龚俊的优秀论文

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1、构建a-synuclein原型基因能在大肠杆菌中高效表达的质粒摘耍a-synuclein蛋门在体内界常折叠是帕金森病发生发展的重要原因，从a-synuclein來源的小分子多肽和分子伴侣DJ-1nJ*以抑制a-synuclein的聚集。利用定向PCR技术休外扩增tBGFP和a-synuclein原型的全长基因，将GFP重组到出PBR323改构的V2载体中，得到重组体LG；然后以LG作为载体，以合成的9肽RGGAVVTGR为插入片断进行亚克隆，得到LG9觅组体；最后以LG9为载体，a-synucle

2、in原型为目的基因，进行克隆。偶联蛋白相互作用在细菌中的可视化技术，可以准确快速地用丁•鉴-synuclein蛋白在体内的折叠变化，和作为快速有效地筛选大量突变体的经济简便的方法。促进a-synuclein正确折叠的多肽的应用，将有希望能直接阻断a-synuclein蛋白错误折叠的继续产生，和阻断甚至逆转由异常聚集蛋白所造成的神经损伤。(VisualizationoftheCoupledProteinFoldingandBindinginBacteria)关键词：a-synucleinPD蛋白质折

3、叠GFP克隆AbstractAbstract:Theabnormalfoldingofa-synucleinistheimportantreasonforParkinsondiseaseinthebody.Thepeptideandchaperonescaninhibita-synucleinaggregation.UsingdirectionPCRincreasethefull-lengthgeneofGFPanda-synuclein,insertGFPtotheV2plasmidwhichi

4、schangedfromPBR323andgetthecombinationLG,thenutilizethepeptide(RGGAVVTGR)asinserttorecombineLGtogetLG9.Coningthefull-lengthgeneofc-synucleintoLG9intheend.VisualizationoftheCoupledProteinFoldingandBindinginBacteriacannicetyandrapidlytoidentifytheabnorm

5、alfoldingchangesofa-synucleininthebody,andasasppendinessandavailablyeconomymethodtopickuptheabundanceofmutation.Thepeptidewhichcanimprovingthea-synucleinaggregationmaybeinterdictabnormalfoldingofa-synucleindirectly,evenreversetheneuropathicdamnificati

6、onwhichleadbyproteinaggregation.keywords：a-synucleinPDproteinfoldingGFPclone21.前言31.1帕金森疾病(PD)简介31.1.1PD简介...31.1.2PD研究史31.1.3PD发病机理41」.4PD的治疗方法51.2a-synuclein与PD的研究61.2.1a-synuclein的发1.2.2.a-synuclein的突变与家族性PD71.2.3.a-synuclein的聚集...91.2.4.a-synuclei

7、n的聚集和解聚集的研究101.2.5a-synuclein基因的功能，表达和调节111.3.绿色荧光蛋门（GFP）a-synuclein的研究….…121.3.1绿色荧光蛋白(GFP)121.3.2GFP与a-synuclein的关系142.材料与方法..…152.1.材料152.1.1.实验用基因152.1.2.菌种..152.1.3.试剂..152.1.4酶及其缓冲液152.1.5.主要仪器设备152.2方法162.2.1.缓冲液的配制162.2.2实验方案和路172.2.3感受态细胞的制备1

8、82.2.4目的基因的获得192.2.5质粒载体的构建225.1LG质粒载体的构建225.2・LG9质粒载体的构建2.2.6LG9质粒的提取和鉴定2.2.7载体LG9和冃的基Wa-synuclein的双酗切，鉴定和冋收212.2.8载体和H的基因连接2.2.9重组体的电转化转化2.2.10转化子的鉴定3.结果与分析3」大肠杆菌的生长曲线32质粒的制备..243.3日的基因的获得V3.4转化20202021222420222425253.5鉴定结果……2634.讨论274.1PCR条