临床检验技师-临床血液学检验(2019)讲义第四章_血细胞化学染色的临床应用

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1、第四章血细胞化学染色的临床应用一、过氧化酶染色二、过碘酸-雪夫反应三、碱性磷酸酶染色四、氯乙酸AS-D蔡酚酯酶染色五、Q-醋酸荼酚酯酶染色六、酷酸AS-D蔡酚酯酶染色和氟化钠抑制试验七、碱性丁酸蔡酚酯酶染色八、酸性磷酸酶染色九、铁染色细胞化学染色是以细胞形态学为基础，运用化学、生物化学等技术对细胞内的各种化学物质（酶类、脂类、糖类、蛋白质、铁、核酸）进行染色观察，做定性、定位、半定量分析的方法。常规染色中使用较多的是酶类、糖类和铁染色。1•过氧化酶（peroxidase,POX）染色（1）原理：过氧无色联

2、苯胺+H;0:•八亠却‘蓝色联苯胺+2HQ化物酶

3、定位于胞浆（2）结果判断：阳性结果为胞质内出现棕黑色颗粒。①（-）无颗粒；②（土）颗粒细小、弥散分布；③（+）颗粒较粗、局灶分布；④（++）颗粒粗大、密集、分布较广，占胞质的1/2〜2/3；⑤（+++）颗粒粗大、成团块，儿乎布满胞质；⑥（++++）颗粒成团块状，充满胞质，并覆盖胞核。图A呈阳性反应的嗜酸性粒细胞，颗粒粗大（POX染色）图B、C呈不同阳性反应强度的细胞（POX染色）（3）正常血细胞的染色反应1）粒细胞系统：原始粒细胞>中性成熟粒细胞（分化差-

4、，分化好+）（细胞衰老阳性减弱）嗜酸性粒细胞阳性反应的程度最强（颗粒）嗜碱性粒细胞呈阴性反应2）单核细胞系统：原始单核细胞呈阴性反应，幼单核细胞和单核细胞呈弱阳性反应，阳性颗粒少而细小，弥散分布，有的也可呈阴性反应。3）其他细胞：淋巴细胞、巨核细胞、血小板、幼红细胞、浆细胞和组织细胞均呈阴性反应。有的吞噬细胞可呈阳性反应。主要关系粒、单、淋（4）临床意义原始淋巴细胞②白血病细胞急性早幼粒细胞白血病急性单核细胞白血病组组细胞白血病1）帮助鉴别急性白血病的类型：急粒急单急淋原始细胞反应(+)〜(+++)(—)

5、〜(+)(-)阳性颗粒外观一般较多，较粗大少而细小，常弥散分布备注阴性不能排除本病①小型原始细胞小型原始粒细胞2）成熟中性粒细胞过氧化物酶活性的变化①活性增高：可见于再生障碍性贫血、感染（特别是化脓菌感染）、急性淋巴细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病。②活性减低：可见于急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、骨髓增生异常综合征、放射病及退化性中性粒细胞。2•过碘酸-雪夫反应（糖原染色）（poriodicacid-Schiffreaction,PAS）（1）原理：紫红色化台物过碘酸多糖（乙二醇基

6、）定位于胞浆（2）结果判断：阳性结果为胞质内出现红色颗粒、块状或呈弥漫状红色。①（-）胞质无色，无颗粒。②（+）胞质淡红色或有少量红色颗粒，通常V10个颗粒。③（++）胞质红色或有10个以上红色颗粒。④（+++）胞质呈暗红色或有粗大红色颗粒，可出现红色块状。⑤（++++）胞质呈紫红色或有粗大红色块状。不用掌握具体分级（3）正常血细胞的染色反应1）粒细胞系统：原始粒细胞>中性成熟粒细胞（分化差-，分化好+）嗜酸性粒细胞阳性（颗粒之间胞浆呈红色）嗜碱性粒细胞呈阳性反应（颗粒着色）原粒胞浆光镜下无颗粒。所以P0

7、X阴性。考察喜欢出这类题，哪个最强或最弱。嗜酸阳性反应的程度强。酸梅主要两点；粒系相关的酶；随着细胞成熟，阳性反应增强。2）红细胞系统：幼红细胞和红细胞均呈阴性反应。3）单核细胞系统：分化差的原始单核细胞呈阴性，其他单核细胞呈阳性。绝大多数阳性，呈细颗粒状。有吋在胞质的边缘处阳性反应颗粒较粗大。4）淋巴细胞：大多数淋巴细胞为阴性反应，少数淋巴细胞可呈（+）反应。5）巨核细胞和血小板：巨核细胞为阳性反应，阳性反应物质为红色颗粒状，有时为红色块状。血小板为阳性反应，阳性反应物质为细颗粒状，有时为红色小块状。6

8、）其他细胞：浆细胞一般为阴性反应，少数可呈阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状。巨噬细胞可呈阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状。止常骨髓象PAS染色呈不同反应的细胞1-晚幼红细胞2-嗜酸性粒细胞3-中性分叶核粒细胞4-单核细胞（4）临床意义1）红细胞系统：红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应强且阳性率高,M至红细胞也呈阳性反应。急性红白血病时幼红细胞可呈阳性反应某些红系良性疾病，如缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血(又称地中海贫血)、巨幼细胞性贫血、再生障碍性贫血中的幼

9、红细胞常呈阴性反应，个别细胞可呈阳性但反应弱。2)口细胞系统：急性淋巴细胞白血病时白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色粗颗粒状或红色块状，底色不红;急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色；急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布，有时在胞浆的边缘处颗粒较粗大。急粒急单急淋阳性颗粒外观呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色红色细颗粒状，弥