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时间:2019-10-17
《分子生物学教学资料第12章重组》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、在配对阶段,染色体间发生遗传交换,这种现象称为交换(crossingover),它是同源重组(homologousrecombination)的结果Z一Topic1:ModelsforHomologousRecombinationHollidaymodel(Holliday模型)分支移位、链侵入、Holliday联接体是同源重组的核心1、重组是通过在每条DNA分子上同样区域引入一个缺口(nick)而始发的2、然后,链侵入产生的关键的重组中间体-Holliday联接体3、重组过程的完成需要切断交叉点附近的DNA链以拆分Holliday联接体Double-st
2、randbreak(DSB)repairmodel(双链断裂修复模型)同源重组经常因DNA双链断裂而启动1、始发事件是两条DNA分子中的一条发生双链断裂(double-strandbreak,DSB),而另一条保存完整2、DNA裂解酶顺序降解断裂的DNA分子以产生单链DNA区域3、单链DNA末端侵入到未断裂的同源DNA双螺旋中4、入侵端以3'端结尾,它们可以作为合成新DNA的引物,以同源DNA双链中的互补链为模板,从这些3'断端开始延长,以重新合成断裂处被破坏的DNA片段5^产生的重组中间体-两个Holliday联接体,以分支移位的方式沿着DNA移动,并最
3、终被切断而结束重组Keystepssharedbydifferentmodels当来自于亲本分子的DNA分子单链区域与同源双链DNA分子互补链配对结合时,发生该配对过程,称为链侵入-strandinvasion链侵入的结果是:两个DNA分子被相互交叉的DNA链联系在一起,这个交叉结构称为Holliday联接体(Hollidayjunction)在Holliday联接体处切断DNA重新生成两个分开的双螺旋DNA,从而完成遗传物质的交换过程,这个过程称为拆分(resolution)一个Holliday联接体可以通过配对碱基连续的解链和配对而沿着DNA移动…■分
4、支移位,(branchmigration)Topic2:Homologousrecombinationproteinmachines—RecBCDpathwayRecBCDhelicase/nuclease促进损伤DNA末端的重组作用于DNA的双链断裂点进而产生单链区RecBCD是由三个亚基组成的,并有DNA解旋酶和核酸酶活性RecAprotein促进链入侵RecA结合在DNA单链后能发现DNA上的序列同在单链DNA上组装并促进链侵入、RuvA识别并结源区并在这些同源区域间形成新的碱基对合到Holliday联接体上,并促使RuvB蛋白结合到这个位点上Ruv
5、ABcomplex促进分支迁移RuvA是一个特异性结合Holliday联接体的蛋口质;RuvBATP酶提供能量,以促进碱基对交换,从而移动DNA分支RuvC解决Holliday联接体RuvC是拆分Holliday联接体的主要核酸内切酶特异性剪切两条同极性的同源DNA链Topic3:Homologousrecombinationineukaryotes(真核细胞的同源重组)在真核细胞中同源重组也是DNA修复和启动受损复制叉所需要的同源重组保证减数分裂屮染色体的分离减数分裂中程序化生成的DNA双链断裂Spoil,该基因编码一个蛋白质可引入染色体DNA的双链断裂
6、进而启动减数分裂重组;Spoil蛋白可以在很多染色体位置上切断DNA,它对序列没什么选择性,但必须发生在减数分裂的特定时期;Spoil蛋白屮一个特异的酪氨酸侧链可攻击磷酸二酯键骨架,从而切断DNA,并在蛋白质与受损的DNA链间生成共价键。Spoil的两个亚基在两个DNA链的相差两个核昔酸出切开,形成一个黏性的双链断裂。Topic4:GeneticConsequencesoftheMechanismofHomologousRecombination(HR)(同源重组机制的遗传结果)同源重组的一个遗传结果是基因转变555525染色体复制义forkcollaps
7、e模板上有DNA损伤DNAlesionmtemplatestrand
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