的基础技术手段

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1、细胞工程结课论文细胞工程中研究中的基础技术手段生物工程学院生技1101细胞工程中研究中的基础技术手段摘要：细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的方法，在细胞水平上改变细胞内的遗传物质并使之增殖，以获得新型牛物或特种细胞产品的一门综合性科学技术。细胞工程中的技术手段是细胞工程研究的基础，常用的技术手段有动植物细胞培养、细胞核移植、细胞融合技术等，本文主要对细胞工程研究中的常用方法做一个综述。关键词：细胞工程、细胞培养、核移植、细胞融合细胞工程生物工程的一个重要方面。它是指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过类似于工程学的步骤，在细胞整体水平或细胞器水平上，按人们的意愿来改变

2、细胞内的遗传物质并使之增殖，以获得新型&物或特种细胞产晶的一门综合性科学技术⑴。当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。1细胞培养技术细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术，不论对于整个牛物工程技术还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程。细胞培养主要包括植物细胞培养、动物细胞培养、微生物细胞等。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。1.1

3、植物细胞培养植物细胞培养是将离体的植物器官、组织或细胞，在培养了一段时间后，会通过细胞分裂，形成愈伤组织。由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体。⑵依据的原理是植物细胞的全能性。植物细胞培养的过程⑶分为：1.组织培养：诱发产生愈伤组织，如果条件适宜，可培养出再生植株。用于研究植物的生长发育、分化和遗传变异；进行无性繁殖;制取代谢产物。2.悬浮细胞培养：在愈伤组织培养技术基础上发展起来的一

4、种培养技术。适合于进行产业化大规模细胞培养，制取植物代谢产物。3・原生质体培养:脱壁后的植物细胞称为原生质体(protoplast),其特点是：①比较容易摄取外来的遗传物质，如DNA；②便于进行细胞融合，形成杂交细胞；③与完整细胞一样具有全能性，仍可产生细胞壁，经诱导分化成完整植株：4.单倍体培养：通过花药或花粉培养可获得单倍体植株，经人为加倍后可得到完全纯合的个体。1.2动物细胞培养动物细胞培养（animalcellculture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶），然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。动物细胞体外生长

5、的类型有：贴附型和悬浮型，大多数哺乳动物细胞的体外生长方式采用贴附型，瘤细胞、淋巴细胞等采用悬浮型生长方式。⑷体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。⑸动物细胞培养的基本过程：幼龄动物…〉剪碎组织…〉胰蛋白酶处理…〉细胞培养动物细胞培养的过程一般分为（分离）和（培养）两个阶段，细胞培养需要理想的气体环境，多数细胞需要氧张力才能生长。氧含量应略低于大气状态，二氧化碳

6、为细胞生长所需也是细胞代谢产物，与维持培养基PH值相关。其中细胞培养又包括原代培养和传代培养。⑹2细胞核移植技术细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中,使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。⑺受体大多是动物的卵子。因卵子的体积较大，操作容易，而且通过发育，可以把特征表现出来，因此细胞核移植技术，主要是用来研究胚胎发育过程中，细胞核和细胞质的功能，以及二者间的相互关系;探讨有关遗传，发育和细胞分化等方面的一些基本理论问题。⑻细胞核移植示例图2

7、.1核移植的主要步骤:日本北九州市圣母医院科学家田中笃等人在实验中正是通过这种细胞核移植"技术实现二合一“混卵,啲目标，让大龄妇女异常卵子细胞重新焕发活力。1、他们从多位接受试管受孕的大龄妇女体内采集了31个卵子细胞，并将其中的细胞核提取出来。2、再将这些细胞核注入到年轻妇女的卵子细胞质中。这些捐献卵子的年轻妇女年龄都在35岁以下，身体健康。从移植的结果看，共有25个“混卵"细胞可以存活。这25个“混卵”细胞与精子相结合后,其中有7个“混卵"细胞形成了初期的胚胎，成功率为28%。此前未经修复的卵了细胞受精成功率仅为